转化生长因子-β1以浓度依赖的方式重组人成熟树突状细胞的细胞骨架丝状肌动蛋白

目的:探索转化生长因子β1(tansforming growth factor-β1,TGF-β1)对人成熟树突状细胞(mature dendritic cells,mDCs)骨架丝状肌动蛋白(filament actin,F-actin)及其部分骨架结合蛋白表达的影响,为深入理解树突状细胞(dendritic cells,DCs)的生物学行为和提高基于DCs的抗肿瘤免疫治疗的临床效率提供线索。方法:不同浓度的TGF-β1处理mDCs后,用激光共聚焦显微镜和免疫印迹实验分别研究细胞骨架F-actin的结构和部分细胞骨架结合蛋白表达水平的变化。结果:(1)与对照组相比,TGF-β1处理后的mDCs的F-actin出现了明显重排,F-actin的表达量在3 ng/ml组下调(P=0.000),在5 ng/ml组上调(P=0.000)。(2)mDCs表面丝状突起长度和数量的变化,长度在3 ng/ml和5 ng/ml组较对照组细、短(P=0.001,0.000);数量在1、3 ng/ml和5 ng/ml组较对照组少而稀疏(P=0.000);在7 ng/ml组mDCs表面丝状突起长度和数量的变化均无统计学意义(P=0.114);通过回归分析细胞丝状突起长度和数量与F-actin表达量之间存在非线性相关性(R2分别为0.828和0.746,P=0.000)。(3)细胞骨架蛋白结合蛋白的表达,fascin1在所有实验组中均出现了下调(P=0.001、0.000);p-cofilin1与总cofilin1的表达水平比在1 ng/ml和3 ng/ml组均下调(P=0.000);profilin的表达在1、3 ng/ml和5 ng/ml组均上调(P=0.001、0.001、0.013)。结论:TGF-β1以浓度依赖的方式影响mDCs的细胞骨架F-actin结构及其部分结合蛋白的表达,提示在临床上施行基于DCs的抗肿瘤免疫治疗时,需以适当的方式阻断TGF-β1的信号转导通路,这对进一步深入理解DCs的生物学行为和肿瘤的免疫逃逸机制具有重要意义。

转化生长因子-β_1对人成熟树突状细胞生物物理特性和迁移能力的影响

目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)对人成熟树突状细胞(m DCs)生物物理特性与迁移能力的影响。方法:用不同浓度TGF-β1(1μg/L、3μg/L、5μg/L、7μg/L)处理m DCs 24 h,按TGF-β1浓度将m DCs分为4组和对照组(未加入细胞因子);采用细胞渗透脆性实验检测m DCs的渗透脆性(未破碎细胞百分率),通过细胞电泳实验测定m DCs电泳率,荧光偏振实验和微吸管系统分别测定m DCs荧光片振度和被吸入管内的长度,以反映m DCs细胞膜的流动性和变形性,利用Transwell系统检测m DCs跨内皮细胞迁移百分率。结果:与对照组相比,(1)细胞渗透脆性,在1μg/L组m DCs破碎百分率增加,5μg/L组m DCs破碎百分率降低,差异有统计学意义(P<0.05);(2)细胞电泳率,1μg/L和3μg/L组m DCs电泳率下降,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);(3)细胞膜流动性和细胞变形性,细胞膜流动性在5μg/L组增加;变形能力在5μg/L和7μg/L组增加,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);(4)细胞迁移能力,1μg/L和3μg/L组m DCs跨内皮细胞迁移率下降,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:TGF-β1通过影响m DCs的生物物理特性从而抑制其跨内皮细胞迁移的能力。

