布鲁氏菌病患者外周血白细胞及血小板参数的变化及临床意义

目的 研究布鲁氏菌病患者外周血白细胞及血小板参数的变化及其特点,探讨其临床应用价值。方法 纳入确诊布鲁氏菌病的患者90例,其中急性期59例,慢性期31例,另外选取同期40例健康人群为健康对照组。收集患者的临床症状等基本资料;采用全自动血液分析仪检测各组外周血白细胞计数、淋巴细胞计数、中性粒细胞计数、单核细胞计数、血小板计数、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW);采用流式细胞仪检测外周血CD3^(+)T、CD4^(+)T及CD8^(+)T细胞计数,计算患者的中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)及血小板/淋巴细胞比值(PLR),分析各细胞参数的变化特点并分析各参数对布鲁氏菌病的临床诊断价值。结果 慢性期组的关节痛和脊柱炎占比高于急性期组(P<0.05);与健康对照组相比,急性期组的白细胞计数、中性粒细胞计数、血小板计数及NLR均降低,慢性期组MPV和PDW降低,而CD3^(+)T细胞计数和单核细胞计数升高(P<0.05)。有关节炎症状的急性期布病患者白细胞计数、淋巴细胞计数、CD3^(+)T细胞计数和CD8^(+)T细胞计数低于无关节炎的急性期布病患者,而PLR则升高(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示中性粒细胞计数和NLR水平对于急性期布鲁氏菌病的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.780和0.717,而CD3^(+)T细胞计数对于诊断慢性期布鲁氏菌病的AUC为0.748。在急性期患者中,CD3^(+)T、CD8^(+)T细胞计数及PLR水平对诊断关节炎的AUC分别为0.779、0.768、0.722。结论 急性期和慢性期布鲁氏菌病患者外周血白细胞和血小板参数均有不同程度的改变,对于布鲁氏菌病的诊断以及急性期布病患者关节炎的诊断有一定的临床应用价值。

以高血压、糖尿病为首发表现的冯·希佩尔-林道综合征一例

冯·希佩尔-林道(VHL)综合征,又称脑视网膜血管瘤病,属于神经内分泌肿瘤的一种。发病率较高,且遗传性极高,可涉及视网膜及中枢神经系统、各个脏器和各种组织部位等。本文报道1例以高血压、糖尿病为主要表现的VHL综合征,旨在提高对本病的认识,减少误诊和漏诊。

局限性脓疱型银屑病误诊为糖尿病足伴感染1例

局限型脓疱型银屑病是一种较少见的银屑病类型,主要累及四肢,发病前可能有患指(趾)创伤或感染。糖尿病足伴感染是糖尿病患者踝关节以远的足部血管、神经出现病变,导致足部供血不足、感觉异常,并出现溃烂、感染症状等。因二者的临床表现类似,主要依靠分泌物培养、病变组织活检等辅助检查相鉴别,极易出现误诊。重庆医科大学附属第一医院内分泌科收治1例糖尿病合并局限性脓疱型银屑病误诊为糖尿病足伴感染患者,分析及总结其临床特点和诊疗过程,结合文献学习,从中获得启示,从而提高对该病的认识,增强全科知识储备,减少类似病例误诊、误治的发生,尽早诊断及治疗,延缓疾病进展,提高临床治愈率。

重庆市5782例体检人群代谢综合征与脂肪肝的相关性研究

目的:研究重庆市5782例体检人群代谢综合征(Metabolism syndrome,MS)与脂肪肝的患病率,以探讨二者的相互关系。方法:将研究对象按年龄、性别分组,分析5782例体检人群代谢综合征与脂肪肝的患病率,比较不同年龄段和性别间MS和脂肪肝患病率的差异。采用logistic回归分析对脂肪肝与年龄、性别、BMI、GLU、TC、TG、HDL-C、LDL的关系进行相关性分析,比较脂肪肝组和非脂肪肝组肥胖、HBP、高血糖和血脂紊乱发生率的优势比(Odds ratio,OR)。结果:5782例体检人群中MS、脂肪肝的患病率分别为9.58%、25.9%;代谢综合征的患病率随年龄增加而增加,男性代谢综合征和脂肪肝的患病率明显高于女性(P<0.001);Logistic回归分析表明对脂肪肝患病率有影响的是性别、BMI、GLU、TC、TG、HDL-C6项;与非脂肪肝组相比,脂肪肝组肥胖、HBP、高血糖和血脂紊乱患病率显著增加,脂肪肝组肥胖、HBP和血脂紊乱患病率的OR分别为9.03、3.08、4.11和5.09。结论:重庆市脑力劳动人群MS与脂肪肝的患病率较高,MS与脂肪肝有很密切的关系,及早进行健康体检并做B超筛查,改变不良生活习惯有利于对二者的早期防治。

