结直肠癌组织PSMA标记的微血管密度与相关临床病理特征的关系

目的探讨结直肠癌组织中PSMA标记的微血管密度情况,并分析其与临床病理学特征及预后的相关性。方法采用免疫组化EnVision法检测102例结直肠癌组织中PSMA标记的微血管密度情况,PCR法检测结直肠癌组织中微卫星稳定和KRAS基因突变情况,分析PSMA微血管密度与临床病理特征及预后的相关性。结果PSMA均明确表达于肿瘤间质新生的血管内皮细胞膜,在肠壁组织的正常血管内皮未见表达;PSMA标记的微血管密度平均值为12.11,其在肿瘤组织及正常对照组织中的表达差异有统计学意义(P<0.001);PSMA标记的微血管密度与结直肠癌组织学类型(P=0.030)和淋巴结转移(P=0.033)相关。结论PSMA在结直肠癌肿瘤相关血管中表达较高,且与组织学分型、淋巴结转移显著相关,提示PSMA可能作为结直肠癌血管靶向治疗的新靶点,为PSMA用于结直肠癌的靶向治疗提供理论依据。

不同分子亚型子宫内膜癌组织中叶酸受体1、前列腺特异性膜抗原的表达

目的:探讨不同分子亚型子宫内膜癌组织中叶酸受体1(FOLR1)、前列腺特异性膜抗原(PSMA)的表达及意义。方法:收集2018年3月至2022年2月郑州大学第一附属医院病理科诊断、且采用高通量测序技术进行分子分型的140例子宫内膜癌患者的临床资料。采用免疫组化染色方法检测140例子宫内膜癌、27例非典型增生及10例增生期子宫内膜组织中FOLR1、PSMA的表达情况。结果:FOLR1、PSMA在正常子宫内膜、非典型增生及癌组织中表达逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。FOLR1在子宫内膜癌4种分子亚型中的表达差异无统计学意义(P=0.203)。PSMA在肿瘤细胞及肿瘤特异性血管、新生血管中均表达,在无特定分子特征型(NSMP)中过表达,明显高于其他组(P<0.05);PSMA表达与癌组织学类型、FIGO分期、ER及PR表达显著相关(P<0.05);子宫内膜癌组织中FOLR1与PSMA表达呈正关联(r S=0.170,P=0.045)。结论:FOLR1、PSMA可促进子宫内膜癌进展,且在子宫内膜癌恶性转化中相互协同。

结直肠癌中TRPV6蛋白表达及其与临床病理学特征和预后相关性分析

目的探讨结直肠癌组织中TRPV6蛋白表达情况,并分析其与患者相关临床病理学特征及预后的相关性。方法应用免疫组织化学法检测65例结直肠癌石蜡组织中TRPV6蛋白表达情况,PCR法检测结直肠癌石蜡组织中微卫星稳定和KRAS基因突变情况,采用SPSS 24.0统计学软件分析TRPV6阳性表达与患者临床病理特征及预后的相关性。结果TRPV6蛋白明确表达于肿瘤细胞及正常肠道黏膜上皮细胞膜;65例结直肠癌TRPV6阳性率为24.62%,高于正常对照肠黏膜,二者表达存在显著差异(P<0.05)。TRPV6阳性表达与肿瘤远处转移(P=0.029)、肿瘤组织微卫星状态(P=0.027)及KRAS癌基因突变显著相关(P=0.018),而与患者性别、年龄、肿瘤部位、分化程度、组织学类型、淋巴结转移、临床分期等均未显示显著相关。结论TRPV6蛋白可能参与了结直肠癌的发生、发展,其确切作用机制有待进一步深入研究。

