FCM和细胞遗传学检查在恶性淋巴瘤诊断中的意义

目的 评价流式细胞术联合细胞遗传学检查在恶性淋巴瘤确诊中意义.方法 笔者医院2009～ 2012年29例门诊及住院疑似淋巴瘤患者淋巴组织标本,制备单个核悬浮细胞,分别行流式细胞术检测细胞表面抗原的表达和R-显带检测细胞遗传学细胞核型.结果 29例患者中8例病理诊断为反应性增生或慢性炎,通过流式细胞仪和细胞遗传学诊断恶性淋巴瘤,12例患者发现核型异常,流式细胞术细胞表面抗原的检测可区分B淋系还是T淋系,区分不同亚型有指导意义,12例患者检测到异常核型,其中4例淋巴结病理提示淋巴结炎或者增生但核型发现异常染色体改变,肯定了为恶性改变,并发现有与亚型相关的特异性核型改变t（11;14）,t（14;18）,9例患者为复杂核型,提示预后不良.结论 淋巴组织病理学检查是诊断恶性淋巴瘤的基础,结合流式细胞术以及染色体检查可以提高恶性淋巴瘤的诊断率,并对淋巴瘤亚型分型以及预后判断具有指导性意义.

干扰CXCR4抑制急性单核细胞白血病细胞株SHI-1黏附、侵袭及成瘤能力

目的:研究干扰人趋化因子受体4(CXCR4)基因表达对白血病细胞株SHI-1细胞体外增殖、黏附、侵袭能力及裸鼠皮下成瘤能力的影响。方法:通过构建干扰CXCR4表达的慢病毒载体,重组病毒颗粒感染SHI-1细胞,干扰SHI-1细胞CXCR4表达,定量PCR检测CXCR4、MMP-2和MMP-9表达;流式细胞术检测SHI-1细胞膜表面CXCR4蛋白表达;MTT法检测细胞体外增殖能力;将SHI-1等与骨髓基质细胞共培养,检测SHI-1细胞黏附能力及跨Matrigel基质胶迁移能力;将白血病细胞SHI-1接种于裸鼠皮下并观察其在裸鼠皮下生长情况。结果:干扰CXCR4表达的慢病毒颗粒感染SHI-1细胞后,SHI-1/CXCR4i细胞的CXCR4 mRNA表达较感染阴性对照病毒的SHI-1/NC细胞下调76%,SHI-1/CXCR4i细胞膜表面CXCR4表达明显下调;SHI-1/CXCR4i细胞MMP-2、MMP-9表达分别也分别下降63%和62%;SHI-1/CXCR4i细胞体外增殖能力无显著改变,但其黏附能力及跨Matrigel基质胶迁移能力明显下降;SHI-1/CXCR4i细胞不能在裸鼠皮下形成肿瘤,而SHI-1及SHI-1/NC细胞均能在裸鼠皮下形成肿瘤,且肿瘤体积无显著差异。结论:干扰CXCR4表达可使SHI-1的黏附、移行能力显著下降,并能完全抑制SHI-1在裸鼠皮下形成肿瘤,CXCR4可作为白血病治疗的一个靶点。

TCF3-PBX1融合基因阳性成人急性淋巴细胞白血病的临床和实验研究

目的探讨TCF3-PBX1融合基因阳性的成人急性淋巴细胞白血病（ALL）的形态学、免疫学、细胞遗传学和临床特点。方法采用R显带技术进行常规核型（CC）分析，间期荧光原位杂交（FISH）技术和RT—PCR技术检测TCF3-PBX1融合基因，流式细胞术（FCM）检测细胞免疫表型；分析19例TCF3-PBX1融合基因阳性成人ALL的临床和实验率特征并进行长期随访。结果本组19例TCF3-PBX1融合基因阳性ALL占同期成人ALL的3．13％；其中L1 12例，L2 7例。细胞遗传学检测7例为t（1；19）平衡易位，10例为der（19）t（1；19）不平衡易位，2例为正常核型。9例经RT—PCR检测的病例均有TCF3-PBX1融合基因转录本，17例经间期FISH检测TCF3-PBX1融合基因均为阳性。18例行FCM检测的患者中16例为B淋系抗原表达，2例为T淋系抗原表达。17例患者有不同程度的肝、脾、淋巴结等髓外浸润。本组患者经1个疗程诱导化疗后17例获得完全缓解（CR），CR率为94．7％，中位无复发生存时间为3．2个月，中位总生存期为7．2个月。结论TCF3-PBX1融合基因阳性成人ALL有着独特的临床和实验室特点；治疗缓解率高，但短期内易复发，总生存期短，应该采取更积极的治疗以改善预后；间期双色FISH联合CC及RT—PCR可以提高TCF3-PBX1融合基因的检出率。

