经眉切口眶顶入路显微手术切除垂体瘤

目的 介绍经眉切口眶顶入路切除垂体瘤的技术和经验。 方法 9例病人采用经眉切口眶顶入路切除。 结果 全切肿瘤8例，次全切除肿瘤1例。 术后病人症状缓解，恢复正常生活工作。 结论 采用经眉切口眶顶入路可以提供足够的手术空间显露鞍区占位病变，减少术中脑压板的使用，避免了对脑组织的压迫。手术创伤小，病人恢复快。

经眉弓锁孔入路治疗颅内病变(附290例分析)

目的总结经眉弓锁孔入路治疗颅内病变的手术经验。方法回顾性分析近10年来收治的290例颅内病变的手术经验。病变位于鞍区279例,颅前窝9例,第三脑室2例。均行经眉弓锁孔入路病变切除术。结果病变全切除214例(73.8%),次全切除76例(26.2%)。206例术前视力障碍病人中,术后1周内视力有所改善158例(76.7%)。术后出现暂时性尿崩24例(8.3%);脑脊液鼻漏5例(1.7%),经保守治疗后恢复。107例功能性腺瘤病人中,术后1周内分泌恢复正常水平56例(52.3%),其余均有不同程度的下降。1例无功能垂体腺瘤病人术后第5天死于心肌梗死。对180例病人术后随访1年,复发15例。结论经眉弓锁孔手术是一种安全、有效的微创手术,值得进行深入研究和广泛应用。

经眉弓锁孔入路切除颅咽管瘤

目的 介绍眶顶锁孔入路切除颅咽管瘤的技术和经验。方法 所有病人采用经眉切口眶顶锁孔入路切除。结果 肿瘤全切率达86.4％,后患者症状缓解,并发症少。结论 采用经眉切口眶顶锁孔入路,将眶顶一直切除至视神经管和眶上裂,增加了眶腔的开放,手术的工作空间主要是在眶腔中进行的,加上引流脑脊液以后,脑组织回缩增加空间对于切除鞍区的占位病变是足够的。本组病例应用眶顶锁孔入路成功地切除了12例颅咽管瘤,此入路的优点之一是手术的 创伤小,手术创口4～5cm,骨瓣的面积只有2cm×3cm大小,术后病人恢复较快,本组病人皆于术后约1周出院。另一个优点在于经此入路可直达病灶,术中减少脑压板的使用,避免了对脑组织的压迫。手术创伤小,病人恢复快。

神经干细胞移植治疗脑卒中后遗症50例临床效果分析

目的:观察应用神经干细胞移植治疗改善脑卒中患者功能独立性的临床疗效。方法:选择2004-01/2005-06哈尔滨医科大学附属第二医院和北京武装警察部队总医院收治的脑卒中患者50例。男31例,女19例;平均55岁;末次发病至接受神经干细胞移植时间平均为3.4年。其中基底节病变39例,脑干病变3例,其他部位(丘脑、大脑半球)8例,累计多部位的病变6例。所有患者腰椎穿刺蛛网膜下腔植入神经干细胞,1次/周,共计3次。采用美国功能独立性评测评分对患者术前,术后6月进行评定。主要评价6个方面的能力:生活自理能力,括约肌控制能力,活动能力,行动能力,理解交流能力,社会认识能力。分值高表示功能独立性好。结果:50例患者全部进入结果分析。脑卒中患者干细胞移植后6个月功能独立性评分显著高于移植前(99.86±7.61,95.84±7.51,P<0.01)。结论:神经干细胞移植可以一定程度地改善脑卒中患者的后遗症,提高患者生活质量。