白藜芦醇对裸鼠胃癌移植瘤中PDCD5蛋白表达及细胞凋亡的影响

目的探讨白藜芦醇(Res)对裸鼠胃癌移植瘤细胞凋亡相关基因PDCD5蛋白表达及细胞凋亡的影响。方法将BGC-823细胞复苏后,通过右前肢腋部皮下移植构建裸鼠胃癌移植瘤模型。建模成功后的荷瘤裸鼠随机分为空白对照组、Res组、顺铂组和联合用药组(白藜芦醇+顺铂),各组分别在成瘤部位皮下注射0.2ml相应的药物,每日1次,治疗1周。停药后将裸鼠处死,剥离肿瘤组织。采用免疫组织化学方法检测移植瘤组织中PDCD5蛋白表达,采用原位末端标记法(TUNEL)检测移植瘤组织中细胞凋亡情况。结果 Res组中PDCD5蛋白表达水平明显高于空白对照组,但低于顺铂组和联合用药组,上述各组两两相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。TUNEL法检测到胃癌移植瘤中凋亡细胞核呈棕褐色,染色深浅不一,染色质分布不均,空白对照组中仅见到少数凋亡细胞,Res组、顺铂组和联合用药组凋亡细胞数依次增加,上述各组两两相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论白藜芦醇可上调裸鼠胃癌移植瘤细胞中PDCD5的蛋白表达,表明其可能通过上调PDCD5的表达进而诱导细胞凋亡。

siRNA干扰CXCR4基因对T24细胞侵袭力的影响

目的:研究RNA干扰下调CXCR4基因对膀胱移行细胞癌T24细胞体外侵袭力的影响。方法:根据CX-CR4基因特点,设计合成CXCR4特异性小干扰RNA(siRNA),并转染T24细胞,同时设置空白对照(转染时只加脂质体)和阴性对照(采用无关序列RNA转染)组。通过RT-PCR方法检测CXCR4mRNA的表达,采用Westernblot方法检测CXCR4蛋白的表达,用Boyden小室体外细胞侵袭模型检测细胞体外侵袭能力。结果:各组T24细胞的CXCR4mRNA、蛋白水平和穿膜细胞数比较,差异有统计学意义(F=140.822、473.079和133.247,P<0.001)。siRNA转染组T24细胞的CXCR4mRNA、蛋白表达下调,体外侵袭力减弱(P<0.05)。结论:CXCR4特异性siRNA可降低膀胱移行细胞癌T24细胞体外侵袭力。

CXCR4基因沉默后对T24膀胱癌细胞株裸鼠移植瘤的影响

目的探讨CXC趋化因子受体4(CXCR4)基因沉默后对人膀胱移行细胞癌裸鼠移植瘤的影响。方法构建人膀胱移行细胞癌T24细胞株裸鼠膀胱癌移植瘤模型,荷瘤裸鼠随机分为小干扰RNA(siRNA)组、空白对照组和阴性对照组,各组分别在瘤旁注射CXCR4 siRNA、无菌生理盐水和无关序列。监测肿瘤生长情况,比较各组裸鼠成瘤大小。采用RT-PCR、免疫组织化学及Western blot方法检测各组裸鼠肿瘤组织中CXCR4 mRNA及蛋白的表达情况。结果 siRNA干扰组裸鼠移植瘤体积显著小于空白对照组和阴性对照组,分别为(1 423.60±148.23)mm3、(2 516.00±208.03)mm3和(2 420.40±162.36)mm3,P<0.05;siRNA干扰组裸鼠移植瘤CXCR4 mRNA水平及蛋白表达率显著低于空白对照组和阴性对照组,分别为(0.397±0.035)vs(0.844±0.027)v(s 0.828±0.015),P<0.05和(62.60±11.89)vs(132.60±13.28)v(s 127.60±16.02),P<0.05。结论CXCR4 siRNA能抑制人膀胱移行细胞癌T24细胞株裸鼠皮下移植瘤的形成,且能在体内有效下调CX-CR4 mRNA和蛋白的表达。

