线粒体融合蛋白2在姜黄素减轻脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡中的作用

目的研究线粒体融合蛋白2(Mfn2)在姜黄素减轻脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡中的作用。方法将清洁级雄性Balb/c小鼠165只随机分为假手术组、脓毒症组、姜黄素干预组、姜黄素对照组、阴性病毒脓毒症组、阴性病毒姜黄素干预组、Mfn2干扰脓毒症组、Mfn2干扰姜黄素干预组,每组15只;剩余小鼠随机分为正常组、阴性病毒组、Mfn2干扰组,用于检测病毒转染效率,每组15只。脓毒症组及姜黄素干预组通过盲肠结扎穿孔术建立脓毒症小鼠模型,姜黄素干预组及姜黄素对照组予姜黄素200mg/(kg·d)灌胃1周,干扰组通过尾静脉注射携带相应干扰序列腺相关病毒建立模型,各组均于24h后处死小鼠,无菌留取脾脏,提取淋巴细胞。流式细胞术检测淋巴细胞凋亡情况以及线粒体膜电位,Western blot检测淋巴细胞Mfn2、Caspase-3、Bcl-2、Bax表达水平。结果与假手术相比,脓毒症组小鼠淋巴细胞Mfn2表达、Bcl-2/Bax明显降低(均P<0.05),脓毒症组小鼠淋巴细胞凋亡率、Caspase-3表达、线粒体膜电位降低率明显升高(均P<0.05)。姜黄素预处理后,与脓毒症组相比,Mfn2、Bcl-2/Bax表达均明显升高(均P<0.05),淋巴细胞凋亡率、Caspase-3表达、线粒体膜电位降低率均明显降低(均P<0.05)。下调Mfn2后,与脓毒症组相比,姜黄素干预组凋亡率及Caspase-3、Bcl-2/Bax表达水平均无统计学差异(均P>0.05)。结论姜黄素抑制脓毒症小鼠的淋巴细胞凋亡,其作用依赖于Mfn2的表达。

拓展训练提升贫困大学生心理健康水平的可行性研究

拓展训练作为与时俱进的现代化的培训模式,最早应用于团队辅导和个人潜能的激发,进而到身心问题的干预,比如大学生心理。本文旨在探讨拓展训练在我国的发展及现状,同时阐述贫困大学生的心理问题,从而分析拓展训练用于提升贫困大学生心理健康水平的可行性。

黄苓昔对脂多糖诱导的H9C2心肌细胞炎症的保护作用及机制研究

目的探讨黄芩苷对脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导的H9C2心肌细胞炎症反应的保护作用及可能机制。方法培养H9C2心肌细胞,用终浓度为10、20、30 μmol/L黄芩苷预处理12 h后,加入终浓度为1 μg/mL的LPS刺激6 h,对照组加入等量的生理盐水,收集细胞样本。CCK-8(The Cell Counting Kit-8)检测细胞活力,酶联免疫吸附法(ELISA)检测白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)、p38 MAPK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)、IκBα、磷酸化IκBα(p-IκBα)的蛋白表达水平的变化。采用SPSS 23.0统计软件,两组样本比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析检验。结果对照组心肌细胞存活率为(93.67±1.453)%,而LPS刺激组存活率为(60.33±2.603)%。与对照组相比,LPS诱导后H9C2心肌细胞存活率降低(P<0.05)。对照组H9C2心肌细胞IL-6表达量为(49.33±2.42)pg/mL,TNF-a表达量为(86.33±1.85)pg/mL,IL-1β表达量为(28.67±4.66)pg/ml。与对照组相比,LPS诱导后H9C2心肌细胞IL-6、IL-1β及TNF-α表达水平升高(P<0.05),p-NF-κB p65、p-p38 MAPK、p-IκBα蛋白水平升高(P<0.05),IκBα蛋白水平降低(P<0.05),而NF-κB p65及p38 MAPK蛋白表达无明显变化(P>0.05)。与LPS组相比,黄芩苷干预组H9C2心肌细胞存活率升高(P<0.05),IL-6、IL-1β及TNF-α表达水平降低(P<0.05),p-NF-κB p65、p-p38 MAPK、p-IκBα蛋白水平降低(P<0.05),IκBα蛋白水平升高(P<0.05),而NF-κB p65及p38 MAPK蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论黄芩苷可能通过抑制NF-κB、p38 MAPK的激活来减轻LPS诱导的心肌细胞炎症反应,提高细胞的存活率。

