双酚A与邻苯二甲酸二乙基己酯联合染毒对大鼠肝脏葡萄糖醛酸转移酶部分亚型基因表达的影响

目的探讨双酚A和邻苯二甲酸二乙基己酯联合染毒对大鼠肝脏组织中葡萄糖醛酸转移酶部分亚型基因表达的影响。方法将96只健康3周龄SPF级SD雄性大鼠按体重随机分为4组,分别为对照(玉米油)组、BPA(100 mg/kg)染毒组、DEHP(750 mg/kg)染毒组、BPA(100 mg/kg)+DEHP(750 mg/kg)染毒组,每组24只。通过灌胃方式进行染毒,染毒容量为5 ml/kg,连续染毒6周,每天1次。分别于染毒第1、3、6周,采用Real-time PCR法检测肝组织中UGT1A6、UGT1A8和UGT2B17 mRNA的表达水平。结果第1、3、6周大鼠肝组织中UGT1A6 mRNA表达水平依次为BPA染毒组>对照组>DEHP染毒组>BPA+DEHP染毒组,除第1周BPA染毒组与对照组及第3周BPA+DEHP染毒组与DEHP染毒组外,差异均有统计学意义(P<0.05)。第1周大鼠肝组织中UGT1A8 mRNA表达水平依次为DEHP染毒组>BPA组>BPA+DEHP染毒组>对照组;第3周依次为BPA染毒组>对照组>DEHP染毒组>BPA+DEHP染毒组;第6周为BPA染毒组、DEHP染毒组、BPA+DEHP染毒组<对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。第1周大鼠肝组织中UGT2B17 mRNA表达水平为BPA染毒组、DEHP染毒组、对照组>BPA+DEHP染毒组;第3、6周为DEHP染毒组、BPA+DEHP染毒组<BPA染毒组、对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论BPA单独暴露可促进UGT1A6基因表达而对UGT2B17的基因表达无显著影响;而DEHP单独及BPA与DEHP联合染毒时,对UGT1A6和2B17的基因表达均呈现抑制作用;无论BPA及DEHP单独或联合染毒,对UGT1A8的基因表达均体现为短期暴露促进而长期暴露抑制的作用。此外,尽管BPA对UGT1A6亚型的基因表达体现为促进作用,但当BPA与DEHP联合暴露情况下,联合染毒组体现为抑制作用,并且抑制作用要比DEHP单独染毒情况下更明显。

邻苯二甲酸二乙基己酯与双酚A联合染毒对大鼠肝脏损伤及其氧化应激机制

目的观察邻苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)与双酚A(BPA)联合染毒对大鼠肝脏损伤,探讨其氧化应激机制。方法无特定病原体级健康雄性SD大鼠随机分为对照组、DEHP组、BPA组和联合染毒组,每组8只。采用经口灌胃法,DEHP组大鼠予750 mg/kg体质量DEHP,BPA组大鼠予100 mg/kg体质量BPA,联合染毒组大鼠予750mg/kg体质量DEHP和100 mg/kg体质量BPA,连续染毒6周,每周7 d,1次/d。观察大鼠肝脏脏器系数和组织病理学改变,采用分光光度法检测大鼠肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和过氧化氢(H2O2)、丙二醛(MDA)水平,采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测大鼠肝脏组织抗氧化基因核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基(Gclc)、硫氧还蛋白还原酶(Txnrd)、Sod3和Gpx1的相对表达水平。结果 DEHP组大鼠从第2周、联合染毒组大鼠从第3周开始体质量低于对照组(P<0.05)。DEHP组和联合染毒组大鼠肝脏质量及脏器系数均高于对照组(P<0.05)。肝脏组织病理学检查结果显示:DEHP组大鼠出现肝细胞坏死,BPA组大鼠肝细胞胞浆呈空泡样变,联合染毒组大鼠出现严重的炎细胞浸润。与对照组比较,3个染毒剂量组大鼠肝脏组织SOD和GSH-Px活力均下降(P<0.05),H2O2水平均升高(P<0.05);BPA组和联合染毒组大鼠肝脏组织MDA水平均升高(P<0.05)。与对照组比较,3个染毒组大鼠肝脏Nrf2、HO-1和Gpx1 mRNA相对表达水平均下降(P<0.05),DEHP组和联合染毒组大鼠肝脏Gclc、Txnrd和Sod3mRNA相对表达水平均下降(P<0.05);联合染毒组大鼠肝脏Nrf2、HO-1、Gclc、Txnrd和Sod3 mRNA相对表达水平均低于BPA组(P<0.05)。结论本研究条件下,DEHP、BPA单独及联合染毒均可导致大鼠肝脏损伤,联合作用大于单独作用,DEHP的影响大于BPA;DEHP和BPA所致大鼠肝脏损伤与Nrf2信号通路有关。

