维吾尔族肺腺癌患者的EGFR基因突变分析

背景与目的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是一种跨细胞膜糖蛋白,属于受体型酪氨酸激酶家族。以吉非替尼为代表的EGFR酪氨酸激酶抑制剂对于EGFR突变的肺癌患者显示出良好的治疗效果,然而EGFR的突变率在不同民族和不同种族的人群中表现出较大差异。本研究旨在分析维吾尔族中肺腺癌患者肿瘤组织的EGFR基因突变情况,同时比较维吾尔族与汉族肺腺癌患者肿瘤组织EGFR基因突变率的差异性。方法收集临床肺腺癌患者石蜡包埋组织标本138例,包括68例维吾尔族和70例汉族肺腺癌的样本,采用ARMS(amplification refractory mutation system,ARMS)PCR扩增方法检测EGFR基因外显子18、19、20及21的突变,χ2分析对比维吾尔族和汉族肺腺癌EGFR基因突变差异。结果 138例肺腺癌患者中有43例EGFR基因突变,总突变率为31.2%,其中维吾尔族突变11例,突变率为16.2%,汉族突变32例,突变率为45.7%,维吾尔族肺腺癌EGFR突变率与汉族肺腺癌EGFR突变率比较有明显差异(P<0.001),突变以外显子19-del和L858R为主要突变点。结论维吾尔族中肺腺癌EGFR基因突变率为16.2%,汉族中EGFR基因突变率为45.7%,维吾尔族肺腺癌EGFR突变率明显低于我国汉族EGFR基因突变。

维生素D及其检测与腺癌

维生素D(VitD)是人体必需的重要物质,其经典生理作用为参与钙磷代谢,维持骨骼代谢平衡。近年来,流行病学调查研究表明,VitD水平与多种腺癌的患病率相关,补充VitD后可降低腺癌的发生和骨转移的发生率。针对乳腺、前列腺、甲状腺等腺癌的研究也发现,VitD通过与其受体结合后,作用于下游靶基因,产生一系列与肿瘤发生、发展相关的生物学效应,预示其在临床肿瘤检验中具有重要意义。

25-羟基维生素D_3人工完全抗原的合成与鉴定

目的:合成25-羟基维生素D3人工完全抗原,并制备抗25-羟基维生素D3的特异性抗体。方法:将25-羟基维生素D3进行化学修饰加入羧基活性基团,合成具有半抗原结构特征的25-羟基维生素D3-半琥珀酸酯。采用碳二亚胺法,将25-羟基维生素D3-半琥珀酸酯,分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,合成人工完全抗原25-羟基维生素D3-半琥珀酸酯-BSA和25-羟基维生素D3-半琥珀酸酯-OVA。通过紫外吸收光谱,SDS-PAGE和MALDI-TOF进行偶联鉴定。用25-羟基维生素D3-半琥珀酸酯-BSA免疫小鼠,获得抗25-羟基维生素D3抗体免疫血清。结果:25-羟基维生素D3-半琥珀酸酯与BSA的偶联比为(12±0.16)∶1,免疫小鼠后获得高效价(效价为6.25×10-4)的抗体,且标准品浓度在37.5～600 ng/mL范围具有显著的竞争性线性关系,检测的灵敏度为37.5 ng/mL。结论:成功合成了25-羟基维生素D3人工完全抗原,制备出25-羟基维生素D3的抗体且其线性关系显著,灵敏度较高,为进一步研制检测25-羟基维生素D3的试剂盒奠定了基础。

丹参合理灌溉研究

为了研究灌溉对丹参的产量和质量的影响,采用田间管灌试验法,对不同土壤含水量下的丹参产量及有效成分含量进行比较研究。结果表明,土壤相对湿度小于30%(特别重度干旱)时,脂溶性成分丹参酮ⅡA、丹参酮Ⅰ和隐丹参酮含量均最高,但是丹参产量低。适度灌溉后,产量大幅提高,有效成分含量符合药典要求。土壤含水量过多时,各有效成分含量均最低。综合丹参药用价值和经济效益,采收前期土壤相对湿度小于30%(特别重度干旱)时,应适度灌溉,可以达到不减产甚至增产的效果。本研究为丹参采收前期土壤水分管理提供了理论依据。

性状异常丹参的利用价值研究

本文研究性状异常丹参是否具有利用价值。采用HPLC法,Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.026%磷酸溶液梯度洗脱,检测波长为270、286 nm,流速为1.0 mL·min-1,测定各样品中活性成分含量。结果表明,患病、变色等性状异常的丹参仍含有迷迭香酸、丹酚酸B、丹参酮ⅡA、丹参酮Ⅰ及隐丹参酮等活性成分,部分活性成分含量甚至比正常丹参高数倍,可以作为工业化提取迷迭香酸、丹参酮ⅡA、丹酚酸B等的原材料。

11—12月桃树生产管理技术

总结11—12月桃树生产管理技术,包括土壤管理、洁干清园、休眠期修剪、病虫害防治等方面内容,以供参考。

知而治之,深耕精准医疗创新惠民

公司自成立伊始,就秉承“知而治之艾德相伴”的经营宗旨,坚持创新、恪守合规,主动遵守、拥抱法规,专注于科技惠民的技术创新,为肿瘤患者提供合规、高品质的诊断产品和服务。凭借多年积淀的自主研发实力、领先获批产品、强大销售渠道以及国际化的品牌形象等优势,公司牢牢把握肿瘤精准医疗伴随诊断市场发展的契机,以临床需求、患者受益为导向,持续研发高投入,完善销售渠道建设,并通过持续强化内控,提升规范运作水平等措施,促进公司主营业务持续、稳定、健康发展,为实现“让肿瘤患者从精准医疗中真正获益”的企业愿景而努力。