2017-2019年贵州省H3N2亚型流感病毒流行特征及NA基因遗传特性分析

目的分析2017-2019年贵州省H3N2亚型流感病毒流行特征及神经氨酸酶(Neuramini dase,NA)基因的遗传特性,为H3N2亚型流感病毒的防控提供科学依据。方法采集2017-2019年贵州省13家国家级流感监测哨点医院的流感样病例(ILI)咽拭子标本,进行荧光定量PCR的检测,以自然年度为监测周期进行统计分析。H3N2亚型核酸阳性的标本进行狗肾胚细胞(MDCK)分离病毒,收集培养液提取病毒RNA,进行RT-PCR特异性NA基因扩增,扩增产物纯化后进行测序,用MAGE7.0软件和Clustal W2软件进行同源性、遗传进化和耐药位点分析。结果2017-2019年,贵州省采集ILI咽拭子标本分别为15553、15164和15348份,H3N2亚型阳性率分别为5.12%(797/15553)、0.80%(122/15164)和7.67%(1177/15348),呈交替流行趋势;高峰期主要出现在1-3月和10-12月。2017-2019年H3N2亚型NA基因核苷酸同源性为97.5%~100%,在进化树上主要分成2个分支,所有毒株NA基因关键位点均未发生突变。结论贵州省H3N2亚型流感病毒呈年度周期性流行,多发于冬春季节,为更好防控流感,应及时掌握流行趋势,需加强监测并及时分析病毒基因特征变异情况。

贵州省2013—2016年B型流感病毒流行特征分析

目的了解贵州省B型流感病毒的流行特征和规律,为其预防与控制提供依据。方法采用描述性方法对贵州省2013年4月1日—2016年3月31日B型流感病毒RT-PCR检测结果进行统计。结果贵州省2013—2016年3个监测年度B型流感病毒RT-PCR检测阳性1 904份,其中By系1 215份、Bv系642份,2013年4月—2014年3月、2014年4月—2015年3月2个监测年度B型流感的优势流行株都是By系,而2015年4月—2016年3月是Bv和By系共同流行,流行季节主要在冬春季;B型流感病毒男性检出所占比率较高,占56.83%;15岁以下低年龄组人群B型流感病毒检出数最高(70.80%),而Bv系在0~岁年龄组最高(42.37%),By系在5~岁年龄组最高(35.56%);混合感染病原组合构成主要以By+Bv为主,占67.65%,与B型有关的混合感染数占95.59%。结论贵州省B型流感病毒存在By和Bv两种系别的流行,流行季节为冬春季,男性感染病例多于女性,发病以15岁以下人群为主,加强低年龄群体流感疫苗的接种和监测具有重要意义。

紫花南桔梗工厂化育苗技术研究

通过对野生紫花南桔梗进行离体快繁技术的研究,解决生产栽培中优良种源短缺问题。方法:用野生紫花南桔梗幼茎为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度的激素进行培养。结果表明:用MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L诱导培养,60 d可获得丛生芽;继代用MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.2mg/L培养,增殖率高达20倍以上;用1/2 MS+NAA 0.2 mg/L培养20 d可获得生根植株。本研究得出的方法可为栽培桔梗提供大量优良种苗。

豚鼠醛化红细胞在人流感病毒血凝活性测定中的应用

在流感疫情监测中,血凝试验是最常用的检测方法。针对鸡红细胞不能凝集流感病毒"O"相毒株,新鲜红细胞需现采现配、麻烦、费时,易溶血、不易保存等问题,本试验对豚鼠醛化红细胞制备方法的筛选和制备条件的优化进行研究,并以新鲜豚鼠红细胞为对照,用于流感病毒不同型别血凝试验。结果表明,戊二醛固定法制备的豚鼠醛化红细胞不溶血、结果稳定性好、保存期长、血凝活性与新鲜豚鼠红细胞基本一致,可以替代新鲜豚鼠红细胞用于血凝试验。

家蝇相关序列扩增多态性扩增体系的建立与优化

目的:建立和优化家蝇的相关序列扩增多态性(SRAP-PCR)扩增体系。方法:以驯养家蝇为材料,通过单因子实验分别研究了模板DNA、Mg2+、dNTPs、引物浓度及Taq DNA聚合酶用量对家蝇SRAP分子标记扩增体系的影响,并对扩增体系进行了优化。结果:优化后的反应体系总体积为30μl,含50ng模板DNA、1.5mmol/LMg2+、0.20mmol/L dNTPs、0.15μmol/L引物和0.50U Taq DNA聚合酶。结论:家蝇SRAP-PCR扩增优化系统的建立,为今后利用SRAP技术进行家蝇遗传多样性分析、基因定位奠定了基础。

贵州省2012年度甲型流感病毒组成情况分析

目的了解2012年度贵州省甲型流感病毒各个亚型的组成情况。方法收集流感样病例标本,提取病毒核酸RNA,通过实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)方法筛选甲型流感病毒阳性的标本,再对其进行各个亚型的鉴别,了解甲型流感病毒各个亚型的组成情况。结果本年度共检测到甲型流感病毒73份,其中甲型H3亚型病毒71份;新型H1N1病毒2份;甲型H1亚型病毒未检出。结论贵州省2012年度甲型流感病毒的优势毒株为甲型H3亚型病毒,占总甲型流感病毒的97.27%;新型H1N1病毒占总甲型流感病毒的2.73%。甲型H1亚型病毒未检出。

