隐孢子虫感染小鼠动物模型

目的建立隐孢子虫感染小鼠动物模型,为药物筛选和分子生物学研究奠定基础。方法饮水中添加地塞米松(DEX)抑制鼠免疫功能,5d后经口灌喂隐孢子虫卵囊感染小鼠。比较粪便中排卵囊量和小鼠生存情况,从不同品系小鼠(KM、BALB/c)、不同鼠龄(乳鼠断乳2d、56周、1012周)、不同免疫抑制剂量(0,2.5,5,7.5,10,12.5mg/L)、不同卵囊接种量(75,1.5×102,1.5×103,1.5×104,3.0×104)及不同保存时间(1,2,6,8个月)等影响小鼠感染的因素中,选出最佳条件,建立稳定的隐孢子虫感染小鼠动物模型。结果(1)KM、BALB/c两种小鼠都能感染微小隐孢子虫,BALB/c组小鼠开始死亡的时间比KM组的早,BALB/c组收集的卵囊数比KM组的少;(2)乳鼠组小鼠排卵囊的数量总体大于其他年龄段小鼠,但是其生存时间较短;(3)7.5,10mg/LDEX剂量组排卵囊数量较多,且持续整个实验期,低于此剂量组小鼠排卵囊数量少,多于此剂量组易死亡;(4)接种75个以上微小隐孢子虫卵囊均能使小鼠感染;(5)保存1,2,6,8个月的微小隐孢子虫卵囊均能感染小鼠。结论采用56周龄的KM雌性鼠,在饮水中添加7.5～10mg/LDEX,接种75个以上保存时间在8个月内的微小隐孢子虫卵囊可以建立较稳定的感染模型。

隐孢子虫病动物模型及其防治研究进展

隐孢子虫病可致人和多种动物的腹泻等症状,是一种人兽共患原虫病,给人类生命安全带来严重威胁,也给畜牧业带来巨大的损失。建立稳定、持续的动物模型可以帮助寻找合适的控制方法和治疗药物。现就隐孢子虫的动物模型、防治等方面的研究情况作一综述。

对基层兽医实验室考核认证的管理体系探讨

农业部2009年规定各级兽医实验室必须通过考核认证,方可承担动物疫病诊断、监测和检测任务。加强基层兽医实验室体系建设、提高员工素质、提高检测能力和管理水平,使兽医实验室的设施环境、仪器设备、人员、安全管理、检测工作、档案管理和现场考核等7个方面都符合要求才能通过考核,获得认证合格证书。

猪肉中一种发光菌的分离和鉴定

对一起猪肉出现的发光现象进行检测,结果表明,猪肉发光是猪肉表面污染发光细菌所致,对样品进行细菌分离培养,对纯化后该菌的16S rDNA进行PCR扩增、测序、比较,结果显示,该菌与发光杆菌的16S rDNA有99%的同源性,进一步的生化鉴定结果也与其相符。

食品微生物CNAS检测能力验证结果与分析

目的提高食品安全检测能力,增强实验室竞争力。方法 2011年,本中心参加CNAS认可能力验证合格提供者山东出入境检验检疫局(CNASPT0011)组织的食品微生物能力验证。依据国家标准GB4789.2-2010和GB4789.4-2010,采用多稀释度、多平行样法,对代码为PTA菌落总数、PTB-1沙门氏菌、PTB-2沙门氏菌样品进行检测鉴定。结果样品PTA中菌落总数为590cfu/mL;样品PTB-1沙门氏菌:未检出/10mL;样品PTB-2沙门氏菌:检出/10mL。结论 3个样品测试均取得满意结果,且Z(比分值)小于1(Z值绝对值小于等于2为满意结果)。本中心实验室2个项目均取得满意结果。

湖南省长沙市动物病原微生物实验室生物安全管理现状

为了解长沙市基层动物病原微生物实验室生物安全工作现状,以便加强实验室生物安全管理,自2019年以来长沙市连续4年开展动物病原微生物实验室生物安全专项检查,调查基层实验室的硬件设施、人员配备、检测活动和废弃处理等情况,发现存在建设不规范、管理缺失、制度不全、人员能力不足等生物安全管理方面的问题。长沙市通过督查整改、培训宣传和举办应急演练等措施,进一步提升了基层实验室整体生物安全水平。建议今后继续强化安全生产责任,完善实验设施设备,推动专业队伍建设等,进一步确保动物病原微生物实验室的生物安全与检测准确。