神经干细胞移植治疗外伤性颅内血肿后遗症20例临床疗效分析

目的探讨应用神经干细胞移植治疗外伤性颅内血肿后遗症的临床疗效。方法对20例外伤性颅内血肿后遗症患者行腰椎穿刺蛛网膜下腔注入神经干细胞,并于第1次术前和第4次术后半年进行功能独立性评定(FIM)。结果患者自我料理、括约肌控制、活动和转移、运动、交流、社会认知都有明显改善(P<0.01)。结论神经干细胞移植可以改善外伤性颅内血肿患者损伤的症状和体征,提高患者生活质量。

大鼠局灶性脑缺血后神经前体细胞增殖迁移的研究

目的研究成年大鼠内源性神经前体细胞在局灶性脑缺血后不同时间窗的增殖分化情况。方法用Longa线栓法制作大鼠脑缺血模型,用免疫组化的方法检测大鼠内源性神经前体细胞最佳增殖时间及最大增殖效果。结果脑缺血半球室管膜下区、嗅球和头端迁徙渠道(rostralmigratorystream,RMS)Brdu阳性细胞数在脑缺血后1d明显增多,3～7d达高峰,14d后开始下降;Brdu阳性细胞数在脑缺血半球室管膜下区和嗅球成正相关;脑缺血侧海马齿状回未见Brdu阳性细胞数明显增多;Brdu阳性细胞在脑缺血后第3周数量最大,从第4周开始下降。结论成年大鼠局灶性脑缺血后3～7d内源性神经前体细胞增殖达高峰,在该期进行外源性细胞移植治疗可能更有效。

血管内皮生长因子VEGF及其受体Flt-1在人脑星形细胞瘤中的表达

目的 检测血管内皮细胞生长因子VEGF及其受体Flt-1在人脑星形细胞瘤中和正常脑组织的表达,分析二者表达程度与脑星形细胞瘤病理分级的关系。方法采用免疫组织化学的方法,对33例脑星形细胞瘤组织和7例正常脑组织VEGF和Flt-1的表达情况进行了观察。结果VEGF在Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型和Ⅳ型脑星形细胞瘤之中阳性率分别为11％、50％、75％和75％,而正常成人脑组织无VEGF表达.脑星形细胞瘤与正常成人脑组织VEGF、表达有显著性差异(P<0.01)。7例正常成人脑组织未见Flt-1表达,脑星形细胞瘤Flt-1表达率分别为0、17％、50％和100％,限于肿瘤血管的内皮细胞表达。肿瘤细胞VEGF表达与Flt-1表达呈正相关(r:0.7376,p<0.001),无论VEGF还是Flt-1在坏死区周围表达都明显增强。结论 VEGF及其受体Flt-1在人脑星形细胞瘤和正常脑组织的表达有显著性差异,与脑星形细胞瘤病理分级有关。

大鼠嗅球嗅鞘细胞的体外分离培养及纯化

背景:差速贴壁+Thy1.1抗体及补体纯化法的应用较多,细胞换液过程中使用含血清的培养基主要针对成纤维细胞的去除,而对神经元的去除作用不明显。目的:根据神经元体外培养需要血清的特性,拟利用无血清培养基在体外建立一种分离培养嗅鞘细胞的简单方法。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-06/2009-01在哈尔滨医科大学动物实验中心完成。材料:成年SD大鼠10只,由哈尔滨医科大学实验动物中心提供。方法:在差速贴壁+Thy1.1抗体及补体纯化法的基础上,剪开大鼠颅骨,显露位于颅腔前方的嗅球,取出2只嗅球,在显微镜下去除嗅球表面的软脑膜和毛细血管及外周组织,保留富含嗅鞘细胞的嗅神经层和嗅球颗粒层,剪成1mm3小块分离获取单细胞悬浮液,调整细胞密度至1×107L-1,接种在用poly-l-lysine包被的培养瓶或培养板中,于37℃、体积分数为5%的CO2培养箱中培养,第3天用无血清DMEM/F12培养基换液培养。主要观察指标:嗅鞘细胞的形态学观察、生长曲线分析、免疫荧光染色结果。结果:培养前3d细胞数目无明显增加,甚至减少;然后细胞数目逐渐增多,13d细胞基本长满;传10代后细胞形态发生明显变化,胞浆内出现许多空泡,细胞增殖速度减慢或停止。纯化培养10d后,培养板内双极和三极细胞均呈GFAP,NGFRp75阳性。结论:在差速贴壁+Thy1.1抗体及补体纯化法的基础上,利用无血清DMEM/F12培养基进行换液培养可使嗅鞘细胞迅速增殖,是一种效率较高的体外培养方法。

