猫丘脑腹外侧核与十字沟周围大脑皮层的突触联系——损毁溃变法结合电镜的研究

本文报道用损毁溃变结合电镜观察的方法,研究了猫丘脑腹外侧核(VL)神经纤维束梢在运动皮层的分布。根据猫的大脑皮层4区与十字沟的关系,将此区分为沟前、沟旁及沟后亚区。对各亚区的电镜观察结果表明,VL核的神经末梢主要分布在沟前和沟旁区。在沟前亚区观察到的112个溃变末梢中,78.6％分布在第Ⅲ层,19.6％在第Ⅰ层,第Ⅴ层仅占1.8％。在沟旁亚区也观察到112个溃变末梢,62.％分布在第Ⅲ层,31.2％分布在第Ⅰ层,第Ⅴ层仅6.3％。溃变末梢在沟后亚区分布较少,只观察到33个,第Ⅰ层占51.6％,第Ⅲ层为42.4％,第Ⅴ层为6.0％。3个亚区的溃变末梢有75％分布在树突棘上,25％在树突梗(shaft)上,均为非对称型突触。6区内溃变末梢大多分布在第Ⅲ层内,均与树突棘形成非对称型突触,在3a区内未见溃变末梢。

5-羟色胺免疫阳性纤维和终末在大鼠舌下神经伸、缩舌肌运动神经元的分布

5-羟色胺（5－HT）参与舌和面口部精细运动的调节。5－HT对舌下神经运动神经元功能的调控表现为兴奋性作用。本文首先采用免疫组化方法，在光镜下观察了大鼠舌下神经核内5－HT免疫阳性纤维的形态和分布特征。又进一步采用荧光逆行追踪结合固定脑片细胞内LuciferYellow染色和荧光免疫组织化学染色，通过共聚焦激光扫描显微镜观察了伸舌肌（颏舌肌、颏舌骨肌）和缩舌肌（茎突舌肌）运动神经元与5－HT免疫阳性纤维及其终末的解剖学关系。结果证明：舌下神经核有较丰富的5－HT阳性纤维，以尾侧段的背侧部和吻侧段的腹侧部较为密集；根据纤维及其膨体的形态特征，本文将此阳性纤维分为三种类型。5－HT免疫阳性膨体样纤维及其终末与舌下运动神经元的胞体、树突分枝和轴丘及轴突起始段形成紧密接触；这些接触多呈不均匀的簇状（由2～7个紧密接触点组成）分布。定量分析发现：在额舌肌神经元和茎突舌肌神经元，除少量分布在胞体（密度为3．4～6．7／1000μm2）外，主要分布在近段和中段树突分权处附近；但是在颏舌骨肌神经元则集中分布在跑体（密度为10．8～17．6／1000μm2）和近侧树突上。以上所见提示：5－HT对舌下神经核整体行为的调节在不同功能的亚核可能有所选择；

荧光逆行追踪结合离体固定脑片细胞内Lucifer Yellow染色和荧光免疫组化──共聚焦激光扫描显微镜观察

本文介绍一种由多种方法组合的技术，包括荧光素（FastBlae）逆行追踪．离体固定脑片细胞内LuciferYellow染色、荧光免疫组织化学染色和共聚焦激光扫描显微镜观察。通过这项组合技术．可以在1μm厚度的光学切片和连续光学切片三维重构图象中同时显示传出神经元的结构和免疫阳性传入纤维及其终未．进而可判断两种成分之间的联系。在单细胞水平的突触学研究中．此项技术提供了一个简单、有效的定性和初步定量相结合的实验方法．