2017-2019年贵州省BV系流感病毒的分子特征分析

目的了解贵州省BV系流感暴发疫情和重症病例毒株的分子特征,探讨其特异性分子靶标,为流感的防控提供依据。方法选取贵州省2017-2019年BV系流感暴发疫情、重症病例和普通流行毒株,经基因组的提取、HA和NA基因的扩增与测序,与参考株一起进行分子特征分析。结果贵州省所有毒株HA和NA基因进化树拓扑结构类似,整体上毒株处于3个分支,2017年的毒株聚集为一簇,2018年的分散存在,2019年的处于两个分支且相对较远,绝大部分暴发疫情毒株和重症病例毒株均处于分支1。贵州省所有毒株同疫苗株B/Colorado/06/2017 HA和NA基因同源性最高,分别为98.6%~99.3%和98.9%~99.4%;2017年BV系毒株间HA和NA基因同源性分别为99.9%和99.9%~100%,2018年分别为98.4%~99.3%和98.7%~99.1%,2019年分别为97.7%~100%和98.4%~99.9%,其中2019年分支2中的毒株间同源性分别为99.4%~100%和99.6%~99.9%,分支1中的分别为99.5%~100%和99.3%~99.9%,所有暴发疫情、重症病例毒株同当年度普通流行毒株之间同源性均高于99.4%;与疫苗株B/Colorado/06/2017相比所有毒株HA基因均存在S14N、G144D、V195I、K513R的突变,NA基因均存在Q371K、D490N的突变;2019年分支1中的毒株HA基因存在G148R、K151E和T563A以及NA基因存在A395T的特异性位点突变;分支2中的毒株HA基因存在V394I和NA基因存在V71A、K343E、A395V和V401I的特异性位点突变。同时,分支1中的毒株HA基因与疫苗株B/Brisbane/60/2008相比存在179-181KND的特异性缺失突变,与B/Colorado/06/2017相比存在181D的特异性缺失突变和150环的抗原位点突变。结论贵州省BV系暴发疫情毒株之间存在一定的差距,但暴发疫情毒株与普通流行毒株之间亲缘关系和同源性较高,2019年存在两个分支群系毒株的流行,且暴发疫情、重症病例毒株主要以分支1中的毒株流行为主;贵州省暴发疫情、重症病例毒株存在多个位点的特异性突变和缺失突变,应进一步加强分子特征的实时监测和致病力相关的特异性分子靶标研究。

留守儿童心理健康:人格特质与社会支持的影响

目的：探讨留守儿童的人格特质和社会支持对心理健康水平的影响以及二者之间的互相作用。方法：采用整群抽样的方法对西部某省区多民族交界杂居的两所小学和两所中学4-8年级共210名留守儿童和110名非留守儿童和15位班主任进行问卷调查。结果：①留守儿童心理健康水平与非留守儿童存在显著差异;不同监护类型留守儿童心理健康差异主要表现在身体症状方面（F_（6,313）=2.26,P〈0.05）,且留守儿童心理健康问题女孩比男孩严重（t=-3.10,P〈0.05）,初中生比小学生严重（t=2.56,P〈0.05）;②留守儿童的心理健康受到人格特质和社会支持的双重影响,即留守儿童的心理健康受到人格特质的神经质和精神质（r=0.67,0.29;P〈0.01）的影响,社会支持帮助对心理健康（r=0.12,P〈0.05）有影响,留守儿童的人格特质存在监护类型和学段差异;③社会支持对心理健康有显著的负向回归预测效应（B=-0.02,P〈0.05）,并且社会支持可以完善人格特质从而对心理健康发生作用。结论：留守儿童的心理健康水平不容乐观,心理健康受到人格特质和社会支持的双重影响,增加社会支持可以改善人格特质增进心理健康。

