血浆生物素酶活性测定及其临床应用

目的建立一种快速、稳定、可靠的血浆生物素酶（BTD）活性定量检测方法及其生物参考期间,为临床诊断BTD缺乏症提供重要依据。方法以人工合成生物素-4-氨基苯甲酸钠为底物,紫外分光光度计546nm波长比色法测定血浆BTD活性,进行精密度、准确度、线性评估,建立正常生物参考期间,并对16例多种羧化酶缺乏症患儿进行血浆BTD活性测定。结果血浆BTD测定方法的批内及批间变异系数分别为3.9%和6.5%,低、中、高浓度样本回收率分别是90.3%、89.5%、92.6%。139例健康儿童血浆BTD活性平均为（10.52±2.05）nmol/（m L·min）[5.19~14.09 nmol/（m L·min）]。15例临床及HLCS基因诊断明确的全羧化酶合成酶缺乏症患儿血浆BTD活性均正常,平均为（9.59±1.94）nmol/（m L·min）[5.09~13.32 nmol/（m L·min）],与健康儿童比较差异无统计学意义（P〉0.05）;1例临床及BTD基因诊断明确的BTD缺乏症患儿BDT活性为0.45 nmol/（m L·min）,其母亲和弟弟分别为已知致病突变c.235C〉T和c.1493int T携带者,其BTD活性分别为4.3 nmol/（m L·min）及5.2 nmol/（m L·min）。结论人工底物比色法测定血浆BTD活性是一种标本用量少、快速、稳定、准确度和特异性均较高的定量检测方法,是BTD缺乏症诊断和分型的重要依据。

先天性类脂质性肾上腺皮质增生症临床特点及StAR基因突变分析

该文回顾性分析2例先天性类脂质性肾上腺皮质增生症(LCAH)患儿的临床表现、类固醇激素谱及影像学检查结果,采用DNA直接测序法及限制性片段长度多态性(RFLP)技术对类固醇生成急性调节蛋白(St AR)基因突变进行分析。2例患儿均为46,XX女性,确诊年龄分别为4个月及2岁4个月。婴儿早期出现皮肤色素沉着、生长迟缓、低钠血症等肾上腺皮质功能低下表现,血ACTH显著增高,皮质醇正常或降低,各类雄性激素均未见增高。肾上腺超声提示双侧肾上腺增大或正常,经氢化可的松及9α-氟氢可的松替代治疗后生长发育正常。St AR基因突变分析显示患儿1为p.Q258X纯合已知无义突变;患儿2为p.E123K/IVS4+2T>A复合杂合突变,且为新突变,其父母分别为新突变IVS4+2T>A及p.E123K的携带者。保守性分析及Poly Phen-2软件预测提示p.E123K为致病性突变。RFLP分析显示患儿2及其父亲的PCR扩增产物经酶切后同时出现670、423、247?bp?3条条带,而其母亲及50例正常对照仅出现423和247bp两条条带,提示IVS4+2T>A突变改变氨基酸酶切位点。对于婴儿早期发生的肾上腺皮质功能低下的女性表型患儿应警惕LCAH,类固醇激素谱、核型分析及肾上腺超声有助诊断,确诊依赖St AR基因突变分析。

吃秋刀鱼（外一首）

没钱买烧酒喝，只好嚼着油煎秋刀鱼，抬头看灯笼发出孩子气般的微光笼罩周遭。心情的野兽跟随两只白色蝴蝶双飞在人造卫星身旁，瞥一眼金属质感。两只喜鹊站在枝头颤抖，给春天惊吓到，扑哧地惊慌飞走。几片暧昧的羽毛飘落，

球形细胞脑白质营养不良的临床特点及基因突变分析

目的探讨球形细胞脑白质营养不良（Krabbe病）患儿的临床、影像学和酶学特点及GALC基因突变特征。方法采用荧光底物法检测外周血白细胞β-半乳糖脑苷脂酶（GALC）活性,回顾分析2010年6月至2012年12月广州市妇女儿童医疗中心来自不同家系的3例Krabbe病患儿的临床、影像学特点。应用RT-PCR及直接测序法进行GALC基因突变分析。结果 3例Krabbe病患儿,其中男2例,女1例,年龄3个月至40个月,临床分型婴儿型1例,晚发婴儿型2例。因＂哭闹、抽搐或精神运动发育倒退等＂就诊,头颅MRI提示双侧内囊后肢或脑白质对称性异常信号影,磁共振波普成像（MRS）提示N-乙酰天门冬氨酸/肌酐（NAA/Cr）比值下降,胆碱/肌酐（Cho/Cr）比值升高。外周血白细胞GALC酶活性0～0.2 nmol/（mg·17 h）[正常参考范围18～75 nmol/（mg·17 h）]。GALC基因突变分析发现2个已知致病突变p.S68F、p.R531H,3个新错义突变p.D46Y、p.G59S、p.P154H。随访18个月,死亡2例,病情进行性加重1例。结论 Krabbe病患儿主要临床表现为激惹、抽搐、精神运动发育迟缓或倒退。起病越早,进展越快。头颅MRI表现双侧对称性脑白质或内囊后肢异常信号应高度怀疑Krabbe病,白细胞GALC酶活性测定及GALC基因突变分析有助确诊。

