厚藤ASR基因克隆及功能初步分析

通过对厚藤(Ipomoea pes-caprae(Linn.)Sweet.)cDNA文库的筛选,获得了一个编码厚藤ASR(ABA-stress-ripening)基因的全长cDNA,命名为IpASR。研究结果显示,IpASR编码区全长648 bp,共编码215个氨基酸;蛋白质等电点为5.42,分子量为24.57 k D。通过在酵母中表达,发现IpASR能够提高转基因酵母的耐盐性及抗氧化能力。进一步以厚藤成年植株及幼苗为材料进行实时荧光定量PCR分析,结果表明,IpASR基因在厚藤成年植株各组织中广泛表达;高盐、甘露醇胁迫和ABA处理可诱导该基因在厚藤幼苗中的表达。结合GFP融合蛋白的亚细胞定位和生物信息学分析,发现IpASR蛋白为核蛋白,推测IpASR基因参与了厚藤生长发育的调控,并可响应ABA和非生物胁迫的诱导。

阴香叶黄酮类化合物提取工艺的研究

以阴香叶为试材,在单因素试验的基础上,通过正交试验对阴香叶黄酮类化合物的提取工艺进行研究。结果表明,阴香叶黄酮类化合物提取的最佳工艺条件为:乙醇浓度90%,提取温度40℃,提取时间75 min,料液比1∶35(g/m L),在此工艺条件下黄酮类化合物的平均提取率为2.38%。阴香叶含有较高的黄酮类化合物,值得开发利用。

潮州市7个杨梅品种果实营养成分评价

为给杨梅的品种选育提供依据,以潮州市主栽7个杨梅品种为试材,测定了各杨梅品种果实的主要性状及营养品质。结果表明:不同杨梅品种间所含营养成分存在差异,不同区域栽培的同一品种果实的营养品质也有所不同。鸭背村生产的东魁杨梅单果质量为17.918 g,果实最大,远高于潮阳乌、酥核、玫瑰红、饶平红、葫芦蒂、潮阳红等6个杨梅品种,也比银潭村生产的东魁杨梅(单果质量仅15.366 g)大;7个杨梅品种果实含有丰富的可溶性固形物、蛋白质、有机酸、维生素C以及Fe、Mg和Zn等矿质元素,东魁杨梅在7个被测品种中无论从单果质量还是品质方面均具有较大的优势,值得推广。

厚藤脱水素基因IpDHN启动子IpDHN-Pro的克隆和调控转录活性分析

为了解厚藤(Ipomoea pes-caprae)脱水素基因IpDHN (GenBank登录号:KX426069)启动子的转录活性和对非生物胁迫和植物激素ABA的响应,通过染色体步移法克隆了IpDHN的上游启动子序列IpDHN-Pro,长度为974 bp。构建IpDHN-Pro调控下GUS转基因载体,转化拟南芥(Arabidopsis thaliana)植株获得IpDHN-Pro::GUS转基因植株并进行GUS染色,验证IpDHN-Pro启动转录活性以及在氯化钠、甘露醇、ABA处理后拟南芥GUS基因表达变化。结果表明,扩增获得的IpDHN-Pro序列包含多个顺式作用元件,包括1个ABRE、3个Myb转录因子结合位点、富含TC的重复序列以及Skn-1基序等。转基因拟南芥GUS染色及qRT-PCR表明该序列可驱动GUS基因在拟南芥稳定表达,且表达受高盐、渗透压及ABA的诱导。这表明IpDHN-Pro是一个盐旱、ABA诱导的启动子序列,可应用于相关的植物抗逆遗传工程研究。

白簕叶乙醇提取物对杨桃贮藏生理和品质的影响

通过测定杨桃(Averrhoa carambola L.)果实贮藏期间的生理指标(质膜相对透性、呼吸强度、POD、PPO和PAL活性)和营养品质(维生素C、可溶性固形物、有机酸、蛋白质含量)的相关指标,分析其变化规律,研究白簕[Acanthopanan trifoliatus(L.)Merr.]叶乙醇提取物对杨桃果实采后保鲜效果的影响。结果表明,白簕叶乙醇提取物能够抑制杨桃果实的呼吸速率,使果实保持较低的代谢水平,降低果实的质膜相对透性,并有效地抑制杨桃果实POD、PPO的活性,提高PAL的活性,有利于延长贮藏期限和保持杨桃果实原有的风味和品质。

厚藤胚胎发生晚期丰富蛋白基因IpLEA的克隆与功能分析

LEA(Late embryogenesis abundant)基因是生物体中广泛存在的一类广泛响应逆境胁迫的功能基因,主要参与调控植物对缺水等逆境胁迫的耐受。为了探索厚藤LEA基因的抗逆分子机制,本研究通过前期对厚藤(Ipomoea pes-caprae L.)c DNA文库的筛选,获得了一个编码厚藤LEA基因的全长c DNA,命名为IpLEA(Gen Bank登录号:MF680612)。通过在酵母中表达,表明IpLEA能够提高转基因酵母的耐盐性及抗氧化能力。以厚藤成年植株及幼苗为材料进行实时荧光定量RT-PCR分析的结果表明:IpLEA基因在厚藤各组织中广泛表达;在厚藤幼苗中的表达受到高盐、甘露醇胁迫和ABA处理的诱导。推测IpLEA基因参与厚藤应答高盐、干旱等逆境胁迫,并响应ABA信号的传递。本研究为今后厚藤IpLEA基因的进一步功能发掘和厚藤响应极端逆境的机理研究提供了理论依据。