橄榄油对新生期双酚A暴露后青春期雄性小鼠生殖毒性的拮抗作用

目的研究橄榄油对新生期双酚A(bisphenol A,BPA)暴露后青春期雄性小鼠生殖毒性的拮抗作用。方法将32只清洁级新生ICR雄性小鼠随机分为4组,分别为对照(玉米油)组、橄榄油组、BPA(100μg/kg,玉米油稀释,前期实验中能明显引起精母细胞减数分裂阻滞)组、橄榄油+BPA(100μg/kg)组,每组8只。自出生第一天(PND 1)至PND 21(断乳),仔鼠每天进行颈背部皮下注射染毒,染毒容量为4μl/g,每天1次,连续染毒至断乳(PND 21)。PND 30,测定睾丸曲细精管直径、生精上皮厚度、管腔直径以及睾丸组织中Boule mRNA和蛋白的表达水平。结果与对照组相比,BPA组小鼠睾丸曲细精管直径和生精上皮厚度均显著下降,曲细精管管腔直径显著上升,差异均有统计学意义(P<0.05);虽然橄榄油+BPA组与对照组相比仔鼠曲细精管直径和生精上皮厚度也有明显下降(P<0.05),但与BPA组相比,曲细精管直径和生精上皮厚度均显著上升(P<0.05),曲细精管管腔直径显著下降(P<0.05)。与对照组相比,BPA组小鼠睾丸组织中Boule蛋白的表达下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。橄榄油+BPA组小鼠睾丸组织中Boule蛋白的表达水平高于BPA组,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,BPA组和橄榄油+BPA组小鼠睾丸组织中Boule mRNA的表达水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。但橄榄油+BPA组小鼠睾丸组织中Boule mRNA的表达水平高于BPA组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论橄榄油对BPA所致雄性小鼠生殖毒性及Boule表达下降有一定的拮抗作用。

新生期双酚A染毒对小鼠睾丸Boule基因表达的长期影响

目的探讨新生小鼠双酚A染毒对小鼠睾丸结构及Boule基因表达的长期影响及机制。方法将12只清洁级妊娠ICR母鼠,待分娩后随机分为空白对照组、阴性对照组(玉米油)和双酚A(100μg/kg)组。仔鼠从出生第1天开始按4μL/g BW颈背部皮下注射药物,直到出生第21天停止注射,出生第35和70天处死取材。苏木精-伊红染色观察小鼠睾丸组织形态学变化,采用RT-PCR法测定睾丸Boule mRNA表达量变化,免疫荧光和Western blot法检测睾丸内Boule蛋白的表达水平。结果与空白对照组、阴性对照组相比,出生第35和70天的双酚A组睾丸曲细精管直径与生精上皮厚度显著减小,管腔显著增大(P<0.05),睾丸中Boule mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论新生期双酚A染毒可通过降低睾丸组织内Boule mRNA和蛋白质的表达水平进而影响睾丸发育。

新生期邻苯二甲酸二丁酯染毒对小鼠睾丸结构及精子发生调控基因Boule表达的影响

目的研究新生小鼠暴露于邻苯二甲酸二丁酯(Dibutyl phthalate,DBP)对雄性小鼠睾丸组织结构的损伤作用以及对小鼠精子发生的影响。方法怀孕ICR母鼠分娩后,将新生小鼠随机分为对照组和DBP组,每组12只。新生仔鼠从第1天开始每天颈背部皮下注射给药(DBP 100 mg/kg·bw)或溶剂(玉米油),直至出生第35天终止给药,取6只小鼠分离其睾丸组织,剩余6只继续饲养至70 d后分离其睾丸组织及附睾。检测附睾尾精子数量及活率并通过苏木素-伊红(HE)染色法观察小鼠睾丸组织结构的变化情况,Western blot和RT-PCR检测睾丸中Boule蛋白和Boule mRNA表达量的变化情况。结果与对照组相比,出生第70天的DBP组精子数量下降,精子活率降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,第35天和第70天的DBP组睾丸生精小管直径和生精上皮厚度降低且生精小管管腔直径明显增大,差异具有统计学意义(P<0.05);第35天和第70天的DBP组睾丸中Boule基因的表达产物mRNA和蛋白水平下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论新生期暴露于DBP会损伤小鼠睾丸组织结构,抑制睾丸组织内Boule基因的表达,进而影响精子发生。