地衣芽孢杆菌α-乙酰乳酸脱羧酶的纯化及酶学性质

地衣芽孢杆菌 (Bacilluslicheniformis)AS10 10 6α 乙酰乳酸脱羧酶经硫酸铵沉淀 ,聚乙二醇沉淀 ,DEAE SepharoseFastFlow离子交换 ,GigapiteK 10 0S柱层析及SephadexG 10 0分子凝胶过滤柱等分离纯化步骤 ,得到SDS PAGE电泳纯 ,α 乙酰乳酸脱羧酶的比活提高了 5 3.5倍。对该酶性质的研究表明 ,酶单亚基分子量为 32Kda ,等电点为 4 .5 ;该酶的最适反应温度为 4 0℃ ,最适反应 pH为 6 .0 ,对热 (40℃以上 )敏感 ,在 pH5 .0～ 6 .5之间稳定。酶活不需要金属阳离子 ,Cu2 +、Co2 +强烈抑制酶的活性。摇瓶实验表明 ,纯化的地衣芽孢杆菌α

蚁群聚类分析算法在茶叶等级分类识别中的应用

来自非原产地的龙井茶已经严重影响了原产地茶叶的信誉与销售。为了减弱这种影响,文章提出了一种蚁群聚类算法应用在茶叶等级分类识别上,因为相对于其他算法,蚁群聚类分析对未知分类的茶叶实行自动分类更有优势。为综合分析茶叶的特性,采集了3个等级的茶叶,每个级别有60组样品,然后提取每个样品的图像和光谱特征共16个参数,将180组样品先自动随机分类。最后利用蚁群聚类分析算法实现样品自动归类。结果发现,与原分组比较后,基于蚁群聚类分析算法的分类识别率达到了92.2%。这表明利用蚁群聚类分析对未知茶叶等级分类是可行的。

甲基营养型酵母系统表达的重组人表皮生长因子的纯化及其性质

目的 获得可用于动物试验和临床试验的人表皮生长因子原料药。方法 化学合成的人表皮生长因子基因在甲基营养型酵母中表达并分泌到培养基中的人表皮生长因子蛋白经 Phenysepharose 6 Fast Flow（ high sub）柱、 Q-sepharose High Performance柱、 Superdex 30柱纯化后进行生物学性质检测。结果 纯化后的蛋白产物纯度达 98％，是无热源、无内毒素、无甲基营养型酵母染色体 DNA污染的，有正确的分子量、等电点、氨基末端氨基酸顺序、肽图、紫外光谱、及生物活性性质的重组蛋白。结论 纯化蛋白符合动物试验和临床试验的要求，为制备多种人表皮生长因子制剂进行动物实验和临床试验打下了基础。

基于高光谱分析技术的机炒龙井茶等级识别方法

随着机炒龙井茶外形和色泽趋向统一整齐,茶叶的内在品质相应成为评判等级的关键,由此,该文提出了一种高光谱与支持向量机分类相结合的技术,进行基于机炒龙井茶内在品质的等级识别方法研究。应用高光谱技术提取了龙井茶在350～2500nm波长范围内的吸收深度、吸收面积、红边位置、红谷位置、归一化植被指数等光谱特征参数,并对这些特征参数与茶叶等级的相关性进行了研究;然后利用带惩罚系数C的支持向量机分类理论,以光谱特征参数为输入量,分析确定了模型中关键的核函数和分类函数,构建了龙井茶等级识别模型,并进行了不同等级机炒龙井茶的分类识别验证。结果表明:采用所研究的方法和建立的模型对龙井茶进行等级分类准确率达到98.3%,证明应用该方法进行机炒龙井茶的等级分类识别是可行的。

木酮糖激酶表达水平对酿酒酵母木糖代谢产物流向的影响

在酿酒酵母中分别引入真菌和细菌的木糖代谢关键酶 ,木糖还原酶基因XYL1、木糖醇脱氢酶基因XYL2和木糖异构酶基因xylA .并在此基础上以共转化策略超表达下游关键酶木酮糖激酶基因XKS1.与亲本菌株相比 ,用pMA91和YEp2 4质粒表达XKS1的重组菌株 ,木酮糖激酶 (xylulokinase,XK)活性分别提高了 14和6 7倍 .在限氧条件下 ,重组菌株对木糖和葡萄糖的共发酵结果显示 ,表达XYL1,XYL2以及XKS1的重组菌株HSXY 2 5 1木糖消耗为 12 4 g/L ,提高了 12 0 9% ,乙醇产量达到 9 4 g/L ,提高了 36 % ,副产物木糖醇产量为 0 7g/L ,下降了 84 9% .