黏多糖贮积症Ⅵ型13例临床特征及芳香基硫酸酯酶B基因突变分析

目的 探讨黏多糖贮积症（MPS）Ⅵ型患儿的临床特征、酶学特点及芳香基硫酸酯酶B（ARSB）基因突变特点.方法 回顾性分析2009至2013年广州市妇女儿童医疗中心经外周血白细胞ARSB酶活性测定确诊的13例MPSⅥ型患儿的临床特征、影像学特征、尿黏多糖（GAG）及外周血白细胞ARSB酶活性测定结果,并应用PCR及直接测序法分析ARSB基因突变特点.结果 13例MPSⅥ型患儿,男6例,女7例,诊断年龄（3.9±2.2）岁,主要表现为面容粗陋、矮小、骨骼畸形、角膜浑浊、肝脾肿大等,但智力正常,临床表型均为重型.骨骼X线片示黏多糖病样改变,如椎体前缘“鸟嘴样”改变、脊柱弯曲、肋骨呈“带状”等,其中例2患儿头颅MRI提示颈髓受压及放射冠、侧脑室和胼胝体多发囊性变.尿GAG（307.10±112.14） mg/L（正常参考值＜70 mg/L）、尿GAG/Cr（722.28±245.68） μg/mg,均高于正常参考值.ARSB酶活性荧光法（13.29±6.22） nmol/（mg·h）[正常参考值（47～169） nmol/（mg·h）],比色法（0.24±0.18） U/g[正常参考值（1.01～11.47） U/g].ARSB基因突变分析共检测出11种突变,已知致病突变7种,包括p.L72R、p.G167R、p.G303E、p.F399L、p.T442M、p.Y255X和p.R327X;新突变4种,包括p.Y175D、p.S403X、p.S464X及大片段缺失incl.ex.2、3.c.1197C ＞G（p.F399L）检出率为31％.结论 重型MPSⅥ型患儿起病早,病情进展迅速.骨骼X线及尿GAG测定有助于诊断,确诊依赖ARSB酶活性测定.ARSB基因分析共发现4种新突变,c.1197C＞ G（p.F399L）是本研究的突变热点.

VDR基因新发突变致维生素D依赖性佝偻病Ⅱ型并文献复习

目的探讨维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)基因突变致维生素D依赖性佝偻病Ⅱ型患儿的临床表现、治疗方法及基因突变特点。方法回顾分析一例维生素D依赖性佝偻病Ⅱ型患儿的临床表现及诊疗经过,提取患儿及父母外周血DNA进行VDR基因分析;并复习相关文献总结该病患儿的临床及基因突变特点。结果患儿,女,1岁8月龄,因"脱发、双下肢弯曲"就诊,生化检查提示低血钙、低血磷,碱性磷酸酶和甲状旁腺激素升高,骨骼X线提示佝偻病活动期表现。VDR基因分析发现2号内含子存在c.146+1G>C纯合新发剪接突变,父母为该突变的携带者,进一步通过RT-PCR证实该突变在VDR基因转录为RNA时导致2号内含子融合到2号和3号外显子之间。给予大剂量钙剂口服治疗27个月,其临床症状、生化指标、骨骼X线明显改善,但毛发无法再生。目前文献共报道126例该病患儿,临床均有佝偻病表现,其中102例有脱发,大剂量钙剂口服治疗有效30例;共检出71种基因突变,其中错义突变48种、无义突变10种、剪接突变5种、缺失突变5种、插入突变2种和重复突变1种。结论维生素D依赖性佝偻病Ⅱ型的确诊依赖临床表现、生化检查及VDR基因分析,治疗上可尝试口服大剂量钙剂。VDR基因c.146+1G>C剪接突变为新发致病突变。