温热疗法对人脑胶质瘤细胞杀伤作用研究

目的 温热疗法对人胶质瘤细胞的杀伤作用。方法 用人胶质瘤细胞NP2 ,U2 5 1,行37℃ (对照组 ) ,4 2℃ ,4 3℃ ,4 4℃ (治疗组 )加温 1h ,用WST 1方法测定细胞生存率 ,分析肿瘤细胞杀伤效果。结果 4 3℃ ,4 4℃加温 1h ,均取得了显著的肿瘤细胞杀伤效果。结论 温热疗法作为脑胶质瘤新的临床治疗方法是可行的 。

自体肋间神经联合酸性成纤维细胞生长因子移植治疗高位脊髓损伤

背景:酸性成纤维细胞生长因子具有调节细胞增殖、移行、分化和生存的作用,也可以下调已知轴突再生的抑制因子如蛋白聚糖等,帮助轴突克服这些抑制因子,对神经纤维再生有重要作用。目的:观察酸性成纤维细胞生长因子联合周围神经移植治疗大鼠高位脊髓损伤的可行性及效果。方法:健康成年雌性SD大鼠108只随机抽签法分为自体神经组、自体神经联合生长因子组、高位脊髓横断组。咬除大鼠T8～10棘突、椎板,显露硬膜囊,水平切断高位脊髓并切除3mm,显微镜下确认无神经纤维相连。自体神经组、自体神经联合生长因子组取双侧第8～10对肋间神经各2cm,将肋间神经交叉移植入高位脊髓缺损处(近端白质与远端灰质、远端白质与近端灰质),分别以纤维蛋白凝胶、含有酸性成纤维细胞生长因子的纤维蛋白凝胶固定植入的肋间神经,缝合硬膜。高位脊髓横断组断端间旷置。术后90d,行体感诱发电位及运动诱发电位检测观察神经电生理恢复情况。术后76d,生物素葡聚糖胺顺行神经示踪观察运动传导束恢复情况。术后60d,后肢BBB运动功能评分观察肢体运动恢复情况。结果与结论:高位脊髓横断组大鼠均未引出体感及运动诱发电位波形。自体神经组、自体神经联合生长因子组均可引出体感及运动诱发电位,自体神经联合生长因子组体感诱发电位及运动诱发电位的平均潜伏期和波幅、BBB评分均明显优自体神经组(P<0.01)。自体神经组和自体神经联合生长因子组在损伤区有较多生物素葡聚糖胺标记阳性神经纤维通过,明显多于高位脊髓横断组(P<0.01),自体神经联合生长因子组多于自体神经组(P<0.01)。提示自体周围神经移植酸性成纤维细胞生长因子能更好地恢复高位脊髓损伤后大鼠肢体运动功能。

局部注射骨髓间充质干细胞治疗大鼠脊髓损伤:运动功能有改善吗?

