一种新型光敏剂对牙周致病菌的体外抗菌研究

目的:研究一种新型光敏剂(ZnPC-PL)对牙周病主要致病菌牙龈卟啉菌的抑制作用,以期寻找治疗牙周炎的新手段。方法:在体外环境中分别用涂板计数法分析不同药物浓度和不同激光强度下新型光敏剂的光动力治疗对牙龈卟啉菌的抑制效果,实验设计分实验组、空白对照组和阳性对照组。结果:光动力治疗中应用光敏剂Zn-PC-PL,在浓度为10μmol/L以上、光强为6 J/cm2时具有良好的杀菌效果。结论:在一定浓度和激光强度下,Zn-PC-PL光敏剂对牙龈卟啉菌具有良好的抑制作用。

冻存骨髓基质细胞复合材料体内成骨基质的合成能力(英文)

背景:课题组以往研究显示:体外培养条件下,冻存骨髓基质细胞复苏后仍保持较高的细胞存活率、细胞增殖及成骨分化能力。上述结果仍然需要进一步在体内环境下证实。目的:观察经超低温冻存后的骨髓基质细胞和支架材料胶原膜BME-10X复合体植入裸鼠体内后Ⅰ型胶原的合成情况。方法:体外分离培养Beagle犬骨髓基质细胞,冻存12个月后复苏,体外构建骨髓基质细胞和胶原膜材料复合体。分别经矿化诱导培养液、基础培养液培养5d后,植入裸鼠体内,于术后第4周取出标本,进行大体观察、组织病理学和免疫组化分析,并应用图像分析系统对各组标本中的Ⅰ型胶原进行定量分析。以矿化诱导培养液培养的单纯胶原膜材料为对照组。结果与结论:对照组在植入胶原膜后,胶原膜边界清晰,膜边缘及内部基本没有细胞生长,Ⅰ型胶原分布很少;在未诱导矿化组,术后第4周可见,胶原膜内有细胞长入,并有细小的条索状新生胶原形成,Ⅰ型胶原分布明显增多;在诱导矿化组,植入后也可见支架材料的分解降解和更多的细胞生长,大量新生的胶原形成类骨质样组织,与前两组对比,Ⅰ型胶原分布增多有显著性意义。结果表明冻存骨髓基质细胞复苏后进行体外培养扩增与诱导分化,并在体内环境下复合胶原支架材料,仍然具有较强成骨能力。

引导组织再生术后屏障膜留置时间与牙周组织再生量的关系

目的:观察引导组织再生术(guidedtissueregeneration,GTR)后不同时期牙周组织的再生情况,以确定达到最大牙周组织再生量时屏障膜留置体内的合适时间。方法:将6只杂种狗的下颌双侧第二、三、四前磨牙制备慢性II度根分叉病变模型,一侧进行GTR治疗,另一侧只进行翻瓣术治疗,分别于术后第4,6,8周进行形态学和组织学观察。结果:GTR治疗组牙周组织再生量明显多于对照组,且GTR治疗后6周牙周组织再生量明显高于GTR术后4周(P<0.01),GTR治疗后第6周和8周之间差异无显著性意义。结论:GTR技术治疗II度根分叉病变患牙时,为达到最大牙周组织再生量所需要屏障膜的作用时间至少要6周。

引导组织再生术后龈沟液和牙槽骨中糖氨多糖的变化

目的 观察引导组织再生 (GTR)术后不同时间龈沟液和牙槽骨中糖氨多糖 (GAG)变化 ,探讨龈沟液中 GAG变化对判断牙周组织再生成熟度有否帮助。 方法 将 6只杂种犬的下颌双侧第二、三、四前磨牙制备慢性 度根分叉病变模型 ,采用自身对照。对照组行常规翻瓣术 ,实验组行 GTR治疗 ,分别于术前和术后第 4 ,6 ,8周检测龈沟液及牙槽骨中 GAG水平。 结果 GTR组术后第 4 ,6周龈沟液及牙槽骨中 GAG与基线水平比较差异有显著性。 结论 观察 GTR治疗术前后龈沟液中

实时荧光定量PCR技术检测牙周炎致病菌中16S rRNA DNA探针的制备

利用实时荧光定量PCR和细菌16S rRNA测定技术制备牙龈卟啉菌染色体探针,并进行检测,为进一步研究牙周病可疑致病菌提供方法。主要方法是:厌氧环境下培养牙龈卟啉菌,抽提细菌DNA;根据基因库已知牙龈卟啉菌16S rRNA DNA序列,设计特异性的TaqMan探针和一对引物;经实时荧光定量PCR仪进行细菌DNA样本的PCR反应获得反应曲线。结果表明,细菌DNA样本经PCR反应后,在15个循环时,开始出现扩增曲线,此后荧光逐渐增强,在26个循环后达峰值。由此可见,利用细菌16S rRNA技术制备致病菌染色体探针,经实时荧光定量PCR测定,可以对目标微生物进行准确定性和定量。