TCF7L2基因rs7903146和rs11196218单核苷酸多态性与新诊断2型糖尿病患者早相胰岛素分泌的相关性分析

目的探讨重庆地区汉族人群中转录因子7类似物2(TCF7L2)基因rs7903146和rs11196218单核苷酸多态性(SNPs)与新诊断2型糖尿病(T2DM)早相胰岛素分泌的相关性。方法采用病例-对照研究方法,设新诊T2DM组(n=227)和正常对照组(n=152),采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术对rs7903146和rs11196218位点进行SNPs分型。结果新诊T2DM组和正常对照组rs7903146位点风险等位基因频率(MAF)分别为5.73%和4.28%,二者间差异无统计学意义。Logistic回归无论以共显性、显性、或是隐性模式分析,rs7903146和rs11196218位点的SNPs均与T2DM无显著相关性(P>0.05)。Rs7903146位点的SNPs与ΔI30/ΔG30相关(OR=1.012,95%CI 1.000～1.025,P=0.05),T风险等位基因携带者的ΔI30/ΔG30显著高于未携带者(P=0.0385)。结论尚未发现重庆地区汉族人群TCF7L2基因rs7903146和rs11196218位点SNPs与T2DM的相关性,但rs7903146位点的基因多态性可能与早相胰岛素分泌有关。

多囊卵巢综合征合并妊娠相关性暴发性1型糖尿病1例诊断及治疗分析

暴发性1型糖尿病（fulminant type 1 diabetes mellitus．FT1DM）是1型糖尿病（type 1 diabetes mellitus，T1DM）的特殊类型，目前病因未明，可能与遗传、病毒感染、妊娠等有关。该病起病急，迅速进展为糖尿病酮症酸中毒（diabetic ketoacidosis，DKA），多数患者合并血淀粉酶、脂肪酶增高，常常容易被误诊为急性胰腺炎。

胰岛素原和胰淀素原水平与胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能的相关性研究

目的分析糖代谢异常个体血清胰岛素原(proinsulin,PI)、胰岛素(insulin,INS)和胰淀素原(proamylin,PA)、胰淀素(amylin,AMY)的变化,探讨胰岛素原和胰淀素原水平与胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能的关系。方法研究对象分为正常组、糖调节异常组(IGR组)、2型糖尿病(T2DM)1组(FBG<10 mmol/L)和T2DM2组(FBG>15 mmol/L)。分别测定人体测量学指标、血生化指标,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(HOMA-B)。结果不同血糖水平的个体PI和AMY差异无统计学意义(P>0.05),但4组间PA、PI/INS和PA/AMY有显著性差异(P<0.05);PI和PI/INS对HOMA-IR有显著性影响(P<0.01),PA和PA/AMY对HOMA-B有显著性影响(P<0.01)。结论胰岛素原在胰岛素抵抗产生中可能起着重要的作用,而胰淀素原在胰岛β细胞功能障碍中可能起着重要的作用。

TCF7L2基因RNA干扰对胰岛素原水平的影响及机制

目的:研究转录因子7类似物2(transcription factor 7 like 2,TCF7L2)表达下调对胰岛素原水平的影响,进一步探讨TCF7L2通过前蛋白转化酶(proprotein convertase,PC)基因影响胰岛素原水平的机制。方法:在体外培养Beta-TC-6细胞株,通过构建TCF7L2的RNA干扰慢病毒转染细胞,下调TCF7L2的表达,实验分为3组,分别为空白对照组、乱序对照组和TCF7L2干扰组,采用qRT-PCR和Western blot检测TCF7L2和PC基因mRNA及蛋白水平的变化;收集上清液,采用ELISA方法测定基础和葡萄糖刺激状态下胰岛素和胰岛素原水平的变化。结果:慢病毒感染Beta-TC-6细胞48 h后,在荧光显微镜下观察慢病毒感染效率达95%以上,与空白对照组比较,TCF7L2 mRNA的干扰率约为75%(0.25±0.03 vs.0.97±0.11,P=0.000),蛋白质水平的干扰率约为50%(0.29±0.08 vs.0.57±0.09,P=0.008)。与乱序对照组比较,TCF7L2干扰组葡萄糖刺激后胰岛素水平明显降低(7.47±0.21)mU/L vs.(10.53±0.38)mU/L(P=0.000),而胰岛素原水平却明显增加(10.73±0.51)pmol/L vs.(7.81±0.29)pmol/L(P=0.001),且PC1和PC2的mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。结论:TCF7L2基因的RNA干扰可能通过降低PC基因的表达,进而减少该酶对胰岛素原的加工,从而影响胰岛素原的水平。

