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IKKβ-RNAi腺病毒构建及其HEK293T细胞表达
被引量:
1
1
作者
郑得亮
毛伟征
马贵亮
《青岛大学医学院学报》
CAS
2015年第1期11-15,共5页
目的构建沉默人IκB激酶β(IKKβ)基因表达的RNA干扰(RNAi)腺病毒,了解其对IKKβ基因表达的作用。方法根据GenBank IKKβ基因的mRNA,利用RNAi Designer工具软件设计合成4对IKKβ基因的特异性小干扰RNA(siRNA),合成互补的寡核苷酸链,构...
目的构建沉默人IκB激酶β(IKKβ)基因表达的RNA干扰(RNAi)腺病毒,了解其对IKKβ基因表达的作用。方法根据GenBank IKKβ基因的mRNA,利用RNAi Designer工具软件设计合成4对IKKβ基因的特异性小干扰RNA(siRNA),合成互补的寡核苷酸链,构建重组腺病毒,鉴定目的基因。构建IKKβ基因过表达质粒,以与RNAi腺病毒质粒共同转染HEK293T细胞作为实验组,不转染任何质粒的细胞作为空白对照组,共转染过表达质粒和阴性对照病毒载体质粒的HEK293T细胞为阴性对照组,蛋白免疫印迹(Western Blot)方法检测各组HEK293T细胞中IKKβ基因表达。结果成功构建IKKβ-RNAi腺病毒质粒及IKKβ过表达质粒,实验组IKKβ基因表达较空白对照组及阴性对照组下降,差异有显著性(t=49.18、44.648,P<0.05)。结论构建的IKKβ-RNAi腺病毒质粒能有效抑制IKKβ基因表达,为进一步探讨肿瘤的生物治疗提供理论基础。
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关键词
腺病毒科
基因沉默
RNA干扰
质粒
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职称材料
题名
IKKβ-RNAi腺病毒构建及其HEK293T细胞表达
被引量:
1
1
作者
郑得亮
毛伟征
马贵亮
机构
青岛市市立医院普外科二科
出处
《青岛大学医学院学报》
CAS
2015年第1期11-15,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(81071852)
文摘
目的构建沉默人IκB激酶β(IKKβ)基因表达的RNA干扰(RNAi)腺病毒,了解其对IKKβ基因表达的作用。方法根据GenBank IKKβ基因的mRNA,利用RNAi Designer工具软件设计合成4对IKKβ基因的特异性小干扰RNA(siRNA),合成互补的寡核苷酸链,构建重组腺病毒,鉴定目的基因。构建IKKβ基因过表达质粒,以与RNAi腺病毒质粒共同转染HEK293T细胞作为实验组,不转染任何质粒的细胞作为空白对照组,共转染过表达质粒和阴性对照病毒载体质粒的HEK293T细胞为阴性对照组,蛋白免疫印迹(Western Blot)方法检测各组HEK293T细胞中IKKβ基因表达。结果成功构建IKKβ-RNAi腺病毒质粒及IKKβ过表达质粒,实验组IKKβ基因表达较空白对照组及阴性对照组下降,差异有显著性(t=49.18、44.648,P<0.05)。结论构建的IKKβ-RNAi腺病毒质粒能有效抑制IKKβ基因表达,为进一步探讨肿瘤的生物治疗提供理论基础。
关键词
腺病毒科
基因沉默
RNA干扰
质粒
Keywords
adenoviridae gene silencing RNA interference plasmids
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
IKKβ-RNAi腺病毒构建及其HEK293T细胞表达
郑得亮
毛伟征
马贵亮
《青岛大学医学院学报》
CAS
2015
1
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