不同牙周状态下龈沟液中瘦素水平的比较

目的:检测牙周健康者、慢性龈炎和慢性牙周炎患牙龈沟液中瘦素水平,为牙周炎的早期诊断提供客观指标。方法:选择牙周健康者、慢性龈炎和慢性牙周炎患者3组,治疗前记录牙周各项临床指标,并用Whatman1号滤纸收集颊侧近远中牙周袋内GCF采用ELISA检测瘦素含量;同时收集血清进行瘦素水平的检测。结果:3组中慢性牙周炎组龈沟液中瘦素水平与牙周健康者龈沟液中瘦素水平比较有显著差异(P<0.05),慢性牙周炎组龈沟液中瘦素水平与慢性龈炎龈沟液中瘦素水平及慢性龈炎组龈沟液中瘦素水平与牙周健康者龈沟液中瘦素水平比较均无显著差异;牙周健康者、慢性龈炎和慢性牙周炎患者血液中瘦素水平比较均有显著差异(P<0.05)。血中的瘦素与临床指标PLI(P<0.01,r=0.593)、PD(P<0.05,r=0.920)、BI(P<0.05,r=0.862)、AL(P<0.05,r=0.846)均相关;龈沟液中的瘦素与临床指标PLI(P<0.01,r=0.813)、PD(P<0.05,r=0.962))、BI(P<0.05,r=0.720、AL(P<0.05,r=0.946)均相关。结论:龈沟液中瘦素水平可能是反映牙周组织状况的一项较为客观的指标。

排龈线预防牙体修复悬突的实验研究

目的 探讨使用排龈线能否使牙体Ⅴ类洞充填时产生悬突的机会减少。 方法 在杂种狗上、下颌牙的颊侧牙颈部形成部分位于龈下的牙体缺损模型 36个 ;分成两组 ,实验组用排龈线排龈后复合树脂充填 ,对照组则直接用复合树脂充填。 1,3,6个月后测定模型的龈沟液 (GCF)中天门冬氨酸转氨酶 (AST)。 结果 使用排龈线组与对照组的AST水平在 1个月时差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,3,6个月使用排龈线组GCF AST明显低于对照组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。 结论 动物实验中充填涉及龈下的牙颈部缺损时利用排龈线预防悬突产生是可行的 ,可以防止悬突对牙周组织的损害。

环孢素A联合脂多糖局部用药对大鼠牙周软、硬组织形态的影响

目的:探讨环孢素A(CsA)联合牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)局部用药对大鼠下颌第一磨牙颊侧牙龈面积及远中釉牙骨质界到牙槽脊顶距离(CEJ-ABC)的影响。方法:将40只大鼠分成8组,每组5只,各组大鼠下颌骨第一磨牙颊侧分别注射生理盐水,CsA(2.0mg.kg-1),高、中、低剂量的LPS(10.0,1.0,0.1μg)及CsA(2.0mg.kg-1)与不同剂量LPS的混合液。30d后处死大鼠,苏木精-伊红(HE)染色法处理大鼠下颌骨标本,观察大鼠下颌骨第一磨牙处牙龈组织、牙槽骨的变化。结果:CsA(2.0mg.kg-1)导致第一磨牙颊侧牙龈面积增加,远中CEJ-ABC距离变大,但与生理盐水组比较差异无统计学意义(P>0.05);高剂量的LPS(10.0μg)可以导致牙槽骨吸收,CEJ-ABC距离增加,高于生理盐水组(P<0.05);LPS(10.0μg)与CsA联合作用时对牙槽骨同样具有破坏作用,CEJ-ABC距离高于生理盐水组(P<0.05);中、低剂量LPS单独及与CsA联合应用时对牙槽骨均无明显影响,CEJ-ABC距离与生理盐水组比较均无明显差别(P>0.05);所有实验组的大鼠均未出现颊侧牙龈面积增大,与生理盐水组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:低剂量CsA(2.0mg.kg-1)局部应用于大鼠牙周组织,既不引起牙龈增生,也不引起牙槽骨的吸收;低剂量CsA对高剂量LPS(10.0μg)引起的牙槽骨吸收无明显的逆转作用。