桃树6月份生产管理实用技术

从肥水管理、修剪、病虫害防治、及时收获等方面介绍了桃树6月生产管理实用技术,以期为种植户提供参考。

特异引物双扩增即时PCR与传统测序法检测肠癌、肺癌患者K-ras基因突变的比较

目的 以特异引物双扩增即时PCR技术K-ras检测试剂盒（下称ADx-K-ras即时PCR试剂盒）和Sanger DNA测序法同时检测结直肠癌和肺癌患者K-ras基因,以了解K-ras基因突变频率和突变类型,比较ADx-K-ras即时PCR试剂盒和Sanger DNA测序法用于肿瘤K-ras基因体细胞突变检测的临床价值.方法 收集临床肿瘤病理石蜡切片样品827例,其中肠癌样品583例,肺癌样品244例,提取DNA后,对K-ras基因第12和13密码子进行PCR扩增后,使用ADx-K-ras即时PCR试剂盒进行检测,与此同时,将PCR扩增后的产物进行Sanger DNA测序.两种方法对K-ras基因第12和13密码子的检测结果进一步进行各个突变类型的数目和突变率的统计对比.结果 ADx-K-ras即时PCR试剂盒对827例样品检测都得到了明确的结果,检测成功率为100%,Sanger DNA测序成功检测了677例,成功率为81.9%.583例肠癌样品中ADx-K-ras即时PCR试剂盒检测出突变192例,突变检出率为32.9%,Sanger DNA测序成功的样品533例,检出突变160例,突变检出率为30.0%.244例肺癌样品中ADx-K-ras即时PCR试剂盒检出突变26例,突变检出率为10.7%,Sanger DNA测序成功的样品144例,检出突变12例,突变检出率为8.3%.肠癌中第12密码子第2位的GGT→GAT最常见,占全部突变的35.1%（66/188）,其次是第13密码子第2位的GGC→GAC,26.6%（50/188）,第12密码子第2位的GGT→GTT,18.6%（35/188）,第12密码子第1位的GGT→GCT最少见,1.6%（3/188）.肺癌中第12密码子第1位的GGT→GTT最常见,占全部突变的40.9%（9/22）,同样第12密码子第1位的GGT→GCT最少见,占全部突变的4.5%（1/22）.结论 肠癌中K-ras突变率明显高于肺癌.对于甲醛固定石蜡包埋样品而言,ADx-K-ras即时PCR试剂盒对样品的DNA质量的耐受性较好,检测成功率高于Sanger DNA测序,可替代Sanger DNA测序法成为临床上对肿瘤K-ras基因体细胞突变检测的实用方法.

新型环状引物荧光定量PCR检测乳腺癌组织HER2基因mRNA表达方法的建立

目的研究建立一种基于实时荧光定量PCR技术和新型环状引物的简捷、准确、廉价、易于标准化检测乳腺癌组织人表皮生长因子受体2（HER2）基因mRNA表达水平的方法，为临床上肿瘤个性化分子靶向药物治疗提供用药指导。方法设计HER2和内参基因的新型特异性环状引物，通过Excel在乳腺癌组织标本中随机抽取5份标本检测候选内参基因的表达，同时用geNorm、NormFinder和BestKeeper软件筛选和评估乳腺癌组织中稳定表达的内参基因，设置Mg“浓度和引物浓度梯度对PCR体系进行优化，建立乳腺癌HER2基因mRNA表达水平的新型环状引物EvaGreen染料实时荧光定量逆转录（FQRT）一PCR检测方法（以下简称“自建FQRT。PCR”法），并对其灵敏度、特异性、稳定性进行评价；同时用自建FQRT—PCR法与免疫组织化学（IHC）法平行检测2008至2012年厦门大学附属中山医院普外科收集的55份乳腺癌组织和其中32份同一患者匹配的正常组织（距癌组织1〉5cm）中HER2基因的表达水平，并评价自建FQRT—PCR法对乳腺癌的诊断效能。结果自建FQRT—PCR法对HER2基因和核糖体蛋白L37a（RPL37A）基因的最低检测限均为10^6拷贝／μl，线性范围均为10。～10。拷贝／pJ（r=0．997）；HER2和RPL37A基因的高、低浓度标准品（10^6拷贝／μl和10^1拷贝／μl）批内变异系数（CV）分别为（5．93±0．57）％和（5．11±0．59）％、（2．49±0．81）％和（2．984-0．97）％；批间CV为（5．76±0．58）％和（7．71±0．61）％、（3．75±0．76）％和（4．40±0．96）％。FQRT—PCR法与IHC法平行检测87份乳腺癌组织标本HER2基因表达水平，FQRT—PCR法的敏感度为96．36％（53／55），特异度为78．13％（25／32），阳性预测值为88．33％（53／60），阴性预测值为92．59％（25／27），与IHC检测结果总符合率为89．66％（78／87）。且与IHC法具有较高的一致性（Kappa=0．770，P〉0．05）。结论成功建立了FQRT—PCR检测乳腺癌HER2基因mRNA表达水平的方法，该方法敏感度高、特异度好且快速、价廉，适合临床检验实验室进行肿瘤标本的HER2基因表达检测。