PCSK1和PCSK2单核苷酸多态性与新诊断2型糖尿病的相关性分析

目的探讨重庆地区汉族人前蛋白转化酶枯草溶菌素1（PCSK1）的rs3811951和PCSK2的rs2021785位点单核苷酸多态性（SNPs）与新诊断2型糖尿病（T2DM）之间的相关性。方法采用病例-对照法,收集新诊T2DM组（n=227例）与对照组（n=152例）的临床资料及血标本,测定血糖、血脂等生化指标,采用质谱技术对rs3811951和rs2021785位点进行SNPs分型。结果 PCSK2的rs2021785位点次要等位基因频率在T2DM组显著低于对照组（20.04%vs 26.64%,P=0.0335）,次要等位基因A的携带者患T2DM的风险显著降低（OR=0.69,95%CI 0.49~0.97,P=0.0335）。PCSK2基因的rs2021785位点AA基因型频率在T2DM组显著低于对照组（6.6%vs 10.5%,P〈0.05）,rs2021785位点基因型分布与T2DM显著相关（共显性模型中OR=0.627,95%CI 0.41~0.96,P=0.0308）。PCSK1基因rs3811951位点等位基因频率及基因型分布在T2DM组和对照组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论重庆地区汉族人群中PCSK2基因rs2021785位点的多态性与T2DM显著相关,而PCSK1基因rs3811951位点多态性与T2DM无显著相关性。

CBL教学法在内分泌教学中的应用

目的探讨CBL教学法在内分泌教学中的应用。方法选取某医科大学内分泌专业90人两个班,每个班各45人。其中一个班对照组,剩余为实验组。对照组采用传统的教学方式,实验组采用CBL教学方法。教学任务完成后进行考试,并填写对教学方法的满意度的调查表。结果实验组的成绩高于对照组,实验组满意度(93.33%)高于对照组(68.89%)。结论 CBL教学模式可提高内分泌理论教学的质量,提高学生对教学方法的满意度。

探讨在糖尿病诊治教学中PBL结合模拟患者模式的应用

目的探讨在糖尿病诊治教学中PBL结合模拟患者模式的应用效果。方法随机选取某校2014级两个班学生为研究对象,分别作为对照组(42人)和实验组(45人),两组学生参与研究前性别、年龄、成绩差异均无统计学意义(P>0.05)。对照组学生采用传统教学方法授课,即由授课教师讲授、板书的模式进行授课;实验组学生则进行PBL结合模拟患者模式进行授课。两组学生均由同一教师授课。学期末同时对两组学生进行有关糖尿病理论知识检测、同时由授课教师对每一位学生的整体表现进行打分,均采用满分制100分,并且向两组学生发放自制调查问卷,继而对学生理论知识、教师打分和调查问卷结果进行统计分析。结果理论知识得分和教师打分实验组均高于对照组(P<0.05);调查问卷七项调查项目结果显示实验组均优于对照组(P<0.05)。结论 PBL结合模拟患者教学模式较传统教学模式优势更为明显,可以提高学生糖尿病理论知识掌握能力、有助于提高教学质量、对提高学生综合能力有显著帮助。

高糖通过下调FoxO1磷酸化诱导β细胞去分化

胰岛β细胞发生去分化现象是导致其功能减退的机制之一。已有研究证明,Fox O1与β细胞去分化密切相关。然而,高糖是否可通过Fox O1诱导β细胞发生去分化目前尚未见报告。本研究通过不同浓度高糖干预MIN6细胞,采用葡萄糖刺激胰岛素分泌试验(GSIS)检测β细胞功能;实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹、免疫荧光方法检测高糖干预后β细胞内祖细胞标志基因、β细胞标志基因及Fox O1的表达变化。结果显示,不同浓度高糖干预β细胞后,当浓度达到35 mmol/L时,β细胞祖细胞标志基因表达明显增加。且在该浓度时,检测到β细胞标志基因表达明显降低,MIN6细胞葡萄糖刺激胰岛素分泌功能减退,磷酸化Fox O1表达减少。上述结果提示,高糖可诱导胰岛β细胞去分化的发生,其机制可能是通过Fox O1介导。

