酿酒酵母低温耐受机制的研究进展

酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和发酵温度是影响葡萄酒产量和品质的关键性因素。低温发酵可以促进酯类、醇类、酮类、萜烯类等芳香物质的合成,提高葡萄酒质量。然而,低温发酵会延长酿酒酵母的潜伏期,降低细胞活性和发酵速率,甚至使发酵过程中止。因此,研究酿酒酵母的低温耐受机制为解决葡萄酒低温发酵这一工业难题提供了理论依据。介绍了低温对不同酿酒酵母生理特性、发酵性能、基因表达和细胞成分变化的影响,以及识别和响应低温信号的分子机制等方面的研究进展。

低温锻炼对酿酒酵母发酵特性的影响

低温锻炼技术被广泛地应用到实际活性干酵母的活化过程中,该文以普通酿酒酵母和经低温锻炼的酿酒酵母BH8为实验材料分别对葡萄汁进行发酵实验。实验结果表明,在13℃的低温发酵条件下,经过低温锻炼的酿酒酵母与对照相比发酵时间缩短2 d,发酵效率提高了7.41%;最大活菌数增加了8.33%;残糖量降低了16.28%;乙醇含量增加了4.04%;乙酸含量降低了6.70%。然而其甘油、海藻糖和琥珀酸的含量却低于对照组,这很可能是由于酿酒酵母在低温锻炼过程中已经产生了抗低温胁迫的原因。

微山湖河蟹养殖区与非河蟹养殖区细菌胞外酶的比较研究

为了研究微山湖河蟹养殖区与非河蟹养殖区水体和底泥中异养细菌胞外产酶(蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、脲酶)的差别,对这2处环境中的微生物进行了初步筛选和分离,得到25株菌,分别在含有蛋白质、脂肪、淀粉、脲的固体培养基上培养观察,并测量记录菌落和菌圈大小。结果表明,河蟹养殖区产蛋白水解酶和脂肪水解酶的细菌明显多于非河蟹养殖区,而产淀粉水解酶和脲酶的细菌数量两者相差不大。

重组腺相关病毒装载目的核酸完整性分析

目的探讨重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV)装载目的核酸完整性检测方法,并初步建立分析算法。方法消化rAAV外游离DNA片段,提取病毒基因组,设计5对搭接引物,采用正交排列方式,分别用数字PCR仪进行检测,常规条件采用EveGreen和模板4μL的20μL反应体系,数字PCR条件:95℃5 min;95℃15 s,55℃30 s,72℃90 s,45个循环。超长核酸片段增强条件采用Mix B-2000 bp和模板2μL的25μL反应体系,采用仪器附带软件定量。最小二乘法拟合分析共有的全长片段数量,进而解读目的核酸完整性分布情况。结果引物间距离不大于1200 nt的片段可得到有效扩增,经系统分析得到一系列片段长约1000 nt的有效片段拷贝数,最小二乘法拟合分析共有片段拷贝数量,估计样本中全长片段不多于1234 copies/μL,该值与测得的最大值(1443 copies/μL)之间差异有统计学意义(P<0.05),差异占比约16.9%。结论初步建立了rAAV装载目的核酸完整性的检测方法,并分析出供试品中存在一定数量的不完整目的核酸,为后续深入研究奠定了基础。

葡萄灰皮诺病毒微滴数字RT-PCR检测方法的建立

葡萄灰皮诺病毒(Grapevine Pinot gris virus,GPGV)最早于2012年由意大利研究人员利用高通量测序技术发现(Giampetruzzi et al.,2012),该病毒可引起葡萄叶片褪绿、斑驳、皱缩、变形等症状,导致葡萄植株发育不良、成熟期延迟、产量降低、果实腐烂,还可与其它病毒共同作用产生复合负面效应。目前,葡萄灰皮诺病毒病尚缺乏有效防治药剂,为防控该病毒病的发生和传播,本研究拟设计特异性引物和探针,建立GPGV微滴数字RT-PCR(droplet digital reverse transcription-polymerase chain reaction,ddRTPCR)检测方法,以期提高GPGV截获率,为及时防控葡萄灰皮诺病毒病的发生和蔓延提供技术支持。