食管鳞状细胞癌组织中CXCR4蛋白及mRNA的表达

目的:探讨CXCR4蛋白与mRNA在食管鳞状细胞癌组织中的表达及意义。方法:采用原位杂交技术及免疫组织化学方法检测62例食管鳞癌、31例癌旁不典型增生及62例正常食管黏膜组织中蛋白及mRNA的表达,并分析其与临床病理学参数的关系。结果:正常黏膜、癌旁不典型增生及食管鳞癌组织中CXCR4蛋白的阳性表达率依次增高,分别为0(0/31)、29.0%(9/31)、69.4%(43/62),组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05);CXCR4蛋白表达与癌的组织学分级、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05)。正常黏膜、癌旁不典型增生及食管鳞癌组织中CXCR4 mRNA的阳性表达率依次增高,分别为0(0/31)、12.9%(4/31)、62.9%(39/62),组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05);CXCR4mRNA表达与癌的组织学分级、浸润深度及TNM分期有关(P<0.05)。结论:CXCR4蛋白及mRNA阳性表达率升高可能与食管鳞癌的发生、发展及浸润、转移有关。

外周神经缺失对创伤愈合的影响

目的探讨创伤愈合过程中外周神经对成纤维细胞的影响。方法将大鼠左侧坐骨神经及分支切断结扎,右侧为对照。分别于第3、7、10d观察创面情况并各处死大鼠10只取材行HE染色观察成纤维细胞数。结果神经缺失侧较对照侧愈合较慢,相同时间内成纤维细胞数较少。结论外周感觉神经在创伤后早期可促进成纤维细胞的增殖。

食管鳞癌组织中P-selectin的表达与淋巴结转移的关系

目的 探讨P selectin在食管鳞癌中的表达水平及其与食管癌病理分级和淋巴结转移的关系。方法 应用原位杂交及免疫组化SP技术研究了P selectinmRNA及蛋白在有转移的和无转移的食管鳞癌中的表达。结果 癌组织中P selectinmRNA及蛋白的阳性率在有转移的食管鳞癌中的表达分别为 76.2 % ( 16/2 1)和 85 .7% ( 18/2 1) ,在无转移的食管鳞癌中的表达分别为 48.5 % ( 16/3 3 )和5 4.5 % ( 18/3 3 )。它们的表达与浸润深度和淋巴结转移呈正相关 (P <0 .0 5 )。P selectinmRNA与P selectin蛋白的表达呈明显负相关(r =0 .0 0 5 )。结论 P

TAp73γ在Saos-2细胞中定量诱导体系的建立

目的利用Tet-On基因表达系统建立Saos-2/Tet-On/TAp73γ细胞株,通过强力霉素(Doxycycline,Dox)定量诱导TAp73γ基因的表达。方法将质粒pRevTet-On、pRevTRE-Luc和pRevTRE-TAp73γ分别转染PT67细胞,产生相应的逆转录病毒。RevTet-On病毒感染Saos-2细胞,经G418选择培养基进行培养并感染RevTRE-Luc,再应用荧光素酶活性检测筛选出高诱导倍数的Saos-2/Tet-On细胞克隆。最后该细胞株感染RevTRE-TAp73γ病毒,用强力霉素筛选出阳性细胞,在不同浓度Dox诱导下用Western blot分析Saos-2/RevTet-On/TAp73γ细胞中TAp73γ的表达。结果Saos-2/RevTet-On克隆5当培养基中Dox浓度达到2·5mg/L时,荧光素酶相对活性值为5·3×106RLU/s,去除Dox时荧光素酶活性最弱,背景最低。Western blot结果显示在Saos-2/Tet-On5细胞中TAp73γ蛋白表达随着Dox浓度的增加而增加。结论建立了Saos-2/Tet-On及Saos-2/Tet-On/TAp73γ细胞株,可利用四环素衍生物定时定量调整Saos-2细胞中TAp73γ基因的表达,为研究TAp73γ细胞内协同作用因子、进一步阐明细胞内p73蛋白的生物学行为提供了一个理想的研究平台。

教学反思促进教师教学水平的提高

教学方法是教师每节课成败的关键．而教学方法的总结即教学反思则更为重要。

食管鳞癌中RECK和MMP-9蛋白表达的相关性及临床病理意义

目的:探讨RECK及基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)表达与食管癌发生、发展及浸润、转移的关系．方法:应用免疫组化SP法检测62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织中RECK及MMP-9蛋白表达．采用x2检验进行统计学分析．结果:食管鳞癌组织中RECK和MMP-9蛋白表达与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移密切相关(x2=10．422,8．550,4．751;x2= 8．447,14．333,5．373;均P<0．05)．在食管鳞癌癌变过程中RECK蛋白表达在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达率依次增高,分别为59．7％,71．0％,85．5％,组间比较有明显差异(P<0．01);而MMP-9蛋白在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达率依次降低,分别为80．6％,80．6％, 27．4％,组间比较有明显差异(P<0．01)．结论:RECK和MMP-9在食管癌的浸润、转移及黏膜上皮癌变过程中起重要作用,RECK及MMP-9的联合检测可望成为食管鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标之一．