内脏脂肪指数对成人生长激素缺乏症患者代谢综合征的评估作用研究

目的探讨内脏脂肪指数(VAI)对成人生长激素缺乏症(AGHD)患者代谢综合征(MS)的评估作用。方法选取2015年1月—2016年1月在重庆医科大学附属第一医院确诊2年及以上的AGHD患者66例为AGHD组;选取同期在本院体检中心进行体检的健康人群66例为对照组。并根据VAI三分位数将AGHD患者分为3组:低VAI组(n=22)、中VAI组(n=22)、高VAI组(n=22)。测量所有受试者身高、体质量、腰围(WC)、臀围(HC)、血压〔收缩压(SBP)、舒张压(DBP)〕等;测定空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、血脂〔包括总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)〕水平;计算BMI、腰臀比(WHR)、稳态模型评价的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及VAI。通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算ROC曲线下面积(AUC),分析VAI的评估作用。结果 AGHD组中男21例,女45例;对照组中,男21例,女45例。两组受试者年龄、身高、SBP、DBP、FPG、TC、LDL-C间差异无统计学意义(P>0.05),而体质量、BMI、WC、HC、WHR、FINS、TG、LDL-C、HDL-C、VAI、HOMA-IR间差异有统计学意义(P<0.05)。不同VAI患者性别、年龄、身高、WHR、FINS、TC、LDL-C间差异无统计学意义(P>0.05);而体质量、BMI、WC、HC、SBP、DBP、FPG、TG、HDL-C、HOMA-IR及MS发生率间差异有统计学意义(P<0.05)。年龄调整前后,VAI与WC、DBP、FPG、TG均呈正相关(P<0.05),与HDL-C呈负相关(P<0.05),与SBP无相关性(P>0.05)。VAI评估AGHD患者MS的AUC为0.871〔95%CI(0.788,0.954),P<0.001〕,最佳临界值为1.9,灵敏度为0.960,特异度为0.610。结论 VAI可作为AGHD患者MS的筛查与评估手段。

糖尿病患者和糖耐量异常个体血清视黄醇结合蛋白4水平及影响因素的研究

目的:探讨初发2型糖尿病(Type2diabetes,T2DM)和葡萄糖耐量异常(Impaired glucose regulationI,GR)人群血清视黄醇结合蛋白4(Retinol bindingprotein 4,RBP4)水平及其影响因素。方法:采用酶联免疫吸附(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法测定27例初发2型糖尿病(T2DM组)、27例糖耐量异常(IGR组)个体的空腹血清RBP4浓度,并用26例糖耐量正常个体(Normal glucose tolerance,NGT)做对照,同时测定血糖、血脂、血压、身高、体重、腰腹围和胰岛素水平,分析各指标与血清RBP4的相关性。结果:初发T2DM和IGR人群血清RBP4水平明显高于正常人群,但是两组人群之间RBP4水平没有差异。多元相关与回归分析显示空腹胰岛素(Fasting insulin,FINS)、胰岛素抵抗(Insulin resistanceI,R)和收缩压(Systolic blood pressure,SBP)与RBP4呈正相关,但没有指标是影响血清RBP4水平的主要因素。结论:初发T2DM和IGR人群外周血RBP4蛋白高表达,并与T2DM及其相关临床指标相关,这提示了RBP4可能在T2DM发生发展中起作用。