双酚A与邻苯二甲酸二乙基己酯联合染毒对大鼠肝脏葡萄糖醛酸转移酶与细胞色素P450家族4A基因及蛋白表达的影响

目的探讨双酚A(bisphenol A,BPA)与邻苯二甲酸二乙基己酯[di(2-ethylhexyl)phthalalte,DEHP]联合染毒对大鼠肝脏中葡萄糖醛酸转移酶(UDP-glucuronosyltransferases,UGT)与细胞色素P450家族4A(cytochrome P4504A,CYP4A)基因及蛋白表达的影响。方法将96只健康3周龄SPF级SD雄性大鼠按体重随机分为4组,分别为对照(玉米油)组、BPA(100 mg/kg)染毒组、DEHP(750 mg/kg)染毒组、BPA(100 mg/kg)+DEHP(750 mg/kg)染毒组,每组24只。通过灌胃方式进行染毒,连续染毒6周,每天1次。分别于染毒第1、3、6周,采用Real-time PCR法和Western blot法分别检测肝组织中UGT1A1、UGT2B1及CYP4A的基因和蛋白的表达水平。结果第1周大鼠肝组织中UGT1A1 m RNA表达水平依次为DEHP染毒组>BPA+DEHP染毒组>BPA染毒组、对照组;第3和6周依次为DEHP染毒组、BPA+DEHP染毒组、BPA染毒组>对照组;第6周BPA+DEHP染毒组>BPA染毒组,差异均有统计学意义(P<0.05)。第1、3、6周大鼠肝组织中UGT1A1蛋白表达水平依次为DEHP染毒组、BPA+DEHP染毒组>BPA染毒组、对照组,第6周BPA+DEHP染毒组>DEHP染毒组,差异均有统计学意义(P<0.05)。第1周大鼠肝组织中UGT2B1 mRNA表达水平依次为BPA+DEHP染毒组<BPA染毒组、对照组、DEHP染毒组;第3和6周依次为BPA+DEHP染毒组、DEHP染毒组<BPA染毒组、对照组,其中,第6周BPA+DEHP染毒组<DEHP染毒组,差异均有统计学意义(P<0.05)。第1、3、6周UGT2B1蛋白表达水平依次为BPA染毒组>对照组>DEHP染毒组、BPA+DEHP染毒组,其中,第6周DEHP染毒组>BPA+DEHP染毒组,差异均有统计学意义(P<0.05)。第1和3周大鼠肝组织中CYP4A mRNA表达水平依次为DEHP染毒组>BPA+DEHP染毒组>BPA染毒组、对照组,第6周依次为BPA+DEHP染毒组、DEHP染毒组、BPA染毒组>对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。第1、3、6周大鼠肝组织中CYP4A蛋白表达水平依次为DEHP染毒组、BPA+DEHP染毒组>BPA染毒组、对照组,其中,第1周DEHP染毒组>BPA+DEHP染毒组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论BPA单独染毒可促进UGT2B1的蛋白表达,长期染毒可促进UGT1A1和CYP4A的基因表达,且对UGT1A1的促进作用先于CYP4A;DEHP单独染毒及其与BPA联合染毒均可促进UGT1A1和CYP4A的基因和蛋白表达,但抑制UGT2B1的基因蛋白表达。