表面增强拉曼散射中贵金属纳米材料的研究进展

贵金属纳米材料因独特的光电特性而广泛应用于表面增强拉曼散射(SERS)衬底的制备。SERS信号的增强很大程度上取决于衬底的形状、尺寸以及衬底与分子之间的吸附特性。分别概述了水热法、液相还原法、模板法以及纳米光刻法4种目前常用的贵金属纳米材料可控制备方法,并介绍了贵金属纳米材料的SERS增强机理。

酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae重组菌株木糖醇发酵的初步研究

木糖还原酶催化木糖为木糖醇的反应 ,是木糖代谢的第一步。将木糖还原酶的基因XYL1引入酿酒酵母中 ,构建得到高效表达XYL1基因的重组酿酒酵母菌株HYEX2 ,该重组菌株的木糖还原酶比活力为 7.47U/mg。研究表明 ,该菌株获得转化木糖产生木糖醇的能力 ,当辅助碳源葡萄糖的浓度为 2 % ,并在发酵 30h左右添加木糖 ,木糖醇的转化率可达到 0 .94g/ g。

压电陶瓷驱动器装夹机构设计

采用直圆柔性铰链支撑的复合平行四杆机构,设计了一种压电陶瓷(PZT)驱动器的装夹机构。该机构具有导向精度稳定、响应速度快、分辨率高和无耦合运动等优点。从力学理论出发推导了柔性铰链刚度的简化计算公式,运用参数化的分析方法求得了柔性铰链结构参数对装夹机构应力、刚度及有效行程的影响。实验测得刚度和有效行程的理论计算误差分别仅为3.9%和1.4%,表明了该设计方法的可靠性与有效性。

微观粘着测试技术研究进展

微构件粘附是造成微机电系统(MEMS)失效的主要原因,也是导致MEMS性能不稳定难以走向市场的关键所在。因此,对于MEMS粘着问题的研究,微观粘着测试技术显得极为重要。综述了国内外微观粘着测试技术的研究进展和现状,介绍了基于应变片、光学检测、电容式传感器、压电式力传感器和分析天平等原理的粘着测试装置,分析了它们的工作原理和特点。

垃圾短信过滤方法的分析与研究

针对垃圾短信的现状,提出了一种结合信任技术、黑名单过滤技术、关键字过滤技术等的解决方案。该解决方案需要广大手机用户、移动运营商、政府监管部门的共同参与,才能最终达到治理垃圾短信的目的。

白细胞介素-6基因的克隆、表达及纯化的研究

目的进行重组人白细胞介素-6(rhIL-6)的批量生产研究。方法将克隆的人IL-6基因置于pET30a载体的T7启动子下游,在宿主大肠杆菌中进行表达。结果工程菌表达量占菌体总蛋白的50%以上,纯品纯度大于95%,rhIL-6的分子量为21 000,等电点为6.7。用依赖IL-6的小鼠杂交瘤细胞系7TD1以MTT比色法测定表达蛋白生物活性表明,rhIL-6的ED50为0.35 ng/ml。结论上述结果表明rhIL-6已基本达到中试生产的要求。

臭氧发生器高频逆变电源的动态仿真与实验分析

通过对采用IGBT的某中型高频臭氧发生器逆变电源电路进行分析,利用Protel99SE中的仿真功能,对逆变电路进行仿真分析并与实验结果对比,确定了该高频逆变电源的电路参数,实现了电路参数的优化.

把握党对工会组织的“三个要求” 推动企业高质量发展

工会是企业联系广大职工群众的桥梁和纽带,在国有企业高质量发展中扮演着重要角色。冀中能源峰峰集团电业分公司工会始终牢牢把握党对工会组织的“三个要求”,即坚持党的领导,坚持中国特色社会主义道路的根本要求;引导广大职工群众听党话、跟党走,巩固党的阶级基础和群众基础的本质要求;组织动员广大职工为实现中华民族伟大复兴的中国梦而奋斗的必然要求,引导广大职工群众始终昂扬向上、奋发有为,为实现高质量发展提供有力支撑。

特殊地质深基坑工程围护结构施工技术研究

近年来,中国基建规模不断攀升,一方面随着高楼大厦越盖越高,其地下基础也是越挖越深。另一方面随着城市轨道交通网络不断完善,2站、3站换乘已经非常普遍,4站、5站换乘也将越来越多,使得地铁车站埋深越来越深。由于基坑工程深度不断增大,围护结构深度不断加深,将会穿越更多的地层,直到完全入岩而采用吊脚桩或吊脚墙。本文结合多个工程实例,研究分析特殊地质条件下围护结构综合施工技术,以达到安全、快速、降本、增效的管理目标。

基于肠道菌群干预在治疗自闭症谱系障碍中的研究进展

自闭症谱系障碍是一组病因及发病机制不清、尚无治愈方法的神经发育障碍。研究发现肠道菌群在自闭症谱系障碍的发生和发展中起着重要作用。通过补充益生菌、饮食疗法或粪便微生物移植可调节肠道菌群平衡,从而改善自闭症谱系障碍患者的行为和症状。本文将从调节肠道菌群平衡治疗自闭症谱系障碍的角度进行综述,旨在为自闭症谱系障碍的研究及治疗提供帮助。

