β-淀粉样蛋白的代谢机制

β-淀粉样蛋白（amyloid-β,Aβ）是由淀粉样前体蛋白（amyloid precursor protein,APP）经β-和γ-分泌酶的蛋白水解作用而产生的含有39-43个氨基酸的多肽（4.5 kD）,它是构成阿尔兹海默症（Alzheimer’s disease,AD）患者脑内的特征性沉积物,老年斑（senile plaques,SP）的核心成分。

股骨近端仿生髓内钉治疗股骨转子间骨折的近期疗效分析

目的探讨股骨近端仿生髓内钉(proximal femur bionic nail,PFBN)治疗股骨转子间骨折的手术操作要点及近期临床疗效。方法回顾性分析2021年10月至2022年3月安徽医科大学第二附属医院创伤骨科收治的13例股骨转子间骨折患者资料,其中男6例,女7例;年龄为51~85岁,平均(67.85±9.49)岁。骨折按AO分型,31-A1型4例,31-A2型9例。13例患者均采用PFBN治疗。记录患者的住院时间、手术时间、术中透视次数、失血量、骨折复位质量、骨折愈合时间及并发症等情况。结果13例患者随访4~9个月,平均(7.38±1.45)个月。本组患者住院时间7~15 d,平均(11.38±2.10)d;手术时间72~150 min,平均(104.62±24.45)min;术中透视次数17~38次,平均(26.23±6.21)次;术中失血量25~120 mL,平均(71.54±29.61)mL;骨折愈合时间3~6个月,平均(3.85±0.99)个月。采用Fogagnolo标准评定骨折复位质量,优10例,可3例;末次随访时采用Harris髋关节功能评分系统评定髋关节功能,优8例,良4例,可1例。随访期间,无一例患者出现内固定物脱出、骨折愈合不良以及感染等并发症。结论PFBN治疗股骨转子间骨折操作简便,能通过微创切口插入髓内钉主钉、拉力螺钉和横向张力螺钉,固定可靠,近期疗效良好。

诱导性多能干细胞的诱导培养和鉴定

诱导性多能干细胞(iPS细胞)与胚胎干细胞在形态和生长特征上有许多相同之处,但iPS细胞的应用前景更为广阔。它为再生医学提供了有价值的细胞资源,使得运用病人自身细胞来治疗自己成为可能。iPS细胞诱导有许多方法 ,培养和鉴定也有其特点,本文就近年iPS的诱导培养和鉴定方面的研究进展作一综述。

PD模型小鼠中脑特异性表达突变型A53T α-Synuclein基因对外周单核细胞浸润的影响

目的小鼠中脑特异性表达突变型A53T α-Synuclein(α-Syn)后,研究其对中脑发生外周单核细胞浸润的影响。方法本研究使用转突变型A53Tα-Syn基因的帕金森病小鼠模型(以下简称Pitx3/A53T小鼠),应用免疫荧光共定位技术检测2、12月龄的Pitx3/A53T及non-Transgenic(nTg)小鼠中脑黑质致密部(SNC)、腹侧背盖区(VTA)及黑质网状部(SNR)的P2Y12、CD11b、CD169和Iba-1的表达情况。结果免疫荧光结果显示,在2月龄的Pitx3/A53T和nTg小鼠,以及12月龄的nTg小鼠中脑部位(SNC、VTA、SNR),仅检测到中枢神经系统(CNS)小胶质细胞(P2Y12+CD11b+和CD169-Iba-1+)。在12月龄的Pitx3/A53T小鼠中脑部位,除了有CNS小胶质细胞外,其SNR部位还特异性存在外周单核细胞(P2Y12-CD11b+和CD169+Iba-1+)。此外,在2月龄时,Pitx3/A53T小鼠中脑部位的P2Y12表达水平较nTg小鼠高(P<0.05,SNC、VTA、SNR);12月龄时,Pitx3/A53T小鼠中脑部位的P2Y12表达水平明显低于nTg小鼠(P<0.01,SNC、VTA;P<0.001,SNR);与2月龄的小鼠相比,12月龄小鼠中脑部位的P2Y12表达水平明显降低(P<0.001,Pitx3/A53T;P<0.05,nTg)。结论小鼠中脑特异性表达突变型A53Tα-Syn后,其在老龄时中脑发生外周单核细胞浸润。而且小鼠中脑部位P2Y12的表达水平变化与年龄和突变型A53Tα-Syn关系密切。