TPX2和Aurora A在食管鳞癌中的蛋白表达及其临床病理意义

目的探讨TPX2在食管鳞癌及其癌前病变中的表达和意义。方法采用SP免疫组织化学方法检测TPX2和Aurora A蛋白在62例食管鳞癌、31例不典型增生组织及62例正常食管黏膜中的表达水平。结果免疫组织化学结果显示,TPX2蛋白在正常黏膜、癌旁不典型增生和癌组织的表达率依次增高,分别为4.8%(3/62),51.6%(16/31)和85.5%(53/62),三组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。TPX2的蛋白表达水平与食管癌的淋巴结转移和浸润深度密切相关,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。Aurora A蛋白在正常黏膜、癌旁不典型增生和癌组织的表达率依次增高,分别为3.2%(3/62),45.2%(14/31)和71.0%(44/62),三组间比较差异有统计学意义(P<0.01),且表达水平与食管癌的组织学分期、浸润和转移相关。结论TPX2、Aurora A基因蛋白的表达可能是食管鳞癌淋巴结转移的危险因素,两者的联合检测可望成为食管鳞癌的早期诊断指标,是判断预后的指标之一。

早期低剂量应用短肽类肠内营养液对脓毒症患者血清白细胞介素-6水平的影响

目的:探讨早期低剂量应用短肽类肠内营养液对脓毒症患者血清白细胞介素-6(IL-6)水平的影响。方法:选择34例脓毒症患者,分为治疗组(16例)和对照组(18例)。对照组仅给予抗感染等常规治疗,治疗组同时早期低剂量(1次/d,250 mL/次)给予短肽类肠内营养液治疗1周(治疗过程中治疗组死亡2例,对照组死亡4例,最终纳入疗效分析的2组患者均为14例)。所有患者在入院和治疗第1周内每天留取静脉血,应用ELISA法检测血清IL-6水平。结果:对照组和治疗组患者治疗1周内不同时间血清IL-6水平的差异有统计学意义(F时间=242.067,P<0.001),2组间血清IL-6水平差异有统计学意义(F组间=12.140,P=0.002)。结论:脓毒症患者早期低剂量应用短肽类肠内营养液安全有效,可显著降低血清IL-6水平,有助于脓毒症的控制和患者康复。

食管鳞状细胞癌组织中血管内皮生长因子-C与血小板生成因子-4蛋白的表达

目的:检测食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中血管内皮生长因子-C(VEGF-C)及血小板生成因子-4(FLT-4)蛋白的表达。方法:应用免疫组织化学SP法检测50例ESCC组织及其相应的癌旁不典型增生组织(19例)及正常食管黏膜组织(50例)中VEGF-C与FLT-4蛋白的表达,并分析ESCC组织中2者的表达与患者临床病理因素的关系。结果:ESCC组织、癌旁不典型增生组织及正常食管黏膜组织中VEGF-C蛋白的阳性表达率依次降低,分别为82.0%(41/50)、47.4%(9/19)、26.0%(13/50),3组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);FLT-4蛋白的阳性表达率依次降低,分别为72.0%(36/50)、36.8%(7/19)、18.0%(9/50),3组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);VEGF-C蛋白的表达与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05),FLT-4蛋白的表达与肿瘤的淋巴结转移有关(P<0.05)。ESCC组织中2者的阳性表达呈正相关(rs=0.536,P=0.000)。结论:VEGF-C和FLT-4与ES-CC的发生、浸润及转移有关,联合检测2者可望成为ESCC早期诊断和判断预后的分子指标之一。

