基于网络药理学和细胞实验探讨六味顺激方治疗肠易激综合征的作用

目的基于网络药理学和细胞实验探讨六味顺激方治疗肠易激综合征的关键靶点基因和信号通路。方法通过TCMSP数据库检索六味顺激方中药物活性成分和靶点基因,与DisGeNET、Pharm和CTD数据库中获取的肠易激综合征疾病靶点相映射,并基于GEO数据库筛选肠易激综合征与健康人差异基因,采用R语言和Cytoscape软件对关键靶点基因进行蛋白质相互作用网络(PPI)、基因本体(GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。基于脂多糖诱导的NCM460细胞模型,通过流式细胞术、免疫荧光、ELISA、Western blot、RT-qPCR法对关键靶点基因进行验证。结果检索得到六味顺激方活性成分85个,药物靶点274个,肠易激综合征相关靶点416个,药物和疾病交集靶点82个,其中人血管内皮生长因子A(VEGF-A)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)、蛋白激酶(Akt1)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、原癌基因(JUN)、白细胞介素-1β(IL-1β)、细胞趋化因子8(CXCL8)、丝裂原活化蛋白激酶8(MAPK8)、细胞趋化因子2(CCL2)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)是六味顺激方治疗肠易激综合征的关键靶点,细胞对脂多糖的应答和TNF信号通路可能是六味顺激方治疗肠易激综合征的效应机制。细胞实验结果显示,六味顺激方在降低VEGFR表达的同时抑制MAPK信号通路的主要下游靶点蛋白(ERK、JNK和JUN),进而减少炎症因子、趋化因子、血管生成因子和黏附因子的释放,缓解细胞凋亡同时抑制炎症反应恶性循环,从而缓解肠易激综合征。结论六味顺激方能通过多靶点、多通路发挥治疗肠易激综合征的效应,其机制可能是通过靶向抑制VEGFR并抑制MAPK信号通路下游关键蛋白改善血管生成、炎症反应。

黄芩汤治疗慢性复发型溃疡性结肠炎大肠湿热证小鼠的作用机制研究

目的探讨黄芩汤在慢性复发型溃疡性结肠炎大肠湿热证(UCM)中清热利湿的作用机理。方法将40只小鼠随机分为正常组、模型组及黄芩汤低、中、高剂量组。模型组小鼠使用人工气候箱、白酒、高脂饲料及不同浓度的葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液联合诱导;黄芩汤组在造模第35天至第44天给予不同剂量黄芩汤干扰;实验期间,观察小鼠一般情况,包含体质量、饮食、粪便等,并进行湿热评分、疾病活动指数(DAI)评分;通过课题组研发的My color软件检测爪尾红色值占比变化;HE染色观察结肠及舌组织病理变化;检测小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)含量;Western Blot法检测结肠组织中水通道蛋白及NF-κB信号通路相关蛋白表达量;ELISA法检测干扰素γ(IFN-γ)、脂多糖(LPS)、巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)、血栓素B2(TXB2)含量;qRT-PCR法检测结肠组织中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和Toll样受体4(TLR4)表达水平。结果与正常组比较,模型组体质量降低,DAI评分、湿热评分、爪尾红色值占比增加;舌组织丝状乳头紊乱、角质层增厚,结肠组织受损严重,长度缩短;结肠组织TXB2、IFN-γ含量、血清MIF含量增加,LPS水平增加;血清SOD活性降低、MPO活性增加;IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA水平上升;结肠AQP1、AQP3、AQP8蛋白表达降低;IκB磷酸化增加,核外p65表达减少,核内p65表达增加,TLR4 mRNA水平上升,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,黄芩汤高剂量组体质量下降幅度减少,DAI评分、湿热评分降低,爪尾图像红色比例下降,结肠长度增加,病理情况改善,血清中的MPO、MIF、LPS水平降低,SOD含量增加,结肠组织中的TXB2、IFN-γ水平减少,IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA水平下调,结肠AQP1、AQP3、AQP8蛋白表达增高,TLR4 mRNA水平下降,IκB磷酸化减少,核外p65表达增加,核内p65表达减少,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论黄芩汤对慢性复发型UC大肠湿热证小鼠模型有明显的治疗作用,其清热利湿机理可能与抑制NF-κB信号通路介导的肠道水液紊乱相关。