tau基因缺失导致成年小鼠中脑多巴胺神经元Nurr1表达上调

目的本文利用tau基因敲除小鼠模型,观察tau基因表达水平的变化对中脑部位Nurr1蛋白表达的影响。方法取同窝出生的同性别的野生型(Tau+/+)、杂合子(Tau+/-)、纯合子(Tau-/-)系列tau基因敲除小鼠。应用免疫印迹技术定量检测不同年龄3种基因型小鼠中脑部位Nurr1的表达水平;应用免疫荧光染色的方法,定位定量检测18月龄3种基因型小鼠中脑黑质致密部(SNC)和腹侧背盖区(VTA)Nurr1和TH的表达水平。结果免疫印迹的结果显示Nurr1在6月龄至24月龄Tau-/-小鼠中脑的表达量增多,与Tau+/+和Tau+/-小鼠相比差异有统计学意义(P<0.05);在免疫荧光实验中,Nurr1在Tau-/-小鼠中脑SNC和VTA部位TH阳性神经元中表达量增多,与Tau+/+和Tau+/-小鼠相比差异有统计学意义(P<0.05);3种基因型小鼠中脑部位TH表达量差异无统计学意义。结论 Nurr1在成年Tau基因敲除小鼠中脑多巴胺神经元中表达上调,而中脑TH表达水平无改变,Nurr1可能参与维持TH的表达。

斯氏针置入股骨头不同方式的生物力学分析

背景:对于不同年龄段的人群,股骨颈骨折有其不同的骨折线走向特点,有着不同的治疗策略。如何在手术治疗中提高复位质量、避免股骨头坏死及内固定失效,成为骨科学者面对的共同挑战。通过对股骨头颈部模型进行力学测试,期望获得相关数据,为提高复位稳定性及复位质量指明方向。目的:通过静态拉伸实验和疲劳实验得出斯氏针不同方式置入股骨头的力学特点。方法:选取天津正天医疗器械有限公司生产型号为ZLW02SJA的斯氏针,规格φ3.5*300 mm,样品材质为317不锈钢,按照2个步骤进行研究。步骤一:静态拉伸实验,使用1枚或者2枚斯氏针,按照前方或者侧方打入股骨头的方式组合,共计8种方案,每一方案将斯氏针打入Sawbone股骨头相应深度,以20 mm/min的速度对斯氏针进行拔出力测试,记录拔出力值。步骤二:疲劳拉伸实验,汇总前8次实验拔出力的平均值,取2个最大拔出力的75%值分别进行疲劳拉伸测试。结果与结论:①经过静态抗拔出力测试,得出抗拔出力最佳的2种方案为方案五和方案七,其中方案五的打入方式为自前而后,皮质骨厚度为4.3 mm,松质骨厚度为25.7 mm,斯氏针数量为2枚,置入深度为股骨头2/3;方案七的打入方式为侧方大转子,皮质骨厚度为3.0 mm,松质骨厚度为26.3 mm,斯氏针数量为2枚,置入深度为股骨头2/3;②然后选用这2种方案的最大拔出力的75%分别进行至少300次疲劳循环,2种方案均能完成疲劳测试,斯氏针最稳定的打入方式为方案五,其具有较大的拔出力,在斯氏针打入股骨头复位过程中可以与股骨头相对稳定的产生牵引;③结果显示:抗拔出力实验和疲劳实验均提示打入2枚斯氏针强于1枚斯氏针,而打入2枚斯氏针的情况下自前而后方向进针优于侧方大转子进针。