不同牙周状况龈下菌斑中齿垢密螺旋体的分布

目的:分析慢性牙周炎、牙龈炎患者和牙周健康者龈下菌斑中齿垢密螺旋体的分布情况,探讨该微生物与不同牙周状况的关系。方法:收集12例慢性牙周炎、5例牙龈炎患者和5例牙周健康者,共70个位点的龈下菌斑,采用TaqMan 16S rRNA实时荧光定量PCR技术检测齿垢密螺旋体的分布。结果:慢性牙周炎病变位点齿垢密螺旋体检出率是86%,牙龈炎的是86%,牙周健康的是100%,3组检出率之间的差异没有统计学意义;微生物的检出量经对数转换后,3组之间及两两比较均有统计学意义。结论:TaqMan实时荧光定量PCR技术检测微生物灵敏度高,检出率高;龈下菌斑中齿垢密螺旋体与牙周状态密切相关。

应用排龈线预防牙体修复悬突的临床评价

目的:探讨在涉及龈下的牙体龋损及楔状缺损充填修复时应用排龈线可否预防悬突的形成。方法:选择牙周组织健康的门诊患者24人口腔中齐龈或涉及龈下≤1mm的唇颊侧牙颈部龋缺损共80颗牙,随机分配样本为两组,试验组应用排龈线对窝洞处的牙龈进行排龈后用复合树脂充填。对照组常规窝洞预备后直接用复合树脂充填。充填1个月检查悬突的发生情况;收集两组充填前、充填1、3及6个月测试位点的龈沟液(GCF)量、检测GCF中天门冬氨酸转氨酶(AST)水平。测量菌斑指数(PLI)、龈沟出血指数(SBI)、牙周探诊深度PD)进行统计学分析。结果:充填1个月试验组修复后悬突的发生率低于对照组,差异有显著性(P<0.01)。充填后6个月试验组与对照组的PLI、SBI、PD、GCF无统计学差异(P>0.05),试验组GCF-AST水平明显低于对照组,差异有显著性(P<0.01)。结论:排龈线对齐龈或龈下边缘的充填悬突形成的预防效果好。建议临床中充填上述龋缺损时将使用排龈线作为一项常规措施。

不同牙周状态下牙周袋内挥发性硫化物水平的比较

目的:检测牙周健康者、慢性龈炎和慢性牙周炎患牙牙周袋内挥发性硫化物水平,为牙周炎的早期诊断提供客观指标。方法:选择牙周健康者、慢性龈炎及慢性牙周炎患者3组,治疗前记录牙周各项临床指标,并用金刚牙科探针记录颊侧近远中牙周袋内挥发性硫化物(VSC)水平。结果:3组中慢性牙周炎组牙周袋内VSC水平与牙周健康组牙周袋内VSC水平及慢性龈炎组牙周袋内VSC水平比较均有显著差异(P<0.05),牙周健康组牙周袋内VSC水平与慢性龈炎组牙周袋内VSC水平比较无显著性差异(P>0.05)。VSC与临床指标PLI(P<0.01,r=0.593)、PD(P<0.01,r=0.720)、BI(P<0.01,r=0.662)、AL(P<0.01,r=0.746)均相关。结论:牙周袋内VSC可能是反映牙周组织状况的一项较为客观的指标。

引导组织再生治疗术及碱性成纤维细胞生长因子促进牙周组织再生的实验研究

目的了解引导组织再生治疗术(GTR)及碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)是否能够促进犬Ⅱ度根分叉病变牙周组织的再生。方法将六只杂种犬的下颌双侧第二、三、四前磨牙制备慢性Ⅱ度根分叉病变模型后,随机分成两组,每组三只动物。每组中一只动物一侧进行GTR治疗,另一侧只进行翻瓣术治疗;另一只双侧都进行GTR+b-FGF治疗;剩下的一只一侧进行GTR治疗,另一侧进行GTR+b-FGF治疗。分别于术后第6、8周进行形态学和组织学观察。结果与翻瓣术组对比,GTR组和GTR+b-FGF组都有明显的牙周组织再生;而GTR组和GTR+b-FGF组之间牙周组织再生的量没有明显的差别。结论GTR能够促进犬Ⅱ度根分叉病变牙周组织的再生,但单纯应用喷洒法使用b-FGF于牙周组织再生术中难以发挥其应有的疗效。