硝唑尼特抗免疫抑制小鼠隐孢子虫活性试验

研究硝唑尼特抗隐孢子虫的活性,采用地塞米松抑制昆明鼠免疫功能,经口接种感染微小隐孢子虫孢子化卵囊,成功制备出微小隐孢子虫感染的动物模型。将感染微小隐孢子虫的小鼠随机分为感染对照组以及高、中、低剂量3个药物剂量组,连续经口灌服硝唑尼特治疗1周,观察每只小鼠每天排出微小隐孢子虫卵囊的数量,以感染抑制率来评价硝唑尼特抗微小隐孢子虫的活性。结果表明,200 mg/(kg.d)剂量组能显著减少小鼠排出隐孢子虫卵囊的数量,对治疗微小隐孢子虫感染具有较好的疗效。

一株猪源optrA阳性屎肠球菌的分离鉴定及基因组特征分析

为了调查湖南浏阳地区某生猪养殖场屎肠球菌的耐药情况及耐药基因可能存在的传播机制,从浏阳地区某猪场中采集不同生长阶段猪只肛拭子以及环境样本共345份,从中分离鉴定出76株肠球菌,其中屎肠球菌1株(1.3%),采用琼脂扩散法考察屎肠球菌对10种抗菌药物的耐药情况,并对该菌株进行全基因组测序,检测其耐药基因和毒力基因的分布情况,最后对optrA特定基因组结构进行分析。结果显示,从猪只肛拭子样本分离的编号Ec63菌株,经全基因组测序组装、拼接,得到一条大小为2759403 bp的环状DNA(GC含量为37.9%),携带9大类抗菌药的10种耐药基因,均定位于染色体上,其中氨基糖苷类耐药基因数量最多,且携带有噁唑烷酮类耐药基因optrA;此外,该菌株携带sagA等毒力基因21个,不含有强毒菌株的毒力基因序列。药物敏感性试验结果表明,该菌株对头孢噻呋、四环素呈现高度耐药,对恩诺沙星、万古霉素、红霉素、庆大霉素、头孢西丁、氟苯尼考、利奈唑胺和甲氧苄啶/磺胺甲噁唑敏感。特定基因组结构分析显示,该菌株存在fexA-optrA核心遗传环境。结果表明,该菌株对机体表现弱毒力的潜力,但存在多耐药性(MDR)基因,是一株多重耐药屎肠球菌。fexA-optrA的基因遗传环境在屎肠球菌耐药传播中起着重要作用,对公共卫生安全具有潜在威胁。本研究结果可为屎肠球菌在养殖业中的应用提供参考依据。

肠道出血综合征研究进展

肠道出血综合征(HBS)是近年来发现的反刍动物的肠道疾病,其原因不甚明了。而从俄勒冈大学的实验中意外地发现,在HBS患病奶牛和对照奶牛的饲料、胃肠内容物、胃肠壁、淋巴结和血液等病料中都检测到烟曲霉菌和梭菌,怀疑这两种微生物可能是HBS的致病病原。经进一步研究表明,在HBS病牛和对照奶牛中都检测到梭菌毒素基因,而烟曲霉菌只在患病奶牛中检测到,对照牛则呈阴性。由此可见,烟曲霉菌与HBS之间具有密切的联系,烟曲霉菌很可能就是HBS的一个重要的病原学因素。目前,已有一种称为OmniGen-AF的产品可有效预防HBS的发生。

不同疫苗对猪瘟及猪口蹄疫抗体效价的影响

采用三种不同猪瘟疫苗分别对A、B、C三组猪群在30日龄进行首次免疫,65日龄加强免疫,采用两种不同口蹄疫疫苗分别对A、C组猪在40日龄首次免疫,75日龄加强免疫,与C组相同疫苗对B组40日龄只一次免疫,应用ELISA检测免疫后不同日龄猪瘟、口蹄疫抗体。猪瘟脾淋苗和猪瘟活疫苗(Ⅱ)相对猪瘟细胞苗首免效果好,口蹄疫多肽苗比浓缩苗抗体水平高,且一次免疫能达到较好免疫效果。

2012年长沙市秋季重大动物疫病疫苗免疫效果评价与分析

为有效预防和控制我市重大动物疫病，科学评估禽流感等重大动物疫病的疫苗免疫效果，提高我市的防控和预警预报能力，更好的指导我市重大动物疫病的防控工作，进行了此次猪瘟、口蹄疫、高致病性猪蓝耳病、禽流感、新城疫等重大动物疫病疫苗免疫效果的评估。现将结果报告如下。

浅谈水生动物疫病检测实验室建设及检测要求

水生动物疫病检测实验室的建设在选址布局、仪器设备、人员能力等方面有具体要求,样品的采集、保存、检测、记录和实验室管理也是检测关键因素,建议尽快制定检测标准,提升检测时效,基层实验室积极参加水生动物疫病实验室监测能力验证,规范实验室管理,为现代渔业健康有序发展起到积极作用。