TCF3-PBX1阳性急性淋巴细胞白血病相关基因的筛选及生物信息学分析

目的研究比较TCF3-PBX1阳性和阴性急性淋巴细胞白血病基因表达的差异,并寻找在特定类型白血病的发生、发展过程中起重要作用的基因,为临床诊疗提供新思路。方法在公共基因芯片数据库GEO中下载GSE11877数据集,利用R编程语言,应用贝叶斯检验和倍比法(fold change)筛选差异表达基因(校正P<0.05,并且log2(fold change)>2)。利用DAVID数据库进行生物学过程功能富集分析。结果共获得207个数据集,其中TCF3-PBX1阳性组23个,阴性组184个,最终汇总获取2 890个基因的表达水平,其中27个符合条件的差异基因被选出,这些基因的功能大致分为细胞骨架结构、细胞信号转导、转录调控、细胞黏附、细胞凋亡等。功能富集分析显示BANK1、GAB1、ZAP70等8个基因在TCF3-PBX1阳性白血病发生、发展过程中可能起到关键作用。结论利用生物信息学方法能有效分析基因芯片数据并获取生物内在信息,TCF3-PBX1阳性白血病的发生是由于多种基因表达改变所致,为确定其早期诊断标志与新治疗靶位提供了新的思路。

主要ABO血型不合NST后纯红细胞再生障碍性贫血2例报告及文献复习

目的探讨主要ABO血型不合非清髓性异基因外周血干细胞移植(NST)后纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA)发生的机制及治疗对策。方法对1例非霍奇金淋巴瘤(NHL)和1例慢性粒细胞性白血病(CML)患者行NST治疗,2例患者血型均为O型,供体为HLA完全相合的同胞(血型均为A型)。结果2例患者NST获得成功,但分别于移植后2、3个月出现PRCA,经强的松、雄激素、大剂量丙种球蛋白、皮下注射重组人促红细胞生成素(EPO)治疗,PRCA均无明显的改善。2例患者停用环孢菌素A(CsA)后均发生慢性移植物抗宿主病(cGVHD),经普乐可复(FK506)免疫抑制治疗后,cGVHD控制,同时抗A凝集素很快下降至0,网织红细胞、血红蛋白上升。结论EPO、大剂量丙球对该组病例治疗无效。NST后一旦发生PRCA,应尽早停用CsA,cGVHD控制与PRCA的恢复相关。

伴有9p异常的急性B淋巴细胞白血病患者PAX5基因重排及缺失的研究

目的探讨PAX5基因重排或缺失在伴有9p异常[abnormalities at chromosome 9p，abn（9p）]成人急性B淋巴细胞白血病（B—lineage acute lymphoblastic leukemia，B-ALL）中的发生情况及临床意义。方法选取横跨PAX5基因的RP11-344823和RP11—652D9克隆，常规抽提DNA，采用缺口平移法标记荧光素，应用荧光原位杂交技术对50例伴有abn（9p）异常的BALL患者进行PAX5基因重排或缺失的筛选，并分析其临床及实验室特征。结果50例伴有abn（9p）异常的B-ALL患者中，PAX5完全缺失的患者有23例（46％），PAX5部分缺失的患者有2例（4％），PAX5基因易位1例（2%），总的异常率为52％（26／50）。PAX5重排或缺失组患者与PAX5正常组患者的主要临床特征的差异无统计学意义。结论abn（9p）的B-ALL患者中PAX5缺失或重排的发生率为52％，PAX5异常患者（26例）与PAX5检测正常患者（24例）之间生物学特征无显著差异。

大剂量甲氨蝶呤在成人急性淋巴细胞白血病中的应用及研究进展

急性淋巴细胞白血病是一种高度异质性疾病。甲氨蝶呤(MTX)是治疗儿童及成人急性淋巴细胞白血病的常用化疗药物,大剂量甲氨蝶呤逐渐代替头颅放疗成为预防中枢神经系统复发及治疗的主要措施,大大提高了患者的无事件生存率和总生存率。大剂量MTX的不良反应主要有肝、肾功能损害,骨髓抑制,口腔黏膜炎等,亚叶酸钙作为大剂量MTX特异性解毒药物可以对抗其细胞毒效应。

来那度胺在弥漫大B细胞淋巴瘤治疗中的研究进展

来那度胺作为第二代免疫调节剂,具有免疫调节、抗肿瘤、抗血管生成、调节肿瘤微环境等多重作用,其疗效优于沙利度胺,而神经病变、嗜睡、便秘等不良反应明显减轻,现已被美国食品和药物管理局批准用于治疗多发性骨髓瘤和骨髓增生异常综合征。近年来越来越多的临床研究表明来那度胺对于弥漫大B细胞淋巴瘤也有效,其单药应用或联合化疗对初治及复发难治性弥漫大B细胞亦显示出一定的疗效。

恶性淋巴瘤继发第二肿瘤的研究进展

恶性淋巴瘤(ML)是起源于淋巴结及淋巴组织的免疫系统的恶性肿瘤,其发生大多数与免疫应答过程中淋巴细胞增殖分化产生的某种免疫细胞恶变有关。随着疾病分类的细化,治疗策略和方案的规范化,恶性淋巴瘤的治疗效果显著提高,生存周期明显延长,并发第二肿瘤的概率逐渐增加。其中,白血病是最常见的第二肿瘤,乳腺癌在继发实体瘤中占据主要位置。放射线、化疗药物、癌基因的存在及激活、免疫紊乱是其常见的危险因素。