CD_(31)、CD_(34)和CD_(105)蛋白在食管鳞状细胞癌组织微血管中的表达及意义

目的探讨CD31、CD34和CD105蛋白表达在食管鳞状细胞癌(ESCC)发生、发展中的作用。方法应用免疫组化SP法对50例ESCC和10例正常食管黏膜组织标本进行标记染色,按Weidner法计算三种蛋白标记物的肿瘤组织微血管密度(MVD)。结果在ESCC及正常食管黏膜组织中MVD-CD31、MVD-CD34及MVD-CD105均依次降低,组间比较P<0.01;MVD-CD31、MVD-CD34与ESCC的浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05),MVD-CD105与ESCC的TNM分期、浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.01);ESCC组织中MVD-CD31、MVD-CD34均显著高于MVD-CD105(P<0.01)。结论CD31、CD34和CD105蛋白表达在ESCC发生、发展和转移中起重要作用;联合检测三者可望为判断ESCC发展及利用血管抑制剂治疗提供理论依据。

浸润转移胃癌组织中肝素酶基因的表达

目的:探讨肝素酶(HPA)基因表达对胃癌浸润、转移的影响。方法:以RT-PCR法检测HPA基因在36例胃癌组织及11例正常胃组织中的表达。结果:36例胃癌组织中有27例(75.0％)HPA基因表达阳性,11例正常胃组织中无阳性病例;有浆膜浸润和淋巴结转移的胃癌组织其阳性表达率分别为95.5％(21/22)和92.6％(25/27),无浆膜浸润和无淋巴结转移的胃癌组织其阳性表达率分别为42.9％(6/14)和22.2％(2/9),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:HPA促进胃癌的浸润、转移,可作为胃癌的预后参考指标。

食管鳞癌组织中Galectin-3蛋白及mRNA的表达及意义

目的探讨Galectin-3蛋白及mRNA在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达及其意义。方法应用免疫组化及原位杂交方法检测50例ESCC、19例癌旁不典型增生组织及50例正常食管黏膜组织中Galectin-3蛋白及mRNA的表达。结果ESCC、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中Galectin-3蛋白的阳性表达率依次降低,分别为72.0%(36/50)、47.4%(9/19)和24.0%(12/50),组间比较差异有统计学意义(P<0.05);ES-CC、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中Galectin-3 mRNA的阳性表达率依次降低,分别为66.0%(33/50)、31.6%(6/19)和20.0%(10/50),组间比较差异有统计学意义(P<0.05);Galectin-3蛋白及mRNA的表达均与ESCC的组织分级、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论Galectin-3蛋白及mRNA表达与ESCC的发生、发展和转移密切相关,联合检测Galectin-3蛋白及mRNA表达可望成为ESCC早期诊断和预后判断的分子指标之一。

血必净对严重感染患者血清IL-6水平时效和量效的影响

目的:探讨血必净对严重感染患者重要炎症因子血清白细胞介素(IL)-6水平的时效和量效影响,了解血必净治疗严重感染性疾病的最佳有效剂量。方法:随机抽取48例严重感染患者,并随机分为治疗组(35例)和对照组(13例);对照组仅给予抗感染等常规治疗,死亡3例;治疗组同时给予血必净治疗,死亡5例,并依据血必净应用剂量100、300和500mL/d平均分为剂量1～3组。所有患者在入院和治疗第1周内每天留取静脉血,应用ELISA法检测血清IL-6水平。结果:对照组和各剂量组在不同测定时间的差异有统计学意义(P<0.01)。随着时间增加严重感染患者血清IL-6先显著增加,在3d内感染得到控制,IL-6达到峰值,然后均出现显著降低;但随着治疗组血必净剂量增加,严重感染得到控制的时间缩短,IL-6峰值降低。对照组和不同剂量组间IL-6差异有统计学意义(P<0.01)。对照组分别与剂量1～3组之间,剂量1组与剂量2组、剂量3组之间血清IL-6的差异均有统计学意义(P<0.05),但剂量2组和剂量3组之间的差异无统计学意义。结论:血必净可使严重感染患者得到控制的时间缩短,血清IL-6峰值降低,其最佳应用剂量为300mL/d。