半高山烟区热泵烤房的筛选与应用

为筛选适宜长江中上游半高山烟区的热泵烤房,将“改造式”(T_(1))和“新建式”(T_(2))2种热泵密集烤房与燃煤密集烤房(CK)进行对比,比较不同烤房的装烤能力、升温稳温能力、烘烤成本和烤后烟叶质量。结果表明,热泵烤房温湿度控制精准,T_(1)、T_(2)热泵密集烤房单炕烘烤综合成本较燃煤密集烤房(CK)分别减少47.97%和52.21%;单位干烟烘烤成本CK最多,T_(1)次之,T_(2)最少。烘烤过程中T_(1)烤房上下温差大于T_(2)烤房。综合对比得出,“新建式”热泵密集烤房的推广价值优于“改造式”热泵密集烤房。

蜜蜂表皮蛋白apidermin(apd)基因家族3个新成员的特性鉴定及昆虫APD家族序列特征的分析

Apidermin(APD)蛋白家族是一个新的昆虫结构性表皮蛋白家族。本研究结合生物信息学和RT-PCR扩增,对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica(简称"意蜂")的apd-1-like,apd-3-like和中华蜜蜂Apis cerena cerena(简称"中蜂")的apd-2等3个新的apd基因的结构特征和表达进行了分析,并分析了昆虫APD蛋白家族的序列特征。结果显示,在西方蜜蜂Apis mellifera(简称"西蜂")中,apd基因家族的6个成员串联排列在基因组序列第4号连锁群上,它们在A.m.ligustica雄蜂头部中的转录水平差异明显,且其启动子序列所含顺式元件也不同。中蜂apd-2和意蜂apd-1-like都含有3个外显子和2个内含子,而意蜂apd-3-like则由4个外显子和3个内含子组成。蛋白序列分析结果显示,目前已知的10条APD蛋白序列N末端均具有相似的信号肽序列,其成熟蛋白分子量为6.0～37.0kD,pI为6.2～10.8。其中西蜂的APD1-3、APD-like和东方蜜蜂Apiscerena的APD-2等5条较短的多肽中疏水氨基酸残基达52%～67%,且Ala含量最为丰富(占25%～34%);而丽蝇蛹集金小蜂Nasonia vitripennis的APD1-3和西蜂APD-1-like,APD-3-like等另外5条APD多肽富含Gly(21%～30%),其序列中疏水氨基酸残基含量为35%～41%。多肽序列多重比对和系统进化分析结果显示,APD家族可划分为2个亚家族。亚家族Ⅰ含有西蜂APD1-3和东方蜜蜂APD-2等4条较短的多肽序列,其N末端为一个长33aa的保守基序;亚家族Ⅱ由另外6条相对较长的多肽序列组成,其N末端保守基序长50aa,C末端保守基序长16aa。本文所描述的APD蛋白家族序列特征有助于以后从其他昆虫中鉴定新的apd基因。

草菇全基因组框架图

采用Roche 454 GS FLX测序技术和Solexa测序技术相结合,进行了草菇(Volvariella volvacea)全基因组的测序,最终获得了长度为35.67Mb的草菇全基因组序列。通过生物信息学预测,获得了11097个蛋白编码基因,其中5516个基因有明确的功能注释信息。这是在国际上首次报道的草菇基因组框架图。

西方蜜蜂表皮蛋白基因apd-like转录起始位点的定位及cDNA序列的分析

Apidermin蛋白家族是根据蜜蜂表皮蛋白apidermin1-3(APD1-3)而命名的一个新型的昆虫结构性表皮蛋白家族。为了鉴定西方蜜蜂Apis mellifera基因组序列上毗邻基因簇apd1-3的一个预测基因座LOC727145是否为一个新的apd基因,本研究在用5′LongSAGE标签定位该基因的转录起始位点(TSS)的基础上,利用其中的3条5′LongSAGE标签序列作为上游引物,通过RT-PCR方法克隆了该基因的cDNA序列(GenBank登录号:GU358197,GU358199,GU358198)。生物信息学分析发现,基因座LOC727145含有2个外显子和1个"GT-AG"型内含子,其cDNA序列富含GC(70%),可编码一条长152aa残基的高度疏水性多肽。此多肽序列的氨基酸组成与蜜蜂APD1-3表皮蛋白类似,富含Ala,Gly,Pro,Leu和Val5种氨基酸(占77%),其中Ala残基含量最高(29%)。该多肽序列与蜜蜂APD-1表皮蛋白序列的相似性为50%,且其N末端的预测信号肽序列与APD蛋白的信号肽序列类似。5′LongSAGE标签的基因组定位结果显示,基因座LOC727145在雄蜂头部中表达丰度很高,RNA PolⅡ可从6个不同的TSS上以不同效率起始转录,其中由一个优势TSS上起始了90%的转录。本研究为apidermin表皮蛋白家族增添了一个新成员,命名为apidermin-like(apd-like)。