背景:目前研究多为骨髓间充质干细胞的体外培养及细胞移植对颅内疾病的治疗,对植入细胞在损伤脊髓中的成活、分化、迁移、结构重建等了解有限。目的:探讨局部骨髓间充质干细胞移植在脊髓损伤修复中的作用和骨髓间充质干细胞替代治疗的可行性。方法:成年健康雌性SD大鼠随机分为细胞移植组和对照组,建立SD大鼠脊髓横断损伤模型,伤后即刻分别向损伤区局部移植大鼠骨髓间充质干细胞悬液或无钙镁磷酸缓冲液。在术前和术后1d,1周,2周,3周,4周和8周进行BBB评分,观测大鼠的运动功能,并于移植后1周免疫组织化学染色法观察BrdU标记的骨髓间充质干细胞在脊髓损伤处的存活情况,移植后4周进行损伤脊髓的大体观察和组织学检测。结果与结论:移植后第1～8周细胞移植组BBB评分均髙于对照组;术后1周免疫组织化学染色结果显示在细胞移植组大鼠脊髓远端检测到BrdU阳性细胞,术后4周脊髓损伤处发现有神经纤维。证实通过损伤后立即局部注射的方式将骨髓间充质干细胞移植进大鼠脊髓损伤区,细胞可在损伤区存活;存活的骨髓间充质干细胞可分化为神经元,在损伤局部形成神经元通路,从而促进脊髓神经纤维传导功能的恢复,并促进高位脊髓损伤后大鼠后肢运动功能恢复。

增殖细胞核抗原的表达与垂体腺瘤侵袭性关系的研究

目的探讨增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白表达与垂体腺瘤侵袭性的关系。方法应用免疫组化S-P法检测43例侵袭性垂体腺瘤和37例非侵袭性垂体腺瘤PCNA的表达情况。结果 PC-NA在侵袭性垂体腺瘤中表达明显高于非侵袭性垂体腺瘤组(P<0.05),复发组高于非复发组(P<0.01)。结论 PCNA蛋白表达异常与垂体腺瘤的发生及侵袭性有关,它的表达情况可作为垂体腺瘤侵袭性的参考指标。

MMP-2及TIMP-2的表达与胶质瘤复发相关性的研究

目的:探讨基质金属蛋白酶类与胶质细胞瘤浸润性生长之间的关系及其在胶质瘤复发中的作用。以及基质金属蛋白酶及其抑制因子(MMP-2、TIMP-2)的阳性表达与胶质细胞瘤病理分级及预后的关系。方法:应用免疫组织化学染色法(SP法)检测48例人脑原发和复发胶质细胞瘤组织中MMP-2、TIMP-2的表达。结果:Ⅲ、Ⅳ级和复发胶质细胞瘤中的MMP-2蛋白的表达显著高于Ⅰ、Ⅱ级(P<0.05);Ⅰ、Ⅱ级胶质细胞瘤中的TIMP-2蛋白的表达显著高于复发胶质细胞瘤(P<0.05)而与Ⅲ、Ⅳ级细胞瘤无显著性差异(P>0.05);Ⅲ、Ⅳ级和复发胶质细胞瘤中的MMP-2,TIMP-2蛋白的表达无显著差异(P>0.05);同级别胶质细胞瘤中MMP-2、TIMP-2的表达之间无明显相关性(P>0.05);正常脑组织中无表达。结论:MMP-2、TIMP-2的表达与胶质细胞瘤的恶性程度有关,低级别中,MMP-2与TIMP-2成正相关;MMP-2的高表达,TIMP-2的低表达与胶质细胞瘤的侵袭有关,MMP-2、TIMP-2的表达水平有可能成为判定胶质细胞瘤恶性程度、侵袭能力和预后的诊断指标,而且TIMP-2可能更加敏感。