黄芩汤对湿热型溃疡性结肠炎大鼠调节性T细胞功能的影响

目的:观察不同剂量黄芩汤对湿热型溃疡性结肠炎大鼠调节性T细胞(Tr细胞)功能的影响,从而探讨该方治疗该病的免疫学机制。方法:采用高脂高糖辛辣饮食干预加2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠法造出湿热型溃疡性结肠炎的大鼠模型;造模成功后,分别采用大中小剂量黄芩汤、白头翁汤、柳氮磺吡啶(SASP)及生理盐水对模型进行干预;用ELISA法检测大鼠血清白介素10(IL-10)和转化生长因子β1(TGF-β1),用实时PCR(Real-tim e PCR)法检测大鼠结肠组织Foxp3 mRNA含量。结果:模型组大鼠血清IL-10、TGF-β1及结肠组织Foxp3 mRNA含量均较正常对照组明显下降(P<0.01);经干预后以上指标有不同程度回升,尤以黄芩汤中剂量组最为明显,疗效优于阳性对照药白头翁汤及SASP(P<0.05,P<0.01)。结论:黄芩汤可能通过上调以上指标而调节Tr细胞的功能,从而实现自身免疫调节的。

肥大细胞在湿热型溃疡性结肠炎大鼠的表达与黄芩汤的调节

目的探讨肥大细胞(MC)在湿热型溃疡性结肠炎(UC)发病机制中的作用以及黄芩汤对湿热型UC模型中MC的调节。方法采用高脂高糖饲料联合高温高湿人工气候模拟法造出湿热型体质,结合三硝基苯磺酸灌肠法诱发UC最终建立湿热型UC大鼠模型;造模成功后将大鼠分为模型组(n=15)、黄芩汤组(n=13)及美沙拉嗪组(n=12),灌胃治疗1周后,采用HE染色法观察病变部位炎症细胞浸润程度,甲苯胺蓝改良染色法检测MC形态、数目及脱颗粒率,免疫组化SP法检测类胰蛋白酶(TA),ELISA法检测血清IL-6。结果与空白对照组(n=15)相比,模型大鼠结肠病理切片炎症浸润程度、MC数目、TA、IL-6明显升高(P<0.05);治疗后黄芩汤及美沙拉嗪组以上指标均较模型对照组降低(P<0.05),且两种药物的效应无明显组间差异(P>0.05)。结论 MC等肠粘膜局部免疫细胞在湿热型UC发病机制中发挥着重要作用;黄芩汤可降低炎症浸润程度,减少MC数目,降低TA的释放,抑制IL-6的分泌,此可能为黄芩汤治疗湿热型UC的机制。

枳术汤对脾虚便秘小鼠通便作用的实验研究

目的:观察枳术汤对脾虚便秘小鼠的通便作用。方法:以饥饱失常、过度疲劳配合禁水不禁食的方法进行脾虚便秘模型的复制,观察大、中、小3个剂量的积术汤对脾虚便秘小鼠的通便作用,以便秘通为阳性对照药。结果:枳术汤可使正常及脾虚便秘小鼠第1次排黑便的时间缩短、黑便粒数和粪便重量增加,尤以大、中剂量组效果明显,呈现了一定的量效关系,作用优于便秘通。结论:枳术汤对脾虚便秘小鼠有良好的通便作用。

便秘治疗机制研究思路探讨

就近年来中西医对便秘的研究状况进行简单回顾,认为现代医学对便秘的流行病学、发病机制的研究已取得了一定进展,但尚需加强。治疗上中医药有着独特的疗效,特别是对虚性便秘,且具有不易引起药物依赖性的优势,故存在着潜在而广阔的开发前景,但其治疗机制不清;目前已有研究提示,与胃肠运动有关脑肠肽的分泌及表达异常与便秘密切相关。故从该角度深入探讨中药治疗便秘获效的作用靶点可能对其机制的阐明有较好的启示作用。

枳术汤对脾虚便秘小鼠胃肠运动的影响(英文)