AGHD患者血清妊娠相关蛋白A水平变化及影响因素

目的:比较成人生长激素缺乏症(Adult growth hormone deficiency,AGHD)患者与健康成人血清妊娠相关蛋白A(Preg-nancy-associated plasma protein A,PAPP-A)水平及其与糖脂代谢、血压、游离脂肪酸、C反应蛋白等的关系。方法:采用酶联免疫吸附法检测20例AGHD患者和20例健康成人的血清妊娠相关蛋白A水平,同时检测空腹血糖、血脂谱、空腹胰岛素、游离脂肪酸、C反应蛋白等,计算体重指数,并以稳态模型评估胰岛素抵抗指数(Homeostasis model assessment index for insulin resis-tance,HOMA-IR)和胰岛素分泌指数(Homeostasis model assessment ofβ-cell function,HOMA-β)。结果:AGHD患者血清妊娠相关蛋白A高于对照组[7.57(6.59～8.96)与6.20(5.78～6.96)比较,P<0.05]。AGHD患者血清PAPP-A与年龄、体重指数、腰围、腰臀比、收缩压、餐后2 h血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR正相关r(值依次为0.451、0.878、0.813、0.605、0.489、0.549、0.503、0.487;均P<0.05);在调整腰围、腰臀比、餐后2 h血糖、甘油三酯后,AGHD患者血清妊娠相关蛋白A与体重指数、空腹胰岛素正相关r(值依次为0.728、0.433;均P<0.05)。多元回归分析提示,体重指数、餐后2 h血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR是AGHD患者血清PAPP-A的独立相关因素。结论:AGHD患者血清PAPP-A升高,并与体重指数、餐后2 h血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR相关。提示在AGHD患者中,血清PAPP-A可能与动脉粥样硬化及糖代谢有联系。

成人生长激素缺乏症患者内脏脂肪指数与心血管疾病风险因素的相关性研究

目的探讨成人生长激素缺乏症(AGHD)患者内脏脂肪指数(VAI)水平变化及其与人体测量学指标、糖脂代谢指标和炎症介质高敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素6(IL-6)的相关性。方法收集40例AGHD患者及40例健康人群,测量两组人群人体测量学参数及糖脂生化指标,包括体重指数(BMI)、腰臀比(WHR)、VAI、腰围身高比值(WHt R)、亮氨酸氨基肽酶(LAP)、稳态模型评价的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、稳态模型评价的胰岛素分泌指数(HOMA-β)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)/高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)比值、总胆固醇(TC)/HDL-C比值、甘油三酯(TG)/LDL-C。结果与对照组相比,AGHD组BMI、腰围(WC)、WHR、空腹胰岛素(FINS)、HOMA-β、HOMAIR、TC、TG、LDL-C/HDL-C、TC/HDL-C、hs-CPR、IL-6、VAI均明显增高,HDL-C明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);VAI值与WC、WHR、舒张压(SBP)、FINS、HOMA-β、HOMA-IR、TG、LDL-C/HDL-C、TC/HDL-C、TG/LDL-C、hs-CPR、IL-6呈正相关(P<0.05)。多元线性回归分析显示,hs-CRP和IL-6是VAI的独立危险因素。Pearson相关指数分析显示,VAI与脂代谢和炎症因子相关性比WC、BMI、WHR、WHt R更好。结论 AGHD患者VAI值显著高于健康人群,并与罹患心血管疾病的多种危险因素显著相关。

TRAF-6调控TGF-β1-Smad2/Smad3信号通路在Graves病免疫发病机制中的作用

目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)是否在Graves病(GD)的发生过程中发挥免疫耐受作用及其可能的机制。方法:纳入Graves病初诊患者(GD) 30例,GD缓解期患者(e GD) 30例及健康人群(NC) 28例。提取外周血单个核细胞(PBMCs),分别采用实时定量PCR检测维甲酸相关孤儿受体(RORγt)、叉头蛋白P3(Foxp3)、白介素-2(IL-2)、TRAF-6 mRNA的表达,Western blot检测p-Smad2/Smad3、总Smad2/Smad3、TRAF-6蛋白的表达,ELISA检测血浆中转化生长因子-β1(TGF-β1)、IL-2、IL-17A、IL-10蛋白的表达。结果:①与NC组相比,GD组中IL-2的mRNA和蛋白、Foxp3 mRNA和IL-10蛋白的表达水平均减少,而RORγt mRNA和IL-17A蛋白的表达水平均增加,以上结果差异均有统计学意义(P<0. 05)。②与NC组相比,GD组中TGF-β1蛋白的表达水平降低,差异有统计学意义(P<0. 05); GD组中p-Smad2/Smad3的蛋白表达较NC组有上升趋势(P>0. 05)。③GD组中的TRAF-6 mRNA与NC组比较表达降低,差异有统计学意义(P<0. 05); TRAF-6蛋白表达较NC组有下降趋势(P>0. 05)。④e GD组中TRAF-6 mRNA的表达水平较GD组增加,差异有统计学意义(P<0. 05),较NC组差异无统计学意义(P>0. 05);其余指标在e GD组与GD组、e GD组和NC组之间的差异均没有统计学意义(P>0. 05)。结论:GD患者中TRAF-6低表达不足以抑制TGF-β1介导的Smad2/Smad3磷酸化,导致增多的Smad2/Smad3磷酸化蛋白下调IL-2表达,进而诱导Th17细胞的分化,同时抑制Treg细胞的分化,使机体不能维持免疫耐受,促进GD的发生。

