细胞外信号调节激酶1/2参与三氧化二砷诱导的胶质瘤细胞凋亡

目的:探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路在三氧化二砷诱导的胶质瘤细胞U251凋亡中的作用,为应用三氧化二砷治疗胶质瘤奠定基础。方法:50μmol/L三氧化二砷作用U251细胞,不同时间检测胶质瘤细胞增殖活性,半定量PCR检测ERK1/2mRNA表达,Western blot检测ERK1/2蛋白表达;Ho-echst33258染色及流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡;转染ERK1/2上游激酶MEK1,应用ERK1/2激酶抑制剂U0126观察ERK1/2通路在肿瘤凋亡及增殖中的作用;比色分析法检测Caspase-3活性的变化。结果:三氧化二砷诱导胶质瘤细胞发生明显凋亡,抑制肿瘤细胞增殖;增加ERK1/2蛋白的表达,呈时间依赖性;阻断ERK1/2信号通路后胶质瘤细胞凋亡受到抑制,Caspase-3活性下降。结论:ERK1/2信号通路在三氧化二砷诱导的胶质瘤细胞凋亡中起重要作用。

维生素D_3对黑色素瘤细胞株生长及凋亡的影响

目的研究维生素D3对黑色素瘤细胞株A375生长及凋亡的影响。方法采用四唑氮蓝比色(MTT)法检测细胞增殖,光镜观察细胞形态,流式细胞仪测定细胞周期和凋亡率,末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位酶标记(TUNEL)法计数凋亡细胞。结果10-7mol/L的1.25(OH)2D3可以抑制A375增生,改变细胞周期时相分布,致G0/G1期阻滞,加强细胞毒性化疗药物紫杉醇的作用,促进细胞凋亡。结论维生素D3可以作为细胞凋亡诱导剂,成为新一种黑色素肿瘤治疗药物。

TAT-凋亡素基因重组质粒的构建、蛋白的表达纯化及体内活性实验

目的构建TAT-凋亡素(TAT-Apoptin)质粒并提取融合蛋白,为进一步研究该蛋白功能奠定基础。方法PCR合成TAT-Apoptin基因,与pTYB2质粒连接后转入Rosetta菌,经IPTG诱导表达,几丁质亲和层析一步纯化目的蛋白,用昆明小鼠H22动物模型检测活性。结果克隆载体经过PCR筛选、测序鉴定,其核苷酸片段长度和序列与预期序列相符,诱导后融合蛋白出现在上清中,纯化出的TAT-Apoptin蛋白具有明显的抗肿瘤活性。结论该实验所构建的重组质粒pTYB2／TAT-Apoptin经诱导表达出了可溶性目的蛋白TAT-Apoptin,纯化后具有明显的生物活性,为TAT-Apoptin蛋白的进一步研究奠定了基础。

X盒结合蛋白1调控胶质瘤细胞氧化应激的研究

背景与目的:活性氧(ROS)可以通过诱导细胞氧化应激而诱导凋亡,肿瘤包括胶质瘤在体内的生长均处于高活性氧的状态,提高胶质瘤细胞对活性氧-氧化应激的敏感性可抑制肿瘤在体内的生长侵袭,而且还可以增强一些诱导活性氧的化疗药物的疗效。本研究通过干预XBP1基因的表达,观察XBP1是否可调控胶质瘤细胞对氧化应激的敏感性,并探讨其机制。方法:用siRNA转染技术抑制U251MG细胞XBP1基因的表达后对比细胞对H2O2诱导的细胞死亡、线粒体膜电位下降、活性氧堆积、以及P38磷酸化,以此来反映细胞内氧化应激的水平;并比较细胞内抗氧化分子的表达情况;将XBP1基因过表达后观察能否起到相反的效果;最后应用启动子突变技术分析XBP1对Catalase表达的影响。结果:U251MG细胞XBP1表达抑制后可以显著提高H2O2诱导的细胞死亡、线粒体膜电位下降、活性氧堆积以及延长P38的磷酸化,并降低细胞内一些抗氧化分子包括过氧化氢酶表达,XBP1过表达可以增强Catalase表达并且降低ROS堆积;启动子序列突变分析结果显示XBP1增强Catalase表达的效应完全依赖于启动子序列的CCAAT框。结论:XBP1对氧化应激引起的细胞损伤具有保护作用;其可能机制至少是通过上调Catalase的表达实现。抑制XBP1的表达可能作为一种分子靶向,对胶质瘤治疗有积极意义。

