人工合成柞蚕抗菌肽D基因转化沙田柚

采用根癌农杆菌介导法将柞蚕抗菌肽Ｄ基因导入沙田柚上胚轴等外植体，经卡那霉素筛选，获得了若干转基因植株对这些植株进行胭脂碱电泳检测、点印迹杂交、ＰＣＲ扩增和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析。

正交试验法在龙眼和荔枝组织培养中的应用

利用正交设计试验法研究了椰乳（ＣＭ）、２，４－Ｄ、赤霉素（ＧＡ３）和蔗糖等四个因素及其组合对石硖龙眼和桂味荔枝的幼胚愈伤组织产生的影响，并讨论了正交设计试验法应用于龙眼和荔枝组织培养培养基筛选的可能性。结果表明：１）对龙眼，诱导愈伤组织的最优组合是 ＣＭ １０％、２，４－Ｄ１．０ｍｇ·１－１、ＧＡ３０ｍｇ·１－１和蔗糖３％；对荔枝，最优组合是ＣＭ０％，２，４－Ｄ１．０ｍｇ·１－１，ＧＡ３０ｍｇ·１－１和蔗糖 ５％。 ２）适当的 ２，４－Ｄ浓度（１．０ ｍｇ·１－１）可提高愈伤组织的产量；３）ＧＡ３抑制了龙眼和荔枝的愈伤组织的产生；４）不同树种的胚需要不同的糖浓度；５）适当ＣＭ浓度（１０％）可提高龙眼愈伤组织的产量，而荔枝愈伤组织的产生并不需要ＣＭ。

抗生素对沙田柚外植体分化及生长的影响

不同浓度的卡那霉素结合羧苄青霉素、头孢霉素对沙田柚子叶、上胚轴、下胚轴的分化及新梢生长的影响试验结果表明：培养基中卡那霉素浓度超过５０ｍｇ／Ｌ时，不利于诱导产生愈伤组织，也不利于上、下胚轴形成不定芽；卡那霉素浓度大于７５ｍｇ／Ｌ时，明显抑制愈伤组织的分化和新梢的生长；羧苄青霉素及头孢霉素浓度为３００—４００ｍｇ／Ｌ时抑菌效果较好，对外植体的生长分化影响亦较小。

荔枝龙眼细胞悬浮培养和转基因研究(英文)

应用正交设计研究了IBA、6-BA、GA3和CM等植物生长调节剂在龙眼(Dimocarpus longana Lour.)与荔枝 (Litchi chinensis Sonn.)细胞悬浮培养中的作用,并就悬浮培养细胞对Km的敏感性以及用金刚沙对胚性愈伤组织在 液体状态下进行创伤和用分别带有AP1和APBD基因的农杆菌对创伤的愈伤组织进行遗传转化进行了探讨。结果 表明:IBA、6-BA、GA3和CM均可显著地提高悬浮培养系的产量,但GA3导致细胞的快速生长和褐变。悬浮培养系 细胞在液体培养基中比在固体培养基中对Km较敏感。用金刚沙对胚性愈伤组织在液体状态下进行创伤后进行农 杆菌介导转化可以得到更多的Km抗性胚状体。PCR检测结果显示,AP1及AP-D基因均已转入龙眼的胚状体中。

抗生素对台湾青枣茎段和愈伤组织生长的影响

探讨了卡那霉素 (Kan)、羧苄青霉素 (Cb)、头孢霉素 (Cef)和氨苄青霉素 (Amp) 4种抗生素对台湾青枣幼嫩茎段和疏松的愈伤组织生长的影响 ,初步确立了对台湾青枣 (ZiziphusmauritianaLam .)进行农杆菌介导的遗传转化研究中的抑菌和转化体的筛选策略 .Kan 75mg·L-1时 ,5 0d后茎段基本停止生长并开始变成白色 (白化 ) ;Kan2 5mg·L-1时 ,胚性愈伤组织生长受到明显的抑制 ,Kan 5 0mg·L-1时 ,其生长基本停止且开始褐变 ,Kan 75mg·L-1以上时胚性愈伤组织完全变褐 .适当浓度的Cb或Cef对芽的伸长生长有一定的促进作用 ,Cb +Cef却对芽的伸长出现轻微的抑制效应 .