长沙市生猪口蹄疫免疫效果的评价

针对当前我市生猪口蹄疫免疫效果不佳的现象,本试验分别对规模化养猪场和农村散养户进行口蹄疫免疫抗体保护水平的评价,单次免疫1mL组、单次免疫2mL组和二次免疫1mL组,整体免疫抗体合格率均低于70%,仅二次免疫2mL组整体免疫抗体水平均能达70%以上。因此在农村大面积免疫时,有必要对生猪全面进行口蹄疫加强免疫,才能达到国家规定的整体免疫保护水平。我们建议农村大面积免疫生猪口蹄疫的较佳免疫程序为:仔猪断奶后首次免疫1mL,30d后加强免疫2mL。

青蒿素及其衍生物抗寄生虫的研究进展

本文介绍了青蒿素及其衍生物的基本研究状况和它们抗寄生虫病的研究进展,青蒿素及其衍生物主要的抗寄生虫作用表现为抗疟原虫和抗血吸虫,它们抗弓形虫、卡氏肺孢子虫、犬附红细胞体和球虫的作用也较强,对其进一步的研制和开发具有广阔的前景。

规模化猪场主要疫病抗体水平监测与免疫效果分析

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测了长沙地区10个规模猪场519份血清4种疫病抗体水平。检测结果显示:猪瘟(HC)、猪口蹄疫(FMD)、猪伪狂犬病(PR)、猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)抗体阳性率分别为阳性率分别为84.39%、68.40%、57.03%、57.23%。结果表明:猪瘟免疫效果良好,其他疫病免疫效果不理想。

2020—2022年湖南省长沙市城区犬狂犬病免疫效果分析

为掌握我国湖南省长沙市城区犬狂犬病免疫情况,分析影响免疫抗体合格率的风险因素,本试验使用狂犬病病毒酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测试剂盒,对2020—2022年采集的3291份犬血液样品进行抗体滴度检测,并对长沙市犬狂犬病监测点数量和分布情况以及犬只养殖类型、性别、年龄、免疫次数、免疫后采样间隔时间和疫苗种类进行分析。结果显示,长沙市3年监测覆盖面持续扩大,但监测区域主要覆盖人口密集的城区,未覆盖农村地区。2020—2022年长沙市城区犬狂犬病免疫抗体年平均合格率由70.21%上升至89.76%,再下降至74.85%,即总体呈先上升再下降的趋势。不同地区比较,芙蓉区(86.14%)、雨花区(82.98%)和长沙县(80.70%)3年免疫抗体平均合格率较高,宁乡市(65.63%)最低。不同犬只养殖类型、年龄、免疫次数和免疫后采样间隔时间对免疫抗体合格率的影响差异显著(P<0.05);而性别和疫苗种类对免疫抗体合格率的影响差异不显著(P>0.05)。本试验为长沙市狂犬病的综合防控提供了数据支持。

实时荧光定量PCR技术在水产养殖研究中的应用

实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR, qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实现PCR进程的实时监测,进而对未知模板进行定量分析的一种检测技术。qPCR是在普通PCR定性检测基础上发展而来的核酸定量技术。在qPCR技术发展的过程中,两项重要发现起到了关键作用:一是TaqDNA聚合酶的5’端核酸外切酶活性被发现,它能降解特异性荧光标记的探针,使得间接定量检测PCR产物成为可能;二是荧光双标记探针被使用在密闭的反应管中,能实时地监测PCR反应的全过程。

长沙地区规模化猪场主要疫病抗体水平监测与免疫效果分析

近年来,长沙地区养猪规模有了很大的提高,随之而来的猪场饲养密度加大,饲养管理不科学,卫生防疫制度和隔离措施的不规范,再加上猪场的猪群流动和引种工作频繁,造成生猪疫病日渐复杂。生猪生产的主要的传染病在集约化养猪场时有发生,给养猪业造成的危害越来越大。

长沙市非洲猪瘟病毒核酸检测实验室现状调查

为全面了解非洲猪瘟检测实验室能力水平,长沙市动植物疫病预防控制中心通过问卷调查、能力比对和实地调研的方式,2019-2021年连续对基层非洲猪瘟检测实验室组织开展摸底调查。结果显示:长沙市具备非洲猪瘟检测能力的实验室共30家。其中:动物疫控机构实验室6家,承担主要监测任务;企业及第三方实验室24家,提供屠宰、监测、调运等方面检测数据,起到辅助作用。但县级以下基层实验室存在区域规划不合理、人员配置不足、生物安全管理体系不完善等问题。综上,实验室检测工作在非洲猪瘟防控上起到关键作用,但基层检测能力与生物安全管理水平仍有较大提升空间。