补体C5a/C5aR通路在小鼠缺血/再灌注肾损伤中的作用及机制

目的:探讨补体C5a/C5aR通路在小鼠缺血/再灌注肾损伤(I/R-AKI)中的作用及机制。方法:40只野生型小鼠随机分为假手术组、缺血20 min组、缺血30 min组、缺血40 min组;野生型和C5aR基因敲除小鼠各20只分为假手术组和缺血40 min组,再灌注24 h后取血清及肾组织。全自动生化分析仪检测BUN和Cre水平;RT-PCR检测肾组织C5aR、KIM-1、CXCL2、MIP-1α和CXCR2表达;ELISA检测血清C5a水平;HE明确肾损伤程度;IHC检测C5aR、KIM-1、Ccap3和Cyt C表达;IF检测中性粒细胞浸润;HK-2细胞体外模拟缺氧复氧环境,IF及Western blot检测C5aR的表达。结果:小鼠I/R-AKI模型中,随着缺血时间延长,BUN、Cre及血清C5a逐渐升高,肾脏病理损伤加重,肾组织C5aR表达逐渐增强,且C5a及C5aR表达与肾损伤程度正相关;体外缺氧复氧模型中,随着缺氧时间延长C5aR表达逐渐升高;与野生型小鼠相比,C5aR基因敲除小鼠BUN和Cre均明显减少,肾小管损伤减轻,KIM-1、Ccap3和Cyt C的表达下降;此外,C5aR基因敲除后CXCL2、MIP-1α和CXCR2表达降低,中性粒细胞浸润减少。结论:补体C5a/C5aR通路介导I/R-AKI病理过程,可能与其促进中性粒细胞浸润有关。