毛叶枣APETALA1同源基因的克隆

分析在植物花分生组织及花器官形成过程中起重要作用的APETALA1(AP1)基因的保守区序列 ,设计 1对长度为 2 3bp的PCR引物 ,以毛叶枣基因组DNA为模板 ,采用PCR方法扩增出长为 648bp的DNA片段 ,克隆入pUCm T载体 ,测序和序列分析结果表明获得了毛叶枣AP1同源基因中部的 1个片段 ,该片段有 2个内含子 ,长度分别为15 2bp和 386bp ,编码区共编码 36个氨基酸 ,其序列已在GenBank中登记 (登记号为AF35 65 41) .在GenBank中进行同源性检索 ,结果表明其氨基酸序列与其他植物AP1同源基因的氨基酸序列同源性高达 66 %～ 88% 。

开发与柑桔抗溃疡病基因连锁的由RLK-RGC衍生的分子标记(英文)

本文是在先期研究工作的基础上,利用从柑桔与枳属间杂种的基因组DNA所获得的类受体激酶(RLK)的候选抗病基因序列,重新设计引物,对柑桔抗溃疡病材料和感病材料开展以PCR扩增为基础的对比分析,其中一对引物‘19h16/DdeI’的扩增产物经限制性内切酶DdeI酶切,揭示了抗性材料(IchangPape-da,Meiwakumquat,MaruhikumquatandNagamikumquat)和感病材料(FlyingDragon,ValenciaorangeandPalestinesweetlime)之间的多态性差异,同时,在C.Ichangensis的自交F1代和Palestinesweetlime×IchangPapeda的杂交F1代群体中也见明显的多态性差异;对这些F1代个体进行溃疡病病原[Xanthomonasax-onopodispv.Citri(Xac)]接种作抗病性表型鉴定,结果表明,该分子标记‘19h16/DdeI’与柑桔溃疡病抗性密切相关;经纯化测序的结果进一步证明,抗性材料PCR扩增产物具有完全一致的序列和DdeI酶切位点,但感病材料缺少这一DdeI酶切位点;染色体步行(primerwalking)在BAC文库的对应单克隆中获得了一个完整的抗病基因序列,与以前获得的2个抗病基因序列‘17o6RLKP’和‘26m19RLKP’相比,‘19h16RLKP’也具有Xa21抗病基因蛋白的所有特征,包括含有一个信号肽、同样数目的亮氨酸重复序列、跨膜域和激酶域等。基于该序列的开放读码框,发展了特异性更强可靠性更高的另一分子标记,在今后的研究工作中具有较大的应用潜力。

花粉处理液在沙田柚生产上的应用

花粉处理液在沙田柚生产上的应用郑启发，候敏（广东省梅州农业学校５１４００１）沙田抽是梅州市的主要水果之一，栽种面积已达１．４万ｈｍ２，且大部分已成长为成年结果树。目前，生产上主要采取白芽抽、文旦抽、酸油等杂抽花对沙田抽进行人工辅助授粉的办法来提高座果...

植物生长调节剂诱导沙田柚单性结实的探讨

植物生长调节剂诱导沙田柚单性结实的探讨郑启发，杨淑合，杨锦华（广东省梅州农业学校５１４０１１）我们自１９９１年以来对植物生长调节剂诱导沙田柚单性结实进行了探讨，筛选出诱导沙田柚形成无籽果实较有前途的调节剂品种。材料及方法在梅州农校尧排二号山果园里选定...

柑桔线虫抗性主基因座Tyr1的特异标记开发与遗传作图改进(英文)

本文利用先期从BAC文库获得的NBS-LRR类候选抗病基因克隆序列Pt8a和Pt9a,进一步开发与柑桔线虫抗性主效基因位点Tyr1连锁的分子标记。以Pt8a和Pt9a序列作探针,通过高密度克隆印迹杂交,从BAC文库筛选出200个以上的阳性克隆,以阳性克隆插入序列设计引物,对柑桔抗线虫材料和感线虫材料开展以PCR扩增为基础的集群分离分析,发现一部分克隆序列与柑桔线虫抗性主效基因位点Tyr1紧密连锁;再通过染色体步行测序,分别从3个克隆(7A4,4L17和29F20)获得3个完整的NBS-LRR类候选抗病基因序列。从此类序列开发更高特异性的分子标记,并在利用原有分子标记的基础上,对柑桔线虫抗性杂交后代群体(9145family)构建较高密度的遗传图谱;同时,将新开发的分子标记应用于柑桔衰退病抗性杂交后代群体(9401family),以初步估算柑桔线虫抗性主效基因位点Tyr1与柑桔衰退病抗性基因Ctv的遗传距离。本文利用先期从BAC文库获得的NBS-LRR类候选抗病基因克隆序列Pt8a和Pt9a,进一步开发与柑桔线虫抗性主效基因位点Tyr1连锁的分子标记。以Pt8a和Pt9a序列作探针,通过高密度克隆印迹杂交,从BAC文库筛选出200个以上的阳性克隆,以阳性克隆插入序列设计引物,对柑桔抗线虫材料和感线虫材料开展以PCR扩增为基础的集群分离分析,发现一部分克隆序列与柑桔线虫抗性主效基因位点Tyr1紧密连锁;再通过染色体步行测序,分别从3个克隆(7A4,4L17和29F20)获得3个完整的NBS-LRR类候选抗病基因序列。从此类序列开发更高特异性的分子标记,并在利用原有分子标记的基础上,对柑桔线虫抗性杂交后代群体(9145family)构建较高密度的遗传图谱;同时,将新开发的分子标记应用于柑桔衰退病抗性杂交后代群体(9401family),以初步估算柑桔线虫抗性主效基因位点Tyr1与柑桔衰退病抗性基因Ctv的遗传距离。