大鼠舌下运动神经元的突触学研究

本文采用荧光素逆行标记结合固定脑片细胞内染色、光转化和电镜技术 ,从单细胞水平观察和定量分析了大鼠舌下神经核颏舌肌运动神经元表面的突触类型、终末覆盖率和发生率。在细胞内染色的颏舌肌神经元胞体及其近、中和远段树突上观察到的终末类型主要有 4种 :即 S型、F型、P型和 C型终末。S型终末含有球形囊泡 ,与突触后成分主要形成非对称型突触 ;而 F和P型终末含有扁平囊泡和多形囊泡 ,形成对称型突触 ;C型终末以其特有的与突触后膜紧密相邻的终末下池 ( Subsynapticcistern)为特征。在胞体、近段树突 (直径 :9～ 4 μm)、中段树突 (直径 :4～ 2 μm)和远段树突 (直径 :<2 μm)表面 ,均具有 S型、F型和 P型终末 ,而 C型终末却只分布在胞体和中段树突上。各种类型终末以簇状形式 (由 2～ 7个相同或不相同类型的终末组成 )分布在细胞膜上。定量分析的结果显示各种类型终末的发生率、数量百分比和覆盖率具有一定的分布规律 ,即近段树突的终末总覆盖率和发生率最高 ,随着树突直径的减小而下降 ;在胞体和近段树突上 ,F型终末的数量百分比和覆盖率高于中段树突和远段树突 ;而 S型终末在中段树突和远段树突的数量百分比和覆盖率高于胞体和近段树突。这些定量资料为舌下运动神经元突触传入的空间整合机制的研?

荧光逆行追踪结合离体固定脑片细胞内染色技术

本文介绍一种简便易行并可在光、电镜下研究单个神经元形态和神经元回路的方法。此法主要包括荧光逆行标记、固定脑片细胞内电泳ＬｕｃｉｆｅｒＹｅｌｌｏｗ和ＤＡＢ光转化三个步骤。它主要具有以下优点；（１）利用送行追踪确定神经元投射部位；（２）进一步细胞内注射可充分显示神经元的树突构筑，尤其是远端树突和树突棘；（３）经ＤＡＢ转化的神经元形象能长久保存，克服了荧光易褪色的缺点，可供详细观察和分析；（４）转化后的细胞，因已经过良好固定，结构保存较好；故可在电镜下进一步观察研究；（５）结合免疫荧光，通过Ｃｏｎｆｏｃａｌ显微镜可更清晰地观察ＬｕｃｉｆｅｒＹｅｌｌｏｗ标记的细胞与其它神经纤维的联系；（６）此外还可用于病理检查的标本，研究人体脑组织神经元的形态特征。为此，此方法不失为一种研究单个神经元形态（尤其是树突构筑）和神经元回路的良好方法。

猫中薛氏上回与丘脑及其它皮层下结构的联系

本文报道采用HRP-TMB法对猫中薛氏上回的各皮层区域(5、7、LS、21、19区)与皮层下各结构的传入和传出联系作了比较全面的研究。中薛氏上回各皮层区均与同侧丘脑的枕核(PUL)、后外侧核(LP)、后核(PN)以及中央内侧核(NCM)、旁中央核(PC)、中央外侧核(CL)联系。该回前部还与腹前核(VA)、腹外侧核(VL),背外侧核(LD),后核群(PO)以及中央中核(CM)、束旁核(Pf)存在联系。19、21、LS区都与外膝体的B层(GLB)和板间内侧核(MIN)联系。上述皮层丘脑联系都是交互的,而且呈一定的区域性分布。在网状核(R)、未定带(ZI)以及外脓体腹核(GLv)中只能见到标记末梢。此外,该回与双侧屏状核、同侧杏仁核、蓝斑以及部分中缝核存在交互联系,而在尾、壳核、顶盖前区、上丘、脑桥核群中只有标记末梢分布。

大鼠运动皮层甘氨酸免疫反应性神经元的分布及其超微结构特征

目的 探讨甘氨酸能神经元 (Gly- ir)在大脑皮层内的分布及特征。 方法 用免疫组织化学与免疫电镜方法 ,在光镜与电镜水平观察甘氨酸免疫反应性神经元在大鼠运动皮层内的分布及其超微结构特征。 结果 甘氨酸免疫反应性神经元均为非锥体细胞 ,在运动皮层内 ～ 层均有分布 ,以 ～ 层较多 , 层最少 ,免疫反应性细胞以小细胞 (41.5 % )及中等大小细胞 (44 % )为主 ,也可见少量梭形细胞 (13.5 % ) ,而大细胞极少 (1% )。这些不同形态与大小的细胞也有层次分布的特征 : 、 层以小细胞为主 ,而 ～ 、 层则以中等大小细胞为主。电镜下 ,甘氨酸免疫反应性神经元呈现中间神经元的特征 :胞体小、核大浆少、核内陷。胞体上既可见具有扁平或多形囊泡的终末形成的对称型突触 (79.7% ) ,也可见含球形、清亮囊泡的终末形成的非对称型突触 (2 0 .3% )。它的树突上也可见这两种突触类型 ,近端树突上与胞体相似 ,以对称型突触为主 ;而远端细小树突 (直径 <1μm)上则以非对称型突触为主 ;呈现树突越细 ,非对称型突触越多 ,而对称型突触越少的特征。在运动皮层内未能找到 Gly免疫反应性终末分布。 结论 首次观察到大脑运动皮层内确实存在甘氨酸能神经元 ,但目前尚不能肯定甘氨酸在皮层内是否具有神经递质的作用 ,