成人生长激素缺乏症患者血浆致动脉粥样硬化指数与代谢组分变化的相关性分析

目的探讨成人生长激素缺乏症(AGHD)患者血浆致动脉粥样硬化指数(AIP)水平变化及其与人体测量学指标、糖脂代谢指标和炎症介质高敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素6(IL-6)的相关性。方法回顾性分析重庆医科大学附属第一医院2009年6月-2012年9月确诊的40例AGHD患者(AGHD组)及同期在体检中心进行体检的40例健康人(对照组)的临床资料,比较两组的一般情况和血生化指标,计算AIP值、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素分泌指数(HOMA-β)、LDL-C/HDL-C比值、TC/HDL-C比值、TG/LDL-C比值并进行组间比较,采用pearson法分析AIP与各指标的相关性。结果与对照组相比,AGHD组BMI、腰围、腰臀比、FINS、HOMA-β、HOMA-IR、TC、TG、LDL/HDL-C、TC/HDL-C、hs-CPR、IL-6、AIP均明显增高,HDL-C明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);两组年龄、身高、体脂率、臀围、血压、FPG、LDL-C、TG/LDL-C水平差异无统计学意义(P>0.05)。AIP值与腰围、腰臀比、FINS、HOMA-β、HOMA-IR、TC、LDL-C/HDL-C、TC/HDL-C、TG/LDL-C、hs-CPR、IL-6呈正相关(P<0.05),与年龄、性别、身高、BMI、体脂率、臀围、DBP、FPG、LDL-C无明显相关性(P>0.05)。多元线性回归分析显示,hs-CRP和IL-6是AIP的独立危险因素。结论 AGHD患者AIP水平显著高于健康人群,并与罹患心血管疾病的多种危险因素显著相关。

沉默TCF7L2对胰岛素抵抗HepG2细胞胰岛素降解酶表达的调控作用观察

目的探讨沉默转录因子7类似物2(TCF7L2)对胰岛素抵抗(IR)Hep G2细胞胰岛素降解酶(IDE)表达的调控作用及可能机制。方法将Hep G2细胞分为空白组、TCF7L2干扰组、空载体组、IR组、IR+TCF7L2干扰组、IR+空载体组。采用高浓度胰岛素(5×10-6mol/L)持续作用24h诱导IR模型(IR-Hep G2细胞)生成。以人TCF7L2 m RNA编码序列为干扰靶点构建TCF7L2特异性小干扰RNA慢病毒载体(LV-TCF7L2-si RNA)转染空白组及IR组细胞,空载体病毒转染空载体组及IR+空载体组细胞。q RT-PCR法检测各组细胞TCF7L2及IDE m RNA的表达,Western blotting检测各组细胞TCF7L2、IDE、胰岛素刺激后蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达的变化,流式细胞术检测各组2-脱氧-D-葡萄糖(2-NBDG)荧光葡萄糖摄取率。结果与空白组比较,IR组细胞葡萄糖消耗量及2-NBDG摄取率均明显降低(P<0.01),证明IR细胞模型建立成功。q RT-PCR及Western blotting结果显示,IR组TCF7L2及IDE m RNA种蛋白表达水平均明显低于空白组(P<0.05),TCF7L2干扰组TCF7L2、IDE m RNA和蛋白表达水平较空白组、空载体组明显下降,IR+TCF7L2干扰组TCF7L2、IDE m RNA和蛋白表达水平较IR组、IR+空载体组均明显下降(P<0.05)。生理剂量胰岛素刺激后,IR组、IR+TCF7L2干扰组p-AKT蛋白水平较空白组明显下降(P<0.01),各组总AKT水平差异无统计学意义。TCF7L2干扰组2-NBDG荧光葡萄糖摄取率较空白组和空载体组明显下降,IR+TCF7L2干扰组2-NBDG荧光葡萄糖摄取率较IR组、IR+空载体组明显下降(P<0.01)。结论 TCF7L2联合IDE致肝细胞IR,其机制可能与减少胰岛素信号通路关键酶p-AKT蛋白的表达有关。