留守儿童心理健康状况与社会支持的相关分析

目的:探讨留守儿童的心理健康状况与社会支持的相关性。方法:采用青少年社会支持网络问卷和心理健康诊断测验量表(MHT),对318名农村中学在校生进行问卷调查,分析留守儿童的心理健康状况、比较不同性别留守儿童的心理健康差异及社会支持与心理健康的相关性。结果:留守儿童心理问题的阳性检出率(81.8%)显著高于非留守儿童(18.2%)(P<0.05);女性留守儿童在MHT的过敏倾向、学习焦虑、自责倾向、恐怖倾向这4个因子水平及全量表的得分显著高于男性留守儿童(P<0.05);非留守儿童获得的社会支持比留守儿童要多,社会支持的亲密感、价值肯定、个体情感支持、陪伴娱乐支持、信息支持和帮助6个维度与MHT的学习焦虑,孤独倾向,恐怖倾向,冲动倾向对人焦虑,孤独倾向,恐怖倾向,自责倾向,身体症状,恐怖倾向,过敏倾向,身体症状,恐怖倾向,冲动倾向8个因子均呈负相关关系(P<0.05)。结论:社会支持对留守儿童的心理健康发展存在一定的影响,应引起社会的广泛关注。

不同留守类型儿童的心理健康状况调查

改革开放以来产生了大量的留守儿童,引起社会方泛关注,为了了解留守儿童的心理健康状况,采用心理健康诊断测验（MHT）对西部某省两所中学和两所小学,以4~8年级的学生作为被试,共320名儿童的心理健康状况进行调查。结果发现,非留守儿童的健康状况好于留守儿童,留守儿童在心理问题阳性检出率中占81.8%,而非留守儿童仅占心理健康问题阳性检出率的18.2%;不同类型的留守儿童在心理健康问题在MHT的不同维度上都显著地高于非留守儿童;留守儿童在心理健康水平上还存在着学段差异和性别差异;初中留守儿童心理健康问题得分均显著高于小学留守儿童（p〈0.05）,且差异有统计学意义;女性留守儿童显著高于男性留守儿童（p〈0.05）,且差异有统计学意义。可见,留守儿童心理健康水平较低,留守经历对儿童心理影响具有长期效应,父母外出务工时应当尽量留下一方在家照顾子女。

贵州省2017-2019年H3N2亚型流感病毒HA基因遗传特征分析

目的分析贵州省2017-2019年H3N2亚型流感病毒HA基因特征,了解变异规律。方法由贵州省10家网络实验室分离的H3N2亚型流感毒株中随机选取20株提取RNA,进行逆转录酶聚合酶链反应和测序,采用生物信息软件分析。结果20株毒株HA基因核苷酸同源性为97.7%~100.0%,与世界卫生组织推荐的疫苗株A/Hong-Kong/4801/2014(2017年)和A/Singapore-INFIMH/16-0019/2016(2018年)同源性高,而与2019年世界卫生组织推荐的疫苗株A/Kansas/14/2017(2019年)差异较大。遗传分析显示,20株病毒株主要分为2个分支,2019年流行的毒株处于不同的分支,遗传差距较大。关键位点分析显示,抗原决定族A、B、C和E存在突变;受体结合位点前壁和后壁存在突变;与当年度疫苗株相比,存在糖基化位点的增加。2017-2018年毒株在遗传距离、抗原位点和糖基化位点变异情况与2019年毒株略有不同。结论贵州省2017-2019年H3N2亚型流感病毒HA基因发生基因突变,2019年的毒株变异最为严重,应密切监测H3N2亚型流感病毒遗传进化的变化情况。

贵州省2019年甲型H1N1流感重症或死亡病例毒株HA基因特性分析

目的了解贵州省甲型H1N1流感重症或死亡病例毒株HA基因的分子特征,探讨其特异性分子位点,为流感防控提供科学依据。方法采集2019年贵州省甲型H1N1流感重症或死亡病例的28份鼻咽拭子标本进行病毒株的分离,其中13株病毒的HA基因被扩增和测序,利用国家生物技术信息中心或全球禽流感数据共享倡议提供的参考序列和已有的轻症病例毒株序列对HA基因进行生物信息学分析。结果2019年贵州省甲型H1N1流感重症或死亡病例毒株核苷酸和氨基酸同源性分别为98.0%~100.0%和97.9%~100.0%,分别处于不同次分支;与2019年和既往疫苗株相比,核苷酸和氨基酸同源性分别为98.2%~99.3%、97.1%~98.4%和98.1%~98.9%、97.5%~98.7%;与轻症病例相比,重症或死亡病例毒株共发生了12个位点的突变,其中V312I为共有的突变位点,抗原决定簇突变共涉及到3个区域,毒株QNZ2019YYX和BJ2019WXP发生了2个位点的突变。结论2019年度疫苗株匹配性更高,部分毒株突变涉及到抗原决定簇的2个区域,可能为新的变异株,V3121位点可能为重症或死亡病例毒株的特异性分子位点,需进一步研究和加强实时监测。