伽玛刀治疗颅内肿瘤的病理组织学研究

目的观察伽玛刀治疗颅内肿瘤的病理组织学变化,探讨伽玛刀治疗的放射生物学效应机制。方法对46例颅内肿瘤伽玛刀照射后的手术标本行光镜、电镜的病理形态学变化观察,并采用S-P法对上述肿瘤标本和10例正常脑组织血管标本行免疫组织化学染色,观察受照射肿瘤血管的CD34、α-SMA的表达,根据染色强度行对比分析。结果伽玛刀照射后的肿瘤细胞均有不同程度的凝固性坏死,肿瘤间质纤维化,血管内皮细胞肿胀、固缩、脱落,内皮增生,肿瘤血管扩张、充血,血管壁普遍出现增厚,管腔闭塞。可伴有炎性细胞浸润或出血。肿瘤的周边区域可观察到早期凋亡细胞。免疫组化的结果显示正常脑组织血管中CD34、α-SMA明显呈阳性,而受照射的肿瘤组织中CD34的反应性明显减少或呈阴性。α-SMA在大多数肿瘤组织中仍呈强阳性反应。结论伽玛刀治疗颅内肿瘤的放射生物学效应机制主要为肿瘤细胞的直接杀伤效应与血管效应的双重作用;伽玛刀照射诱导肿瘤细胞凋亡在伽玛刀治疗中起到一定作用。

温热疗法对人胶质瘤细胞的治疗效果观察

目的研究温热疗法对人胶质瘤细胞的治疗效果。方法将人胶质瘤细胞NP2、U251、T98G肿瘤细胞分别以37℃(对照组),42℃、43℃、44℃(治疗组)加温2h,不同时间点用WST-1assay方法测定细胞生存率,分析杀肿瘤细胞效果。结果43℃、44℃加温1h以上时,均取得了显著的杀肿瘤细胞效果。结论为温热疗法作为脑胶质瘤新的临床治疗方法提供了实验依据。

破裂脑动脉瘤早期手术的探讨

早期手术治疗34例破裂脑动脉瘤,其中位于颈内动脉24例,前交通动脉9例,大脑后动脉1例.27例治愈,4例好转,3例死亡.早期手术的主要目的是预防再出血,清除蛛网膜下腔积血,以预防脑血管痉挛.

大鼠C6胶质瘤模型构建及生长特性的研究

目的建立Wistar大鼠C6胶质瘤模型,研究C6脑胶质瘤的发生、发展过程,细胞侵袭情况,肿瘤细胞及血管特性,肿瘤自发消退现象,模型最佳应用时间段及应用范围。方法Wistar大鼠各50只,其中9只用于对照。将C6胶质瘤细胞悬液和DMEM培养基立体定向接种于大鼠的右侧尾状核,分别于接种后3,7,14,21,28,35,50d进行增强MRI扫描及病理切片HE染色,MMP-2,CD31免疫组化染色。同时观察荷瘤鼠的生物学行为。结果肿瘤模型于接种后7d可在MRI上见到肿瘤生长,病理切片可见肿瘤细胞沿神经纤维向周边侵袭,成出芽状生长,14～28d为快速增长期,免疫组化染色显示基质金属蛋白酶MMP-2及新生血管CD31成强阳性表达,肿瘤细胞聚集,血脑屏障严重破坏,并可沿胼胝体向对侧生长。大部分荷瘤鼠死于30d内,但有2只28d后出现肿瘤自发消退现象,病理切片可见大量炎细胞浸润,肿瘤内部出现软化灶。结论大鼠C6胶质瘤模型的生长过程,病理性质与人脑间变,胶质母细胞瘤具有相似性,生长稳定。尽管部分荷瘤鼠出现肿瘤自发消退现象,但此模型仍适合大部分抗胶质瘤药物或基因治疗等的临床前期研究。试验研究最佳时间窗为14～28d。

经眶缘上外侧锁孔入路治疗大脑中动脉动脉瘤:手术技术与预后

目的介绍一种新的手术技术:经眶缘上外侧锁孔入路微创手术治疗大脑中动脉动脉瘤及其预后。方法对1999年10月～2001年12月经此入路手术治疗的12例大脑中动脉动脉瘤的病人进行了回顾性分析。结果所有动脉瘤均成功夹闭,无死亡病例,并发症少,创伤小,美容效果理想。病人出院时和6个月后随访,改良Rankin评分所有病人均为0级。结论采用眶缘上外侧锁孔入路治疗大脑中动脉动脉瘤易操作,切口小,开颅小,暴露充分,术时短,无需输血,是一种理想的手术治疗方法。