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脐静脉内皮细胞外泌体对炎症因子刺激下前软骨细胞凋亡的影响
被引量:
3
1
作者
杨润泽
许文宁
+1 位作者
郑火亮
蒋盛旦
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第2期147-153,共7页
目的·探讨脐静脉内皮细胞外泌体对炎症刺激下小鼠前软骨细胞ATDC5凋亡的影响。方法·采用试剂盒分离人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)外泌体,采用Western blotting检测外泌体标志蛋白肿瘤易感基...
目的·探讨脐静脉内皮细胞外泌体对炎症刺激下小鼠前软骨细胞ATDC5凋亡的影响。方法·采用试剂盒分离人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)外泌体,采用Western blotting检测外泌体标志蛋白肿瘤易感基因101(tumor susceptibility gene 101,Tsg101)、白细胞分化抗原9(cluster differentiation 9,CD9)、凋亡相关基因2互作蛋白X(apoptosis linked gene-2-interacting protein X,Alix)的表达水平。透射电镜观察外泌体形态,粒度检测鉴定外泌体大小。使用荧光显微镜观察外泌体被小鼠前软骨细胞ATDC5摄取过程和活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成情况。TUNEL染色和流式细胞术检测外泌体对白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)刺激下的ATDC5细胞凋亡的影响。Western blotting检测外泌体对于ATDC5细胞中凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、裂解的半胱天冬酶3(cleaved caspase-3,c-caspase-3)和抗氧化应激相关蛋白核因子E2相关因子2(nuclear factor E2 related factor 2,Nrf-2)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap-1)、血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化还原酶1(NADPH quinone oxidoreductase-like protein 1,NQO-1)表达水平的影响。结果·透射电镜下观察到HUVEC来源的外泌体呈椭圆形,中空,双层膜,并且阳性表达外泌体标志物CD9、Alix、Tsg101。与IL-1β刺激下的ATDC5细胞相比,外泌体促进炎症因子作用下的ATDC5细胞内ROS的生成(P=0.000)和凋亡的发生(P=0.000),Bax、c-caspase-3、Keap-1表达升高,Bcl-2、Nrf-2、HO-1、NQO-1表达降低。结论·HUVEC来源的外泌体可能通过抑制ATDC5细胞抗氧化应激的能力,促进IL-1β刺激下ATDC5细胞凋亡的发生。
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关键词
外泌体
骨关节炎
前软骨细胞
脐静脉内皮细胞
氧化应激
凋亡
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题名
脐静脉内皮细胞外泌体对炎症因子刺激下前软骨细胞凋亡的影响
被引量:
3
1
作者
杨润泽
许文宁
郑火亮
蒋盛旦
机构
上海交通大学医学院附属新华医院脊柱中心
出处
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第2期147-153,共7页
基金
国家自然科学基金面上项目(81672206)
上海市教育委员会高峰高原学科建设计划(20181809)。
文摘
目的·探讨脐静脉内皮细胞外泌体对炎症刺激下小鼠前软骨细胞ATDC5凋亡的影响。方法·采用试剂盒分离人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)外泌体,采用Western blotting检测外泌体标志蛋白肿瘤易感基因101(tumor susceptibility gene 101,Tsg101)、白细胞分化抗原9(cluster differentiation 9,CD9)、凋亡相关基因2互作蛋白X(apoptosis linked gene-2-interacting protein X,Alix)的表达水平。透射电镜观察外泌体形态,粒度检测鉴定外泌体大小。使用荧光显微镜观察外泌体被小鼠前软骨细胞ATDC5摄取过程和活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成情况。TUNEL染色和流式细胞术检测外泌体对白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)刺激下的ATDC5细胞凋亡的影响。Western blotting检测外泌体对于ATDC5细胞中凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、裂解的半胱天冬酶3(cleaved caspase-3,c-caspase-3)和抗氧化应激相关蛋白核因子E2相关因子2(nuclear factor E2 related factor 2,Nrf-2)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap-1)、血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化还原酶1(NADPH quinone oxidoreductase-like protein 1,NQO-1)表达水平的影响。结果·透射电镜下观察到HUVEC来源的外泌体呈椭圆形,中空,双层膜,并且阳性表达外泌体标志物CD9、Alix、Tsg101。与IL-1β刺激下的ATDC5细胞相比,外泌体促进炎症因子作用下的ATDC5细胞内ROS的生成(P=0.000)和凋亡的发生(P=0.000),Bax、c-caspase-3、Keap-1表达升高,Bcl-2、Nrf-2、HO-1、NQO-1表达降低。结论·HUVEC来源的外泌体可能通过抑制ATDC5细胞抗氧化应激的能力,促进IL-1β刺激下ATDC5细胞凋亡的发生。
关键词
外泌体
骨关节炎
前软骨细胞
脐静脉内皮细胞
氧化应激
凋亡
Keywords
exosome
osteoarthritis(OA)
pre-chondrogenic cell
human umbilical vein endothelial cell(HUVEC)
oxidative stress
apoptosis
分类号
R684.3 [医药卫生—骨科学]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
脐静脉内皮细胞外泌体对炎症因子刺激下前软骨细胞凋亡的影响
杨润泽
许文宁
郑火亮
蒋盛旦
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2021
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