贵州省2011—2021年流感流行特征及变异规律

目的分析贵州省2011—2021年流感的流行病学特征,揭示流感病毒的流行特点及变异规律,为流感病毒的防控提供科学依据。方法采集2011—2021年全省13家流感监测哨点医院发热/内科、儿科门诊流感样病例(ILI),通过RT-PCR检测,以流感监测年度为周期进行数据统计分析。结果共采集ILI标本135537例,总阳性率为16.73%(22676例)。检出阳性率最高为H3N2亚型(34.3%),最低为BY系(13.69%),各亚型均引起过不同程度流行,且交替共存。呈冬春季和夏季2个流行高峰特征;女性阳性率略高于男性;人群主要集中在5~24岁年龄段,各亚型主要感染的对象有所不同;各监测年度间阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。结论贵州省流感呈周期性流行,且各亚型交替或共存呈优势株流行。多发于冬春季和夏季,青少年是防控的重点,各地区阳性率差异有统计学意义。应加强监测并及时分析病毒变异情况。

应用4℃冰箱分离B型流感病毒

目的探索低温保存狗肾细胞（MDCK）对B型流感病毒分离和增殖的影响。方法复苏冻存的P17代MDCK细胞，传至2～4代后，选择生长状态及形态良好的单层细胞，换新鲜细胞生长液，于4oC保存3d、6d、9d后，在相同培养条件下同时接种流感样病例咽拭子标本。上毒24h后每天观察细胞病变，采用实时荧光PCR相对定量法测定病毒的增殖率，血清学试验测定病毒血凝效价，同时以同一代次常规培养的MD-CK细胞单层为对照。结果（1）细胞病变：与对照相比较，4℃低温保存3、6d的细胞细胞病变无差别，而保存9d的细胞细胞病变快，维持时间短。（2）荧光定量：4℃低温保存3、6d的细胞对流感病毒的增殖（25.86×10^5～30．25×10^6、26．31×10^5～30．54×10^6）与常规分离（24．82×10^5～29．86×10^6）相比无差别，其增值率在10^5～10^6倍之间。而9d的细胞（19．72×10^4～28．34×10^5）则较对照要低，增值率在10^4～10^5倍之间。（3）HA效价：4℃保存3d和6d的细胞分离病毒血凝效价大于1：16的毒株数与常规细胞（10．92±0．79）比较，差异无统计学意义（P〉0．05），而保存9d的细胞分离病毒血凝效价大于1：16的毒株数较正常细胞低并有统计学意义（P〈0．01）。结论4℃低温保存1周内MDCK细胞单层对B型流感病毒的分离和增值无影响。

人H3N2亚型流感病毒的进化研究进展

年度季节性流感疫苗由代表H1N1和H3N2亚型的两种甲型流感病毒株和代表维多利亚和山形血统的两种乙型流感病毒株组成,来自甲型和乙型流感病毒的毒株目前在人类中共同传播。其中,H3N2亚型流感病毒相关的毒株与人群中大规模流行的季节性流感密切相关。H3N2亚型流感病毒引起的流感是上个世纪发生的三次主要流感大流行之一。因此,本文综述的H3N2亚型流感病毒在进化方面的研究进展,为相关研究人员研发相应的疫苗提供思路。

