金钗石斛多糖含量测定条件和提取工艺的优化

利用正交试验选取金钗石斛多糖含量测定的最优条件及金钗石斛多糖的最佳提取工艺。结果表明,金钗石斛多糖含量测定的最优条件是加入苯酚1.5mL,浓硫酸6mL,反应时间30m in。金钗石斛多糖最佳提取工艺的条件是提取温度为85℃,提取次数为3次,乙醇终浓度为75%。本研究为金钗石斛多糖的提取和含量测定的条件提供了参考,为金钗石斛的进一步研究提供了基础。

miR-346及分泌型卷曲相关蛋白4在结肠癌中的表达及其对结肠癌细胞增殖的作用

目的检测结肠癌组织及细胞中miR-346及人分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)的表达,观察其对结肠癌细胞增殖的作用及可能的机制。方法选取30例经手术切除的结肠癌组织及其相应的癌旁正常组织(距离肿瘤边缘5cm),另选取结肠癌细胞株及正常结肠上皮细胞株,采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及免疫印迹(Western blot)方法检测组织及细胞中的miR-346、SFRP4mRNA及蛋白的表达,采用Pearson rank检验miR-346与SFRP4的相关性,采用Target Scan及Find Tar软件预测两者的靶向调节作用。转染miR-346拟似物(mimics)或抑制物(inhibitor)以上调或下调miR-346的表达,MTT法检测结肠癌细胞的增殖,qRT-PCR及Western blot检测SFRP4mRNA和蛋白的表达。结果 miR-346在结肠癌组织中的表达高于癌旁正常组织(t=12.871,P<0.001)。SFRP4mRNA及蛋白在结肠癌组织中的表达低于癌旁正常组织(t=8.609,P<0.001;t=20.892,P<0.001)。miR-346在结肠癌细胞株(SW480、SW620、HCT116、CaCo-2、LoVo、HT29)中的表达高于正常结肠上皮细胞株FHC(F=10.17,P<0.001)。SFRP4mRNA及蛋白在结肠癌细胞株中的表达低于正常结肠上皮细胞株(F=39.01,P<0.001;F=16.25,P<0.001)。结肠癌组织中miR-346与SFRP4mRNA的表达呈负相关(r=-0.55,95%CI:-0.757～-0.230,P=0.001 8)。与miRNA阴性对照(miR-NC)组比较,给予miR-346mimics后,MTT显示在72h、96h时间点miR-346组细胞存活率升高(t=3.484,P<0.05;t=5.868,P<0.001),SFRP4mRNA及蛋白表达下降(t=2.267,P<0.05;t=5.889,P<0.01);给予miR-346inhibitor后,MTT显示在72h、96h时间点miR-346组细胞存活率下降(t=4.400,P<0.001;t=3.591,P<0.001),SFRP4mRNA及蛋白表达升高(t=4.495,P<0.01;t=7.130,P<0.01)。结论 miR-346在结肠癌中高表达,SFRP4低表达,miR-346通过靶向作用于SFRP4来调控结肠癌细胞的增殖。

Ezrin及L1CAM在结肠癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

目的检测结肠癌组织中Ezrin及L1细胞黏附因子(L1CAM)表达,探讨其与临床病理特征的关系及两者的相关性。方法选取67例手术切除的结肠癌组织,以及对应的癌旁正常结肠组织,采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)及实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测组织中Ezrin、L1CAM蛋白及mRNA的表达,观察其与年龄、性别、肿瘤位置、肿瘤直径、浸润深度、分化程度、淋巴结转移及TNM分期等临床病理参数的关系,并检验Ezrin与L1CAM的相关性。结果结肠癌组织中Ezrin、L1CAM蛋白及mRNA表达高于正常结肠组织(P<0.001);结肠癌组织中Ezrin及L1CAM蛋白的阳性表达与肿瘤浸润深度、远处转移、淋巴结转移、血管浸润、TNM分期及肿瘤分化程度具有相关性(P均<0.05)。结肠癌组织中Ezrin与L1CAM蛋白的表达量呈正相关(r=0.864,95%CI:0.579 6～0.818 4,P<0.000 1)。结论 Ezrin及L1CAM在结肠癌组织中表达升高,与结肠癌侵袭及转移的恶性临床病理特征相关,且两者具有相关性。