背景:便秘尤其是脾虚运化无力所致的便秘运用一般的通便药常常难以奏效,健脾理气助运导滞可能是解决这一问题的理想途径。目的:观察经典名方枳术汤对脾虚便秘小鼠胃肠运动的影响。设计:随机对照实验。单位:广东医学院中医系及广州中医药大学脾胃研究所。材料:实验于2002-06/12在广州中医药大学脾胃研究所完成。选用普通级NIH小鼠328只。方法:以饥饱失常、过度疲劳配合禁水不禁食的方法进行脾虚便秘模型的复制,观察大、中、小3个剂量的枳术汤对脾虚便秘小鼠和正常小鼠的排便作用及肠推进功能的影响,以中药便秘通为阳性对照药。对正常小鼠排便及肠推进实验分为大、中、小枳术汤、便秘通及正常对照共5组;对脾虚便秘模型小鼠的排便作用上述分组加上模型自然恢复组共6组,负荷肠推进实验加上阿托品组共6组。给药后观察小鼠第1次排出黑便的时间,排便的粒数、排出粪便的重量,计算小肠的推进百分率。主要观察指标:①枳术汤对正常小鼠及脾虚模型小鼠排便作用的观察。②枳术汤对正常小鼠及阿托品负荷小鼠肠推进功能的影响。结果:共纳入小鼠328只,有9只因灌胃不慎致死亡,进入结果分析319只。枳术汤对小鼠排便作用的影响:①对正常小鼠,枳术汤各剂量组与蒸馏水组比较,第1次排黑便时间明显缩短、黑便粒数及粪便重量均有明显增加,但以大、中剂量枳术汤效果为优。②与正常组比较,模型组第1次黑便排出时间明显增加,排便粒数、排便重量明显减少。大、中剂量的枳术汤可使模型小鼠第1次黑便排出时间明显缩短,粪便粒数和粪便重量增加,作用优于对照药便秘通。枳术汤对小鼠小肠推进功能的影响:①枳术汤各给药组对正常小鼠小肠的推进率较蒸馏水组有明显升高。②增加阿托品负荷后,可使小肠推进百分率较正常对照组明显减少,给药各组小肠推进百分率则较阿托品组明显加快。结论:枳术汤能可使正常及脾虚便秘模型小鼠第1次排黑便的时间缩短、黑便粒数和粪便重量增加;使正常小鼠小肠肠推进率升高,并对阿托品引起的小肠推进抑制有较好的拮抗作用;各实验均以大、中剂量组效果明显,呈现了一定的量效关系,作用优于对照药便秘通。

枳术汤对脾虚便秘小鼠胃动素和降钙素基因相关肽靶向调控的实验研究

目的观察枳术汤对脾虚便秘小鼠胃动素(motilin,MTL)和降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)含量的影响,探讨枳术汤对上述指标的靶向调控机制。方法采用番泻叶泄泻、饥饱失常以及限制饮水等复合因素造模方法建立脾虚便秘小鼠模型,造模组分别给予生理盐水、麻仁软胶囊、枳术汤治疗,用免疫组织化学方法检测胃窦、十二指肠、结肠MTL和CGRP变化。结果模型小鼠胃动素含量较空白组降低,而降钙素基因相关肽较空白组升高;治疗后枳术汤组胃动素含量较其他组升高,而降钙素基因相关肽较其他组降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论枳术汤能使异常改变的胃动素和降钙素基因相关肽的含量恢复至正常水平,表明本方可能是通过对胃肠激素水平的影响而达到有效治疗脾虚滞结便秘的目的。

县级党政领导正职胜任力模型研究

为解决目前县级党政领导人才选拔任用工作中存在的选拔标准不完善等突出问题,有必要研究县级党政领导人才胜任力模型。胜任力模型包括45个要素,分为知识、能力、素质、个性特征4个维度,每个维度又可分为一般和关键两个维度,力求能力结构的全面性、合理性和实用性。

虚性便秘的研究思路

对近年来中西医对便秘的研究状况进行简单回顾 ,认为现代医学对便秘流行病学、发病机制的研究已取得了一定进展 ,但尚需加强。治疗上 ,中医药有着独特疗效 ,特别是对虚性便秘 ,且具有不易引起药物依赖性的优势 ,但其治疗机制不清。目前已有研究提示 ,与胃肠运动有关脑肠肽的分泌及表达异常与便秘密切相关 。

国外医疗技术准入制度比较

近20年来,大多数国家采用了具有正面影响的卫生保健技术评估、准入制度,以决定医疗技术的取舍。其在临床医疗中发挥了重要作用。

县域经济发展与县级党政领导正职的胜任力模型研究——以广东省为例

县级党政领导正职是否具有发展县域经济的能力素质是衡量其执政能力高低的试金石。本研究对广东省县级党委领导正职和政府领导正职的胜任力特征进行了比较分析,结果表明,党委领导正职和政府领导正职胜任力模型结构相同,胜任力要素重要性认同度差别无统计学意义。其中,认同度较高的能力素质与县级党政领导正职发展县域经济的执政能力有着高相关性。本研究结果提示:县级党政领导正职的选拔、任用和培养必须依据其胜任力模型,尤其依据模型中与发展县域经济有着较高相关性的核心能力素质,唯有如此,才能确保选准、育好和用好县级党政领导正职,才能确保县域经济的快速发展。