鸡脊髓上行投射在脑干的分布

本文用Nauta法追踪鸡在颈髓半横切后脊髓上行的溃变纤维,观察的结果可知,鸟类动物脊髓有上行纤维直接向丘脑投射,主要终止于丘脑的背外侧核(DL)及背内侧核(DM)的腹侧份。根据比较解剖学的结果认为该区域相当于哺乳类动物的板内核群,是旧脊丘系的一部分,可能与动物的原始感觉有关。脊髓还发出纤维向下丘脑的内细胞层(SI)和外细胞层(SE)投射,该联系可能与动物痛的情绪反应有关。此外,在中脑的顶盖、中央灰质及网状结构中也有溃变标记。在延、桥脑的下橄榄(IO)、迷走背核(NX)、孤束核(S)、外侧网状核(RL)、小细胞网状核(Rpc)及巨细胞网状核(Rgc)等都有溃变标记,通过对这些通路及终末前溃变分布的研究,进一步探讨了哺乳类动物中枢神经系统中在种族发育上部分属于比较古老的结构。

猫运动皮层内联合纤维末梢的电镜观察

本文应用顺行变性结合电镜观察方法,研究在猫运动皮层4γ区内由对侧相应皮层而来的联合纤维末梢的突触联系。实验结果表明,联合纤维末梢呈电子致密型溃变。在4γ区内共观察到92例溃变末梢,它们在第Ⅰ和第Ⅲ层内的分布几乎相等。在第Ⅲ层内还观察到1例溃变末梢与双极细胞的胞体形成直接的非对称型的突触,在第Ⅴ和第Ⅵ层内未观察到溃变末梢。在所观察到的溃变末梢中,77.2％是与树突棘形成突触,21.7％与树突梗形成突触,以及1.1％分布在胞体上,所有这些突触全是非对称型的。

鸡脑干下行投射至脊髓的神经元分布

本文采用在鸡脊髓颈段注射HRP或埋HRP胶块,然后用TMB处理的方法,对中枢神经系统中下行纤维至脊髓的神经元分布进行了研究。观察到鸟类动物存在着一些与哺乳类动物卡相似的神经联系。在间脑部分,下丘脑室旁核大细胞(PVM)是标记细胞较密集的区域,其他还有下丘脑的外细胞层(SE)和内细胞展(SI)以及下丘脑外侧区。中枢内的标记细胞主要集中于红核、中介核和丘间核(ICo)。在延、桥脑段,网状脊髓束是主要的下行通路,脑桥吻端网状核(RPO)和脑桥尾侧网状核(RP)向脊髓的投射相当于哺乳类动物的内侧网状下行系统。小细胞网状核(Rpc)、旁巨细胞网状核等都有下行至脊髓的纤维。另外,蓝斑、蓝斑下核、前庭核、孤束核、外楔核也都有下行纤维向脊髓投射。在中缝核群中我们观察到大量的标记细胞,所以在鸟类动物中可能也存在着中缝核—脊髓这一下行抑制系统。

锥体束神经元在大鼠、树皮层的分布及其与GABA能神经元的关系

以大鼠和树作为研究材料，在脑桥下缘切断一侧锥体束，用HRP逆行标记和计算机三维重构观察锥体束神经元在皮层的分布，以及在光镜和电镜下观察锥体束神经元和GABA能神经元的关系。逆行标记的锥体来神经元主要分布于皮层的运动区和体感区，在枕区、扣带区、颞区和屏状皮层中都有少量分布。树锥体束神经元的总数是大鼠的1．5倍，用计算机重构显示HRP标记的锥体束神经元在脑内吻尾方向上的分布跨度比大鼠小，故其分布范围较大鼠集中，密度较高，且其中大细胞也较多．树的锥体来神经元长径在15μm以上者占74．0％；大鼠则占62．9％。在电镜下观察这些锥体束神经元的胞体上全分布着对称型的突触，其中既有GABA能，也有非GA-BA能者。不同胞体上接受GABA能和非GABA能突触的比例不同，一种较大的胞体上GABA与non－GABA阳性终末相比，前者数量大（13：3）而较小的胞体上则相反，两者的数量相比，为7：18。大鼠和树的锥体束神经元胞体的单位周长上接受的突触数目也不同，树锥体束神经元胞体的10μm单位周长上分布有4．4个突触。大鼠则为3．4个。随着动物进化锥体束神经元接受突触的数目有增加的趋势．