辛伐他汀对胶质瘤U251细胞侵袭及其MMP2表达的影响

目的:研究辛伐他汀(simvastatin,SMV)在体外对胶质瘤U251细胞侵袭迁移及其金属基质蛋白酶2(MMP2)的表达影响。方法:采用MTT法观察辛伐他汀对U251细胞黏附能力的影响;Transwell侵袭小室测定法检测辛伐他汀对U251细胞侵袭能力的影响;明胶酶谱实验和RT-PCR方法观察辛伐他汀对金属基质蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP2)在U251细胞中表达的影响。结果:辛伐他汀能够降低U251细胞黏附,Transwell实验表明药物处理组穿膜细胞数明显低于对照组(P<0.01),明胶酶谱与RT-PCR结果表明辛伐他汀不但降低MMP2前体蛋白的表达,而且影响其mRNA的表达。结论:辛伐他汀能够有效抑制胶质瘤U251细胞的侵袭迁移,其作用机制可能与辛伐他汀下调胶质瘤U251细胞中MMP2的表达有关。

基于文献阅读的以学生发展为中心的生物化学教学改革探索与实践

针对我校本科生缺少科研训练机会和学生不断高涨的参与大学生创新创业实践项目的意愿,本教学团队进行了基于文献阅读的生物化学教学模式的探索,旨在培养本科生的创新科研思维的同时,通过撰写综述、制作科普视频、参加大学生创新创业竞赛等多种路径全面提升学生的高阶认知能力,满足学生多元化和个性化发展需求,真正实现“以学生发展为中心”的长期培养目标,为培养“新医科”背景下的复合型医学人才提供借鉴。

“老大难”问题不再难了——阳信县国家税务局个体税收征管步入良性循环轨道

随着市场经济的不断发展,个体、私营经济迅速发展壮大。但是,由于个体私营经济情况复杂,管理难度大,加之机构分设、征管范围调整等因素,个体、私营税收管理仍是一个比较突出的“老大难”问题。

韩喜龙:舍资办起展览馆

最近，山西省稷山县沙沟村党支部书记、村委主任韩喜龙投资7万余元兴建的爱国主义教育展览馆正式开馆。

基于Pro/E和ABAQUS的直齿轮强度分析

选取一对外啮合渐开线直齿圆柱齿轮,用AGMA标准对齿轮的接触强度及弯曲强度进行计算;在Pro/E软件中精确建立该啮合齿轮的三维模型,将模型文件导入Abaqus软件,对齿轮啮合进行有限元强度分析,最后将两者的分析结果进行对比。结果表明,利用有限元方法分析齿轮的强度是可行的。

黄酮类化合物减轻阿尔茨海默病Aβ沉积及Tau过度磷酸化的作用

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是全世界患病人数最多的神经退行性疾病,从神经病理角度来看它具有以β淀粉样蛋白(amyloid β-protein,Aβ)聚集物为主形成的老年斑和Tau蛋白过度磷酸化形成的神经纤维缠结(neurofibrillary tangles,NFTs)两大特征。黄酮类化合物是广泛存在于水果、蔬菜中的一类多酚类化合物,主要有六大类。多种黄酮类化合物经研究证实具有减轻Aβ沉积以及抑制Tau蛋白过度磷酸化方面的活性。本综述主要描述了AD的两个主要病理特征和黄酮类化合物对其作用的机制。

ALAS2过表达转基因小鼠呈现髓鞘损伤和肌萎缩

氨基-γ-酮戊酸(δ-aminolevulinic acid,ALA)是血红素合成途径的第一个产物。ALA合酶(δ-aminolevulinic acid synthase,ALAS)有两种同工酶ALAS1和ALAS2,其中ALAS2仅在红系细胞表达。通过转基因技术实现全身过表达ALAS2的小鼠具有明显的肌萎缩表型,与同龄对照野生型小鼠相比,这种小鼠3月龄时神经反射实验反应时间延长,7月龄时疲劳转棒仪实验持续时间缩短,10月龄时脊髓和延髓在透射电镜下可见髓鞘板层松散且腓肠肌HE染色可见去神经支配样肌萎缩。ALA具有神经毒性,过量ALA对神经系统的损伤可能是该转基因小鼠肌萎缩成因之一。

