灰飞虱脂肪酶LsLPS的原核表达及Ni-NTA纯化

灰飞虱是危害中国水稻的3种主要稻飞虱之一。脂肪酶是脂肪代谢的关键酶,在昆虫发育、繁殖等生理活动中具有重要作用。为了深入研究脂肪酶(LsLPS)在灰飞虱生长发育中的功能,本研究克隆了LsLPS基因ORF序列,并进行了原核表达和His标签融合蛋白的纯化。结果显示,灰飞虱LsLPS开放阅读框长1293 bp,可翻译成430个氨基酸,含有信号肽序列和PF00151结构域。LsLPS连接到原核表达载体pET28a(+)-SUMO、pCold I后在表达菌株BL21(DE3)中主要以包涵体形式表达,连接到pET43.1a(+)后可在表达菌株BL21(DE3)中可溶性表达。采用pH 8.0、含20 mmol/L咪唑的磷酸缓冲液作为平衡液,Ni-NTA纯化LsLPS-pET43.1a(+)融合蛋白的纯度和产量相对较高。

11种药剂防治江苏省稻飞虱的有效性及定性评价

为明确11种药剂对稻飞虱的防效,在江苏稻田害虫以白背飞虱为主的分蘖期和以褐飞虱为主的穗期开展喷药试验。结果表明:当田间害虫以白背飞虱为主时,药后1 d防效均低于80%;药后7 d,吡蚜酮、三氟苯嘧啶、烯啶·噻嗪酮、吡蚜·噻嗪酮处理防效在90%以上,其余药剂处理防效也超过80%。当田间害虫以褐飞虱为主时,供试药剂防效普遍下降。总体上,呋虫胺、三氟苯嘧啶、烯啶·噻嗪酮、烯啶·呋虫胺在水稻分蘖期和穗期对稻飞虱的持效性均较好,适宜在江苏省用于稻飞虱防治。