GABA能神经元在大鼠、树运动皮层的分布及其电镜观察

选取进化上种风差异较大的两种动物大鼠和树 为研究材料，在光镜和电镜下观察运动皮层的GABA能神经元．两种动物运动皮层中GABA能神经元的数量、大小及所占的比例都有明显的差异．大鼠运动皮层中GABA能种经元的平均密度为140．0±49．2个／mm2，树 则为214．0±82．9个／mm2，树 的密度明显高于大鼠．大鼠从Ⅱ层到Ⅵ层GABA能神经元的数量逐层降低，而树 从Ⅱ层到Ⅴ层逐层降低，Ⅵ层的密度则高于Ⅴ层，二者密度最高的都是在Ⅱ层．大鼠GABA能神经元的最长在平均为14．2±1．2μm，树 为11．9±1．6μm．大鼠最长径在15μm以上的占29．8％；而树 仅占11．3％，树 的GABA能神经元比大鼠的要小．所以在进化较高等的动物－树 的运动皮层中，GABA能神经元的密度较高，大的GABA能神经元较少．电镜观察显示GABA能神经元表面既接受对称型突触又接受非对称型突触，两种动物非对称型突触的数目都不与GABA能神经元的周长及截面积呈线性相关．对称型突触既有GABA能的也有非GABA能的；大鼠GABA能的及非GABA能的对称型突触，和树 非GABA能的对称型突触都与GABA能神经元的周长及截面积呈线性关系．

猫运动皮层内篮状细胞的立体重构、递质性质及突触分布

用细胞内HRP染色的方法显示该神经元位于猫运动皮层十字沟后,在第Ⅱ/Ⅲ层之间(软膜以下438μm处),胞体截面积为15.6×28.1μm^2,呈多极形,树突呈串珠状,向四周扩展,无侧棘,轴突由胞体下方伸出,返折向上,包绕胞体周围,以软膜平行的吻尾方向行走为主,有一分枝向白质方向延伸.从立体重构图的不同角度观察,其形态不对称,如沿X轴方向旋转60°后,其形态呈扁平形,用胶体金免疫电镜观察,该神经元的递质性质为GABA能的.胞体及树突上分布有非对称型和对称型的突触,对称型的突触中有的是GABA能的,有的是非GABA能的.其轴突有髓鞘包绕,末梢与其它神经元的胞体形成一处以上相连或不相连的对称型突触,也可与其它树突形成对称型的突触.根据该神经元的形态,递质性质及突触分布的特征,可确认它是篮状细胞.

大鼠运动皮层来自胼胝体的同位和异位神经元

实验的目的是用HRP逆行追踪法研究投射至大鼠运动皮层的胼胝体神经元的形态和分布。将HRP注射到大鼠一侧运动皮层后 ,对侧运动皮层中逆行标记的胼胝体神经元为中等大小的锥体细胞 ,分布于II/III、V和VI层 ,其中V、VI层的细胞较为宽、大 ;计算机辅助三维重构的图象显示了注射部位和标记部位有很好的对应投射关系。此外 ,还首次观察到对侧眶回 (外侧和腹外侧 )向运动皮层的投射 ,这些位于眶回深层的胼胝体神经元较小而扁 ,且这种异位起源有投射区域的特异性 ;仅投向Frl的前端 (触须和鼻缘的代表区 ) ,而不向Fr3 (爪、唇和舌的代表区 )。这些同位和异位胼胝体起源提示了在大鼠的运动功能和其发达的嗅觉之间可能的内在联系。