抗肿瘤多肽基因重组、纯化方法改进及活性研究

目的改进抗肿瘤多肽30肽纯化方法并测定其活性。方法设计并合成His标签序30肽序列,与PTYB21重组后转化到大肠埃希菌Rosetta(DE3)pLysSS菌株,再经IPTG诱导、镍离子柱纯化后经SDS-PAGE电泳检测融合蛋白表达情况,DTT裂解后G25葡聚糖凝胶层析分离30肽,测定浓度、纯度后,计算产量,MTT检测30肽抗肿瘤活性。结果重组的PTYB21-His-30肽大量地表达融合蛋白,经镍离子柱层析的纯化的30肽与传统提取方法几丁质层析方法总产量基本一致,并且具有较好的抗肿瘤活性。结论重组的抗肿瘤多肽表达载体经镍离子层析后能够纯化出理想的30肽,该纯化方法操作流程简单、节约成本,有利于抗肿瘤多肽的大规模提取。

新医科背景下医学生物化学课程内外大学生创新思维培养模式的探索

医学生物化学是医科院校各专业的核心课程,是连接基础医学与临床医学的重要桥梁,其理论和技术被广泛应用于分析及阐述疾病的发生发展机制、疾病的诊断和防治等。基础医学阶段是医学本科生创新思维培养的黄金期。培养具有国际视野、创新精神、创业能力和社会责任感的优秀医学本科生是医学高校人才培养模式的新探索。在“新医科”背景下,授课教师结合自身从事的科研工作,通过相关授课内容课内、课外的互补学习培养学生创新性思维,促进医学本科生全面发展。

三氧化二砷对胶质瘤U_(251)细胞侵袭迁移和MMP2表达的影响

目的:研究三氧化二砷(As2O3)在体外对胶质瘤U251细胞侵袭迁移及金属基质蛋白酶2(MMP2)表达的影响。方法:采用台盼兰法(MTT法)观察As2O3对U251细胞粘附能力的影响;Transwell侵袭小室测定法检测As2O3对U251细胞侵袭能力的影响;明胶酶谱实验和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法观察As2O3对金属基质蛋白酶2(Matrix metalloproteinase2,MMP2)在U251细胞中表达的影响。结果:As2O3能够降低U251细胞粘附能力,Transwell实验中药物处理组穿膜细胞数明显低于对照组(P<0.01),As2O3不但降低MMP2前体蛋白的表达,而且影响其mRNA的表达。结论:As2O3能够有效抑制胶质瘤U251细胞的侵袭迁移,其作用机制可能与As2O3下调胶质瘤U251细胞中MMP2的表达有关。

抗肿瘤多肽Peptide30的纯化及抗肿瘤活性研究

目的采用镍离子亲和层析从含有PTYB21-His-p30质粒的菌株中提取抗肿瘤多肽30肽,即Peptide30,检测Peptide30对肿瘤细胞和实体瘤的抗肿瘤活性。方法培养PTYB21菌株,IPTG诱导表达,经超声离心等方法后,取其上清(含30肽融合蛋白),DTT裂解目的蛋白后,经镍柱层析分离Peptide30肽后G25凝胶过滤层析除盐,然后检测Peptide30肽浓度和纯度,经细胞克隆形成实验和动物实验检测Peptide30的抗肿瘤活性。结果经镍柱亲和层析纯化的Peptide30浓度为:451μg/mL,纯度为:95.5%;细胞克隆形成实验结果表明Peptide30肽能够显著降低U251胶质瘤细胞和HGC27胃癌细胞的存活率,动物实验结果显示:Peptide30的抑瘤率达到63.49%,高于41肽抑瘤率。结论加入His标签的PTYB21-30肽质粒转入大肠埃希菌Rosetta(DE3) pLysSS后,经诱导表达及镍柱亲和层析纯化后能够得到高纯度的抗肿瘤多肽Peptide30,该Peptide30具有较好的体外、体内抗肿瘤活性。

开元贤相裴耀卿

唐开元年间,社会政治安定,经济繁荣,国力强盛,国威远扬,是唐朝开国以来黄金时期、极盛的顶点,史称“开元盛世”。其形成的原因,虽然有多方面的因素,但与前期辅佐唐玄宗励精图治的均是良相贤才有直接关系。《新唐书》对此作了高度评价:“开元之盛,所置辅佐皆得贤才。”在这些良相贤辅中,裴耀卿就是其中之一。

侯鹏华:大学生回乡当上“猪司令”

一个年轻有为的大学生,放弃人人羡慕的工作,却管理着大大小小近700头猪;一个沈阳农大毕业的高材生,却回到家乡当了一名"猪倌"。难怪大家都称他为"猪司令"。他就是稷山县翟店镇北小宁村、今年刚过而立之年的侯鹏华。2014年,侯鹏华毕业于辽宁沈阳农业大学动物医学专业。