不同冲洗液联合应用去除根管玷污层的效果评价

目的比较不同冲洗液联合应用去除根管玷污层的效果。方法40颗离体单根管牙截冠后随机分为5组,采用冠向下法进行根管预备,预备中分别以不同根管冲洗液进行根管冲洗。A组:20g/L醋酸氯已定(CHX)溶液;B组:25g/L次氯酸钠(NaOCl)溶液;C组:20g/LCHX溶液+乙二胺四乙酸(EDTA)凝胶;D组:25g/LNaOCl溶液+EDTA凝胶;E组(对照组):蒸馏水。然后将牙体沿颊舌向纵劈,扫描电镜观察各组样本在根中1/3玷污层和牙本质碎屑的去除情况,统计学分析比较各组根管清洁的差异。结果A、B、C和D组与E组比较差别有统计学意义(P<0.05),B、D组对玷污层的去除和牙本质小管开放程度与A、C组比较,差别有统计学意义(P<0.05)。两两比较得出C组优于A组(P<0.05),B、D两组差别无统计学意义(P>0.05)。结论CHX、NaOCl单独或联合EDTA凝胶均可去除玷污层。NaOCl+EDTA凝胶组的冲洗效果最好,单独使用CHX清洁效果不佳,与EDTA凝胶配合使用去除玷污层的能力有提高。

环孢素A联合脂多糖对牙周膜成纤维细胞生物学活性的影响

目的探讨环孢素A(CsA)联合牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)对人牙周膜成纤维细胞(PDLFs)生物学活性的影响。方法将CsA(100 ng/mL)、LPS(100 ng/mL)分别单独及联合作用于人PDLFs,采用考马斯亮蓝染色、ELISA、Von kossa染色等方法检测其对PDLFs总蛋白量、碱性磷酸酶(ALP)、骨形成蛋白2(BMP-2)及矿化结节形成的影响。结果 CsA单独及与LPS联合应用可促进细胞总蛋白的合成,增加细胞ALP活性及BMP-2的表达,并促进细胞矿化结节的早期形成;LPS单独应用可增加细胞的ALP活性,但对细胞的总蛋白合成、BMP-2的表达及矿化结节的早期形成无明显影响。结论一定浓度的CsA促PDLFs合成、分化作用明显,CsA联合LPS在促进细胞分化方面具有一定的协同作用。

龈沟液炎性内容物及在牙周病中的临床意义

牙周病患者的龈沟液内容物及水平均可发生变化,不同的内容物的变化反映了牙周病变的类型和程度。因此检测龈沟液内容物水平的变化可对牙周炎的诊断、治疗和预后提供一定的客观依据。

矿化诱导促进冻存骨髓基质细胞在裸鼠体内形成Ⅰ型胶原的实验研究

目的观察矿化诱导培养能否促进冻存骨髓基质细胞(BMSCs)在裸鼠体内形成Ⅰ型胶原,为牙周组织工程中选择适宜的种子细胞的保存和培养条件提供参考。方法体外分离培养Beagle犬BMSCs,经冻存12个月后,在矿化诱导培养液(矿化诱导组)或基础培养液(非矿化诱导组)中形成BMSCs-胶原膜支架复合物,将矿化诱导培养液处理的单纯胶原膜支架(空白对照组)、2种BMSCs-胶原膜复合物分别植入裸鼠背部皮下组织中,术后第4周行组织病理学和免疫组织化学观察,分析各组标本中的Ⅰ型胶原形成量。结果空白对照组植入胶原膜后,新生胶原分布很少;非矿化诱导组胶原分布明显增多;矿化诱导组中见大量新生的胶原形成。免疫组织化学光密度测量显示,矿化诱导组(0.1963±0.0126)>非矿化诱导组(0.1489±0.0037)>空白对照组(0.0775±0.0058)(P<0.05)。结论矿化诱导培养能够促进冻存的BMSCs在裸鼠体内形成Ⅰ型胶原。

冻存骨髓基质细胞和胶原膜在裸鼠体内的成骨研究

目的:研究经超低温冻存后的骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)和支架材料胶原膜BME-10X复合体植入裸鼠体内的成骨情况。方法:体外分离培养Beagle犬BMSCs,冻存二代生长状况良好的BMSCs。12个月后,复苏冻存的BMSCs,并在体外构建BMSCs和0.5cm×0.5cm大小的BME-10X复合体。将胶原膜+BMSCs+矿化诱导培养液、胶原膜+BMSCs+基础培养液、单纯胶原膜+矿化诱导培养液培养5d后,植入裸鼠体内,并于术后第4、8、12周取出标本,进行大体观察和组织病理学分析。结果:单纯胶原膜+诱导培养液组在植入胶原膜后,胶原膜边界清晰,膜边缘及内部基本没有细胞生长;在胶原膜+BMSCs+基础培养液组,术后第4周可见,胶原膜内有细胞长入,并有细小的条索状新生胶原形成,随着时间的延长,支架胶原逐渐分解,新形成的条索状胶原纤维变粗大;在胶原膜+BMSCs+矿化诱导培养液组,植入后也可见支架胶原的分解和更多的细胞生长,大量新生的胶原形成类骨质样组织。结论:冻存BMSCs复苏后进行体外培养扩增与诱导分化,并在在体内环境下复合胶原支架材料,仍然具有较强成骨能力。