miR-346及L1细胞黏附因子在结肠癌组织中的表达及与临床病理特征的关系

目的探讨miR-346及L1细胞黏附因子(L1CAM)在结肠癌组织中的表达及与临床病理特征的关系。方法选取2016年5月至2017年5月中国医科大学肿瘤医院病理标本库保存的手术切除结肠癌手术标本68例,包括结肠癌组织、癌旁组织及正常结肠组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应及免疫组织化学法检测组织中miR-346、L1CAM信使RNA(mRNA)的表达及L1CAM蛋白表达,观察miR-346及L1CAM mRNA与肿瘤部位、直径、分化程度、淋巴结转移及TNM分期等临床病理参数的关系,分析miR-346与L1CAM的相关性。结果结肠癌组织miR-346表达高于癌旁组织及正常结肠组织(1. 272±0. 501比0. 621±0. 168、0. 201±0. 078)(P <0. 01),癌旁组织与正常结肠组织比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。结肠癌组织L1CAM mRNA表达高于癌旁组织及正常结肠组织(1. 035±0. 592比0. 452±0. 122、0. 246±0. 085)(P <0. 01),癌旁组织与正常结肠组织比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。L1CAM蛋白表达于结肠癌细胞膜,在癌旁组织及正常结肠组织中无表达。结肠癌组织中miR-346与L1CAM mRNA表达量呈正相关(r=0. 864,P <0. 05)。结肠癌组织中miR-346及L1CAM蛋白在肿瘤浸润T_3～T_4、远处转移M_1、淋巴结转移阳性、血管浸润阳性、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期及肿瘤分化程度低分化中表达更高(均P <0. 05)。结论 miR-346及L1CAM mRNA在结肠癌组织中高表达,可能共同调控结肠癌侵袭及转移。

叶酸联合依达拉奉治疗急性脑梗死的疗效及对氧化应激指标水平的影响

目的:观察叶酸联合依达拉奉治疗急性脑梗死的疗效及对氧化应激指标水平的影响。方法:选取200例急性脑梗死患者作为研究对象,按患者发病就诊的时间顺序分为对照组和观察组,每组100例。对照组给予依达拉奉注射液静脉滴注治疗,观察组在对照组基础上加用叶酸片口服治疗。治疗7d为1个疗程,共连续治疗2个疗程。比较两组患者的脑卒中量表(NIHSS评分)评定临床疗效,以及同型半胱氨酸(Hcy)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平。结果:治疗后两组NIHSS评分均较治疗前降低,且观察组明显优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后两组Hcy、MDA均较治疗前水平降低,SOD水平均较均较治疗前升高,且观察组Hcy、MDA水平明显低于对照组,SOD水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组的治疗有效率为84.00%,高于对照组的72.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗中均未发生严重不良反应。结论:叶酸联合依达拉奉治疗急性脑梗死的临床疗效确切,可有效恢复患者神经功能,且能显著改善氧化应激水平。

胞二磷胆碱联合氯吡栺雷治疗大动脉粥样硬化性脑梗死的临床疗效

目的探讨胞二磷胆碱联合氯吡格雷治疗大动脉性粥样硬化性脑梗死患者的临床疗效。方法选取2017年4月至2018年9月辽宁中医药大学附属医院神经内科收治的处于急性期的142例大动脉粥样硬化性脑梗死患者作为研究对象,按照患者首次入院的病历号随机分为对照组和观察组,各71例。对照组予以氯吡格雷片口服治疗,观察组在对照组基础上加用胞二磷胆碱注射液静脉滴注治疗。比较两组患者临床疗效、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)和改良Rankin量表(MRS)评分,以及治疗前后血清不对称二甲基精氨酸(ADMA)和对氧磷酯酶-1(PON-1)水平。结果治疗前两组NIHSS评分、MRS评分、ADMA及PON-1比较差异均无统计学意义(均P>0.05);与治疗前比较,治疗后两组NIHSS评分、MRS评分、ADMA及PON-1均有所改善(均P<0.05),且观察组优于对照组(均P<0.05);两组患者治疗的总有效率分别为78.87%和91.55%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胞二磷胆碱联合氯吡格雷治疗大动脉性粥样硬化性脑梗死临床疗效确切,可通过降低ADMA及PON-1水平,有效改善患者神经功能。