姜黄素上调线粒体融合蛋白2减轻脓毒症小鼠急性肺损伤

目的探讨姜黄素对脓毒症小鼠急性肺损伤的保护作用及机制。方法取120只清洁级BALB/c雄性小鼠随机(随机数字法)分成8组,即假手术组、脓毒症组、姜黄素对照组、姜黄素干预组、阴性病毒-脓毒症组、阴性病毒-姜黄素干预组、线粒体融合蛋白(Mfn2)干扰-脓毒症组、Mfn2干扰-姜黄素干预组,每组15只。脓毒症组及姜黄素干预组通过盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)造模,姜黄素干预组及姜黄素对照组予姜黄素200 mg/(kg·d)灌胃1周,阴性病毒-脓毒症组及阴性病毒-姜黄素干预组通过尾静脉注射阴性腺相关病毒来建立,Mfn2干扰-脓毒症组及Mfn2干扰-姜黄素干预组通过尾静脉注射携带Mfn2干扰序列的腺相关病毒建立模型,各组均于24 h后处死小鼠。通过肺湿干比和病理学检查反映肺损伤程度,ELISA法检测肺泡灌洗液的炎症因子TNF-α和IL-6,Western blot检测细胞凋亡的关键分子caspase-3的活化,并通过TUNEL检测细胞凋亡。采用SPSS 22.0软件进行统计分析,计数资料比较采用χ^2检验,计量资料组间比较采用单因素方差分析。结果与假手术组比较,脓毒症组小鼠肺组织湿干重比显著增加(71.11±3.78 vs 31.11±5.61,P=0.002);与假手术组相比,脓毒症组织病理评分明显增加(P=0.006),炎症因子TNF-α(P=0.001)和IL-6(P=0.012)显著增高,肺组织细胞凋亡及凋亡相关蛋白caspase-3 cleaved表达同样明显增加(P=0.001)。与脓毒症组比较,姜黄素干预组小鼠肺组织湿干重比明显降低(32.84±6.15 vs 71.11±3.78,P=0.004),组织病理评分显著降低(P=0.004),炎症因子TNF-α(P=0.013)和IL-6(P=0.003)均明显降低,肺组织细胞凋亡及凋亡相关蛋白caspase-3 cleaved表达同样显著减少(P=0.012)。在下调Mfn2后,Mfn2干扰-姜黄素干预组与Mfn2干扰-脓毒症组相比,小鼠肺组织干湿重比无明显降低,组织病理评分也无显著降低,炎症因子TNF-α和IL-6均无明显降低,肺组织细胞凋亡及凋亡相关蛋白caspase-3 cleaved表达无显著减少。结论姜黄素可能通过上调线粒体融合蛋白2的表达减轻脓毒症急性肺损伤。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素A对脓毒症小鼠急性肺损伤的保护作用

目的 探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素A（trichostatin A，TSA）对脓毒症急性肺损伤的保护作用。方法 建立盲肠结扎穿孔（cecal ligation and puncture，CLP）诱导的脓毒症小鼠模型。取90只清洁级雄性BALB/c小鼠，按随机数字表法分为假手术组（Sham组）、脓毒症组（CLP组）、脓毒症＋DMSO（二甲基亚砜）组（DMSO组）、脓毒症＋TSA（1 mg组）、脓毒症＋TSA（5 mg组）、脓毒症＋TSA（10 mg组），每组15只小鼠。TSA组在CLP 术前12 h 进行腹腔注射TSA（1，5，10 mg/kg）。假手术组仅行开腹，不予以结扎穿孔。术后24 h 收集标本，酶联免疫吸附法（ELISA）检测支气管肺泡灌洗液中（bronchial alveolar lavage fl uid，BALF）肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）水平；留取肺组织，测定肺组织湿/干比（W/D）；苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织病理学改变；TUNEL法检测肺组织细胞凋亡，蛋白免疫印迹法（Westernblot）检测肺组织凋亡蛋白的表达。另外120只小鼠用于观察各组小鼠生存率。采用SPSS 23.0统计软件，两组样本比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析检验。小鼠生存率采用Log-rank检验进行单因素分析。结果与假手术组相比，CLP组W/D（P=0.021）、TNF-α（P=0.0001）、IL-1β（P=0.000 6）、病理评分（P=0.001 6）、肺组织凋亡指数（P=0.000 9）、凋亡蛋白（P〈0.05）明显升高，而小鼠生存率下降（P=0.000 1）。与DMSO组相比，TSA 干预组W/D、TNF-α、IL-1β、病理评分、肺组织凋亡指数、凋亡蛋白明显下降（P〈0.05），TSA 10 mg干预组生存率明显升高（P=0.007 2）。结论 TSA对脓毒症急性肺损伤具有保护作用，其机制可能是通过降低炎症反应和减少细胞凋亡。

拓展训练对温州市贫困大学生心理健康水平的影响

目的:探讨拓展训练对温州市贫困大学生自尊、自我效能感、成就动机等心理健康水平的影响。方法:运用自行设计的拓展训练方案,采用实验法和调查法,对拓展训练前后贫困大学生的心理健康水平及自我成长的效果进行评估。结果:贫困大学生在拓展训练前后自尊水平差异明显(t=-6.759,P<0.01),自我效能感明显增强(t=-7.612,P<0.01),成就动机(MS-MAF)明显提高(t=-3.589,P<0.01)。1个月后进行随访,仍然提示训练对他们的心理健康水平影响差异明显。此外,拓展训练对不同健康水平的学生影响效果也存在较大差异。结论:拓展训练能较好提升贫困大学生的自信心,并在追求成功的强烈愿望、改善应对方式、增加积极情绪体验、承担社会责任等方面具有显著作用及潜在的长期效应,有利于提高心理健康水平。