花生四烯酸代谢物在湿热型溃疡性结肠炎大鼠的表达与调节

目的:探讨花生四烯酸(AA)代谢物在湿热型溃疡性结肠炎(UC)大鼠发病的作用以及黄芩汤的调节。方法:采用高脂高糖饲料结合人工气候箱法造成大鼠湿热,使用三硝基苯磺酸灌肠造成湿热型UC模型;将造模大鼠分为模型组(n=12)、黄芩汤治疗组(n=13)及美沙拉嗪组(n=12)。治疗两周后用ELISA法检测大鼠前列腺素E2(PGE2)、血小板活化因子(PAF)、白三烯B4(LTB4)及环氧合酶-2(COX-2)含量;检测甘油三酯(TG)及总胆固醇(CH)含量并计算粪便脂肪球数量从而反映湿热程度;对结肠进行肉眼组织学评分从而评价UC的严重程度;将AA代谢物与以上湿热型UC指标进行相关性分析。结果:与空白组(n=12)比较,造模组血清及结肠PGE2、PAF、LTB4及COX-2含量明显升高(P<0.05);治疗后黄芩汤组的PGE2及LTB4均显著低于美沙拉嗪组(P<0.05),但PAF及COX-2无组间差异。湿热指标方面,治疗后黄芩汤组血脂及粪便脂肪球数量均显著低于美沙拉嗪组(P<0.05);UC方面,黄芩汤及美沙拉嗪组的组织学评分无统计学差异。相关性分析显示组织评分与AA代谢物、血脂及粪便脂肪球均呈显著正相关性(r>0.930,P<0.01)。结论:AA代谢物在湿热型UC大鼠血清及结肠明显升高,且与反映湿热的血脂及粪便脂肪球、与反映UC程度的组织学评分均呈正相关性;黄芩汤对代谢物PGE2、LTB4及对湿热指标的调节作用优于美沙拉嗪。

枳术汤加减治疗便秘型结肠激惹综合征39例

结肠激惹综合征(IBS)发病机制尚未完全阐明,可能与遗传、细菌感染、精神及肠道动力学改变等有关.目前国内外治疗该病主要采用中西药疗法、行为疗法、心理疗法等方法,但均缺乏特异性.笔者以枳术汤加减治疗便秘型IBS,收到较好疗效,现报道如下.

疏肝健脾法治疗HP相关性慢性胃炎44例临床观察

以疏肝健脾法治疗４４例ＨＰ相关性慢性胃炎患者，结果治疗组和对照组比较，２组间胃脘痛、吞酸、嘈杂症状的疗效比较，差异有显著性意义（Ｐ＜００５）；胃镜疗效比较，经Ｒｉｄｉｔ分析，２组疗效差异有显著性意义（Ｐ＜００５）；２组在改善胃窦部炎症与活动性方面，差异均有显著性意义（Ｐ＜００５），ＨＰ清除率分别为８６３６％（３８／４４）、５２％（１３／２５），经χ２检验，Ｐ＜００５。

枳术汤对脾虚便秘小鼠结肠肥大细胞与胃肠激素的影响

目的观察枳术汤对脾虚便秘小鼠结肠粘膜肥大细胞(MC)的影响及其与P物质(SP)、生长抑素(SS)免疫反应阳性的相关性,探讨该方治疗脾虚便秘的可能作用机制。方法采用饥饱失常和过度疲劳配合燥结便秘的方法复制小鼠脾虚便秘模型,甲苯胺蓝改良法及LSAB免疫组织化学标记法进行MC和SP、SS的检测,用IMS型彩色图像系统和免疫组化分析软件进行分析。结果脾虚便秘模型小鼠结肠粘膜肥大细胞密度明显降低;其MC密度与结肠粘膜SP免疫反应阳性强度均值(r=0.6508,P<0.01)、面积(r=0.684,P<0.01)呈正相关;而与SS免疫反应阳性强度均值(r=-0.7568,P<0.01)、面积(r=-0.683,P<0.01)呈负相关。大、中剂量的枳术汤能使脾虚便秘小鼠结肠粘膜MC密度增加,并一定程度上使SP免疫反应阳性增强,SS的免疫反应阳性减弱。结论调节肠壁粘膜SP、SS免疫反应阳性强度,影响MC释放5-HT、组胺从而调整胃肠运动功能,这可能是枳术汤治疗脾虚便秘的机制之一。

基于胜任力模型的党政领导人才执政能力建设研究

胜任力模型,是建立科学的人才评价与使用机制的前提与基础。本文论述了党政领导人才执政能力建设与胜任力模型的关系,以及建立党政领导人才胜任力模型的必要性,并就基于胜任力模型的党政领导人才执政能力建设的途径和方法进行了探讨。

广东省高等医学专业学生就业能力培养与人才培养结构调整问题调查研究

本文主要从医学人才结构和专业结构的调整等方面来改善毕业生就业难的现状,以期通过调整人才培养结构,扩大就业率,主动适应广东省经济结构战略性调整、人才市场需求和提高国际竞争力,努力形成与国家和广东经济、科技和社会发展相适应的高等医学教育人才培养结构。

更新观念 加强医学院校人力资源管理改革

人才战略是实现医学院校可持续发展的根本大计。文章强调了加强人力资源建设对医学院校发展的重要性 ,阐明了医学院校人力资源建设的主要任务 ,提倡树立人力资源建设的新理念 ,探索了新的医学院校人力资源管理机制。