猫中薛氏上回的皮层—皮层间联系

本文报告和讨论了中薛氏上回(MSS)各皮层区与同侧和对侧其它皮层间的神经纤维联系。结果表明,位于该回周边的各皮层区(5、LS、21、19区)与特异性的初级感觉皮层之间存在直接联系,而位于中央部位的7区仅通过这些周边区域间接地与特异性感觉系统联系。在与对侧皮层的联系中,本工作除了证实业已发现的对应性的胼胝体纤维联系外,还发现了MSS与对侧皮层的非对应性联系以及分布规律。构成MSS与其它皮层间联系的神经元主要是Ⅲ层的锥体细胞,传出的纤维末梢主要分布在同侧和对侧的皮层浅层。

大鼠运动皮层投射神经元与Parvalbumin免疫阳性神经纤维终末的关系──免疫荧光、Confocal显微镜观察

Parvalburnin是细胞内一种钙结合蛋白。同时又可作为中枢神经系统内与GABA共存的神经元亚群的特异标记物，主要标记篮状及苔烛细胞。用PAP方谈染色可见大鼠Parvalbumin免疫阳性神经终末在运动皮层锥体神经元胞体周围形成包篮现象，但因该方法的局限性．较难明确二者的关系。为进一步了解Parvalbumin阳性终未在锥体神经元脑体、树突与轴突整体上的分布状况以及运幼皮层内不同传出神经元是否均接受同样的支配，本实验利用FastBlue送行标记、固定脑片细胞内注入LueiferYellow结合免疫荧光、Confocal显微镜观察，研究运动皮层内皮质丘脑（束旁核）、皮质效状体及皮质脊髓三种投射神经元与Parvalbumin阳性终末的关系。通过1．μ连续扫描图像的分析及立体对观察，Parvalbumin阳性终末清晰可见，与LuciferYellow标记的锥体细胞的关系也容易辨别．在三种投射神经元胞体上均可见Parvalbumin阳性终末包绕，形成明显包篮现象，但三种神经元上的终末数未见明显区别·阳性终未还分布于近端树突上，距胞体越远越稀疏：但在距脑体50μm以上的顶树突、30μm以上的基树突及其二、三级分枝的远端树突上仍偶有终末分布．此外，三种神经元轴突起始段上也有少量终末接触，但未形成明显的cartridge现象．这一结果揭示。

大鼠运动皮层的胼胝体起源细胞与GABA能终末的突触联系

用ＨＲＰ逆行标记结合ＧＡＢＡ免疫组织化学染色法，在电镜下观察大鼠运动皮层胼胝体起源细胞的超微结构特征及其与ＧＡＢＡ能终末的关系。结果表明：大鼠运动皮层内的轴突终末与胼胝体起源细胞胞体仅形成对称型突触，与近端树突梗也形成少量的对称型突触，而与其树突棘则形成非对称型突触。与胞体和近端树突形成对称型突触的轴突终末主要是ＧＡＢＡ能终末。由这些ＧＡＢＡ能终末形成的轴－体突触数量占胞体表面总对称性突触数的８５．６４％（Ⅱ～Ⅲ层）和８２．１１％（Ⅴ～Ⅳ层）；近端树突上ＧＡＢＡ能终末所形成的突触占其表面总对称型突触数的７８．１３％（Ⅱ～Ⅲ层）和８４．７９％（Ⅴ～Ⅵ层）。这一结果提示，联系大鼠两侧运动皮层胼胝体起源细胞的抑制性传入，主要由ＧＡＢＡ能递质来调控。

视束纤维侧枝在外膝状体腹核及其附近的分布

引言近年以来由电生理学实验结果得到了一种推论,认为视觉通路方面除了通过外膝状体、视辐射达到大脑皮层这一条主要的通路以外,似乎还有所谓非特异性途径的存在。这条途径主要是由视束纤维的侧枝和网状结构系统所形成的,例如:Jasper^([1,2])破坏猫的外膝状体后,刺激丘脑网状系统,在皮层视区引到募集反应(recruiting responce);Steriade and Demetrescu^([3])也得到刺激丘脑网状系統可使外膝状体反应加大及皮层視区的诱发电位减小的現象。

卵巢的神经供给

卵巢的神经供给的研究,早在十九世纪的七十年代就已经开始,Frankenhauser(1867)[1]与Waldeyer(1870)[2]描述过神经纤维由卵门进入卵巢,或伴随血管,或直接到达卵泡。此后又继以许多研究。然而除了卵巢血管有丰富的神经供给为组织学家所公认以外,卵巢基质与间质里的神经结构的研究结果却很少.