贵阳市2012-2015年B型流行性感冒病毒血凝素基因特性分析

目的了解2012-2015年贵阳市B型流行性感冒(以下简称流感)病毒的变异和流行特点,分析其与WHO推荐的疫苗株和我国的代表株匹配情况。方法将21份标本进行血凝素基因片段1(haemagglutinin 1,HA1)基因序列测定,通过DNA Star version 7.1等软件对测序产物进行分析。结果贵阳市B型流感病毒存在BY和BV两种谱系;核苷酸同源性显示,BV系与疫苗株B/Brisbane/60/2008的同源性为97.8%~99.3%;2013-2014年BY系与疫苗株B/Massachusetts/02/2012的同源性为96.2%~96.5%,与既往的疫苗株B/Wisconsin/01/2010同源性为99.0%~99.3%;2015年BY系与疫苗株B/PHUKET/3073/2013同源性为99.2%~99.5%;2012-2015年BV系与我国代表株B/Chongqing-Yuzhong/1384/2010同源性为96.8%~99.0%,BY系与种子疫苗株B/Hubei-Wujiagang/158/2009为98.2%~99.2%。与当年度疫苗株相比,2013-2014年BY系毒株有9个氨基酸位点发生变异,其中A134P位点涉及到抗原决定簇A区,N142K涉及到B区;2015年BY系毒株发生新的L198Q变异,且涉及到D区;BV系氨基酸位点替换多样,但很少涉及到抗原决定簇。结论 2012-2015年贵阳市人群中B型流感病毒在不断地发生改变,除2013-2014年疫苗株与流行株匹配性不佳以外,其余年度的匹配性均较好,能起到保护作用。

2017—2021年贵州省乙型流感病毒遗传进化分析

目的了解贵州省乙型流感病毒BY系和BV系毒株HA和NA基因分子进化特征,为流感的科学防控提供依据。方法统计贵州省2017—2021年流感各型别阳性比例,提取乙型流感病毒核酸,RT-PCR扩增HA和NA基因,进行序列测定14株,并从GISAID获取83株序列,对合计97株乙型流感病毒的序列进行同源性、遗传进化和氨基酸位点变异分析。结果贵州省存在甲型、BY系和BV系流感病毒的流行,BV系为优势流行型别;BY系流感病毒HA和NA基因与参考疫苗株B/PHUKET/3073/2013相比同源性分别为98.7%~99.4%和98.4%~99.6%,BV系毒株与参考疫苗株B/Colorado/06/2017相比分别为98.3%~99.3%和98.9%~99.6%;贵州省BY系毒株主要属于Y3遗传群,HA基因处于Y3-H1~2两个分支,NA基因处于Y3-N1~3三个分支,发现3株Y3系内重配株;BV系毒株主要属于V1A-2遗传群,HA基因处于V1A-2 H1~4四个分支,NA基因处于V1A-2 N1~5五个分支,发现20株V1A-2系内重配株,未发现系间重配株;关键氨基酸位点变异分析显示抗原决定簇区域位点Y3遗传群无突变,V1A-2遗传群4个主要的抗原决定簇均存在点突变且190螺旋存在移码突变,耐药位点均未发生突变。结论贵州省流感流行型别多样,乙型流感病毒与疫苗株同源性差异在增大,HA和NA基因已进化出不同分支,基因序列存在多种形式的突变,存在系内重配株和新的变种,应持续加强乙型流感病毒的监测研究。

贵州省2014-2017年H7N9禽流感病毒HA和NA基因特征分析

目的 分析2014－2017年贵州省H7N9禽流感病毒HA和NA基因的分子特征和感染风险。方法 对2014－2017年贵州省获取的18例确诊人感染H7N9病例和6份环境样本分离的H7N9病毒株的HA和NA基因进行扩增，运用生物信息学软件解析其变异和遗传进化。结果 2014－2015年贵州省2株毒株与WHO推荐的A/Shanghai/2/2013和A/Anhui/1/2013疫苗株HA和NA基因的同源性最高，分别为98.8%～99.2%和99.2%；2016年2株和2017年14株与A/Hunan/02650/2016疫苗株同源性最高，分别为98.2%～99.3%和97.6%～98.8%；2017年其余6株与A/Guangdong/17SF003/2016疫苗株同源性最高，为99.1%～99.4%和98.9%～99.3%。所有毒株均属于长江三角洲分支，但主要聚集为3个次分支。2017年贵州省西部有6株毒株（含2例人感染病例毒株）裂解位点存在插入突变为PEVPKRKRTAR↓GLF，具备高致病性禽流感病毒的分子特征；受体结合关键位点存在A134V、G186V和Q226L突变，NA蛋白颈区“QISNT”均缺失，毒株A/Guizhou-Danzhai/18980/2017发生耐药突变R294K，9株毒株NA蛋白糖基化位点发生NCS42NCT突变。结论 2014－2017年贵州省H7N9禽流感病毒HA和NA基因存在遗传差异，关键位点的变异增强了病毒对人体的易感性和毒力，部分毒株发生耐药突变，其感染与致病风险增加。