低温处理的花粉稀释液对沙田柚种子数及果实品质的影响

１９９１～１９９４年在梅州以６年生沙田柚树为试材进行试验。结果表明，用冰冻（－４℃，７２小时）及低温（１０℃，７２小时）保存的不同柚品种花粉稀释液处理沙田柚花的柱头，可使果实种子数减少５８．０％～６４．２％，每果种子数从常规人工授粉的１６２粒减至５８～７０粒。果实大小及内质均有不同程度的提高。所有处理均获丰产。不同品种花粉处理液的效应无显著差异。

沙田柚遗传转化的探讨

采用含ｎｏｓ基因和人工合成柞蚕抗菌肽Ｄ基因ＡＰ－Ｄ基因（含ＣａＭＶ３５ｓ启动子）的根癌农杆菌对沙田柚外植体进行转基因研究，与根癌农杆菌共培养产生的芽、苗经Ｋｍ敏感性筛选，获得了若干转基因植株，并对这些植株进行了报告基因ｎｏｓ表达的电泳检测、同位素标记、ＡＰ－Ｄ基因为探针的点印迹杂交、外源ＡＰ－Ｄ基因的ＰＣＲ扩增和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交。结果显示，报告基因ｎｏｓ、抗菌肽Ｄ基因已转入沙田柚植株细胞中。

植物生长调节剂诱导沙田柚单性结实初探

植物生长调节剂诱导沙田柚单性结实初探郑启发，杨淑兮，杨锦华（梅州农业学校５１４０１１）植物不经受精作用而形成不含种子的果实叫单性结实（Ｐａｒｔｈｅｎｏｃａｒｐｙ）。单性结实分为刺激性结实（含激素诱导和非激素诱导）和自然的单性结实（如特有的无核品种）。...

沙田柚经生长调节剂诱导可单性结实

沙田柚经生长调节剂诱导可单性结实广东省梅州农校郑启发，杨淑兮，杨锦华植物生长调节剂诱导沙田柚（ＣｉｔｒｕｓｚｒａｎｄｌｔＶａｒｓｈａ－ｔｉｅｎ－ｙｕ）单性结实的研究，尚未见报道。我们自１９９１’１年以来对植物生长调节剂诱导沙田抽单性结实进行了探讨，筛...

植物生长调节剂诱导沙田柚单性结实的探讨

植物生长调节剂诱导沙田柚单性结实的探讨郑启发，杨淑兮，杨锦华（广东省梅州农校５１４０１１）自黄昌贤第一个用生长素诱导了正常大小的无籽西瓜后，先后成功地用ＩＡＡ、ＩＢＡ和ＢＡ对番茄、无花果、芒果、辣椒、南瓜等进行诱导获得了正常大小的无籽果实。单性结实分...

无悔的人生——记钟祥市旧口中学校长杨孟琪

1979年阳春三月,国家建委来 函,对杨孟琪的错案彻底平反了。此前,他的人生足以写一本《今古传奇》。这时的校园里柳絮杨花像雪片一样,杨孟琪的朋友、老师、同学从全国各地寄给杨孟琪的信件也如雪片一样。热烈地祝贺之后,就是热忱地帮助他回原单位,联系到对口专业工作,联系回到武汉父母身边。 晚上,杨孟琪坐在用芦苇夹成的斗室里,用竹棍支开纸糊的小窗,一股泥土的芳香迎面扑来,万里碧空,群星灿烂,早春微寒的风透进,