tDCS对中风大鼠功能恢复和Notch信号通路的影响

临床研究表明,在大鼠双眼眶上孔、眶下缘和鼻交点处采用经颅直流电刺激(transcranial direct current stimulation,tDCS)有助于中风后的康复.然而,tDCS的潜在神经生物学机制仍然知之甚少.本研究主要关注卒中后tDCS疗法对功能恢复和Notch信号通路的影响.采用大鼠中脑动脉闭塞(middle cerebral arterial occlusion,MCAO)再灌注模型,将实验动物随机分为缺血组(MCAO)和缺血后治疗组(MCAO+tDCS),采用神经系统严重程度评分(modified neurological severity score,mNSS)结合动物的行为学表现对神经功能的恢复进行评估.通过2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazole chloride,TTC)染色从组织学上比较治疗前后大鼠脑缺血组织损伤的恢复情况.应用实时定量聚合酶链反应(real time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)测定缺血性脑中Notch信号通路中受体蛋白、配体蛋白及下游因子的基因表达变化.结果表明,大鼠脑缺血可以激活Notch信号通路,采用多导联脑反射仪的tDCS疗法可以提高Notch信号通路中Notch1、NICD、RBP-JK和Hes-1的mRNA水平,促进神经功能的恢复,并显著减少脑梗死的体积.多导联脑反射仪的tDCS疗法有望发展为一种可靠的临床治疗方式.

TrkA过表达及抑制表达慢病毒载体转染对BMSCs存活的影响

目的探讨NGF及其特异性受体——原肌球蛋白相关激酶A（TrkA）能否有效调控骨髓基质干细胞（BMSCs）的成活。方法2015年5月至2015年11月，利用慢病毒载体感染SD大鼠BMSCs构建过表达TrkA的Over-TrkA BMSCs及其对照Vector BMSCs，TrkA表达抑制的shRNA-TrkA BMSCs及其对照BMSCs，以及未感染的正常BMSCs，共5组。利用MTT法、血清剥夺实验和Tunel染色检测在添加和不添加NGF的情况下各组BMSCs在体外培养1~8 d内的增殖及存活情况。利用单因素方差分析和t检验进行统计学分析。结果慢病毒感染后传代培养3代，BMSCs的形态和表型并没有发生明显变化。蛋白印迹法检测显示Over-TrkA BMSCs表达TrkA的水平显著上调；而TrkA-shRNA BMSCs在经神经诱导14 d后，TrkA的表达亦明显受到抑制。MTT法检测显示，Over-TrkA BMSCs在培养第5天后增殖速率出现下降；而TrkA-shRNA BMSCs在培养第3天后增殖速率显著增加，差异有统计学意义（P 〈 0.05）。经血清剥夺处理4 d后，Tunel染色结果显示，未添加NGF时，Vector BMSCs和Control BMSCs组细胞凋亡率分别为（28.6 ± 2.0）%和（46.6 ± 5.1）%；在添加NGF时凋亡率分别减少至（9.3 ± 2.8）%和（8.3 ± 1.5）%，差异有统计学意义（P 〈 0.01）。Over-TrkA BMSCs在未添加NGF时其凋亡率即明显降低为（0.8 ± 0.6）%，添加NGF时为（0.6 ± 0.1）%，组间差异有统计学意义（P 〈 0.01）。相反地，TrkA-shRNA BMSCs在未添加NGF时凋亡率为（10.9 ± 0.8）%，而在添加NGF时TrkA-shRNA BMSCs的凋亡率却显著增加至（44.9 ± 5.2）%，差异有统计学意义（P 〈 0.01）。结论过表达TrkA以及NGF/TrkA通路的激活能促进BMSCs在体外的成活并有效对抗由血清剥夺诱导的细胞凋亡。但TrkA表达下调使NGF促细胞成活向NGF促细胞凋亡方向转变。因而，NGF/TrkA能有效调控BMSCs的成活，该机制的阐明可能有效促进BMSCs作为种子细胞在移植治疗周围神经缺损方面的应用。