HSD3B2基因p.E25X新纯合突变致失盐型3β-羟类固醇脱氢酶缺乏症一例及文献复习

目的 总结一例失盐型3β-羟类固醇脱氢酶（3βHSD）缺乏症患儿的临床特点及HSD3B2基因突变结果,并结合文献分析,以提高临床医生对该病的认识.方法 2013年8月广州市妇女儿童医疗中心采用PCR及DNA直接测序法对1例13岁女性失盐型先天性肾上腺皮质增生症（CAH）伴反复卵巢囊肿患儿进行HSD3 B2基因分析,回顾患儿临床资料,并进行文献复习.结果 13岁女孩,新生儿期因失盐及轻度阴蒂肥大诊断为CAH,并予糖皮质激素替代治疗.9岁乳房发育,12岁月经初潮,初潮后曾因反复卵巢囊肿先后行腹腔镜手术及卵巢囊肿穿刺术,最大囊肿90 mm ×80 mm×80 mm.身高165 cm,体重55 kg,皮肤黝黑,氢化可的松替代治疗中血浆ACTH 17.10 pmol/L（参考值0 ～ 10.12 pmol/L）,血清睾酮1.31 nmol/L（参考值＜0.7 nmol/L）,硫酸脱氢表雄酮13.30μmol/L（参考值0.95 ～ 11.67 μmol/L）,皮质醇720 nmol/L（参考值130 ～ 772.8 nmol/L）,雄烯二酮、孕酮及17-羟孕酮正常,卵泡期雌二醇461 pmol/L,卵泡刺激素3.04 IU/L,黄体生成素8.52 IU/L.盆腔超声显示右侧附件58 mm×50 mm×35 mm卵巢囊肿,左侧卵巢正常及中期子宫内膜.HSD3B2基因分析显示2号外显子存在新纯合无义突变c.73G＞ T（p.E25X）,母亲为该突变携带者,生物学父亲未见异常.结论 女性经典型3βHSD缺乏症的临床特点为早期起病的失盐型CAH伴轻微男性化,青春期可出现月经紊乱及卵巢囊肿.基因型p.E25X新突变与经典失盐型3βHSD缺乏症有关.

青少年型Sandhoff病一例临床特点及基因分析

目的 探讨青少年型Sandhoff病的临床及氨基己糖苷酶β-亚单位基因（HEXB）突变特点.方法 回顾性分析2012年5月广州市妇女儿童医疗中心内分泌代谢科确诊的1例青少年型Sandhoff病患儿的临床、头颅MRI及生化表现,采用荧光底物法分别测定外周血白细胞氨基己糖苷酶A（Hex A）及氨基己糖苷酶A和B（Hex A＆B）酶活性,PCR-DNA直接测序法进行HEXB突变分析.结果 患儿男,9岁,主因“走路不稳、讲话变慢并进行性加重3年”就诊,病情进展缓慢.头颅MRI表现为双侧小脑半球、小脑蚓脑沟明显加深,提示小脑萎缩.基底节区域波谱成像分析（MRS）提示左、右背部丘脑NAA/Cr、Cho/Cr、Cho/NAA比值均未见明显异常.白细胞Hex A活性为69.5nmol/（mg·h）[参考值150～ 360 nmol/（mg·h）],Hex A＆B活性为119 nmol/（mg·h）[参考值600～3 600 nmol/（mg·h）].HEXB基因突变分析显示c.1404delT（p.P468P fsX62）及c.1509-26G＞A复合杂合突变,前者为新缺失突变,后者为已知致病突变.随访18个月,病情缓慢进展.结论 青少年型Sandhoff病可表现为小脑性共济失调及小脑萎缩,酶学测定可见白细胞Hex A＆B活性明显降低,HEXB突变分析发现新突变c.1404delT（p.P468P fsX62）.

半真实的故事(外五首)

自降生以来，他就 在她的身上寻觅——一块安居的平坦之地 介于卫星云图的模样 纸质的肌肤，激起一堵 肉体铸就的城墙——“肉池酒林——无名的温柔乡……“她和他，皆非攻城的弓箭手……”

窗帘布艺展厅(外一首)

她说：“你家厨房窗口窜出来的火焰——‘啊，生活的助手’是否让你比往日可靠？这个词。

小概率事件

如此她引导向上由善而更善她行动那么突然无滞于时光——《神曲·天堂篇》麋鹿以后将会来到我现在居住的城市,寻访那些曾经与我有过一星半点交集的陌生人。她一脸愁容,暂时安身于此,晚上在落脚的酒店凝神发呆,白天出门时带着买彩票一样的心情,试图打听出与我似乎有关却不切实的传闻。于真相而言,这些传闻更像是她头顶上的虚拟犄角,弯曲别致,分叉繁多,有时是防身的武器,有时又变成必要逃命时瞬息动作的绝对负累。

虚构自传

这个人又喝醉了这个人喝醉后不发酒疯．

脂蛋白酯酶基因突变致I型高脂蛋白血症三例

例1男，8岁，因“体检发现血脂明显异常1个月”于2013年4月就诊。无腹痛、呕吐等消化道症状，平素喜食肥肉，蔬菜偏少，生长发育正常。外院检查血清总胆固醇（TC）5．6mmol／L，甘油三酯（TG）18．2mmol／L。

90后诗歌对话

2017年3月10日下午，由《诗刊》社和国新书苑主办的首场“90后诗歌对话”活动在海口骑楼老街国新书苑举行。这是《诗刊》社自2017年起启动了百位“90后”诗人扶持计划以来，又一次对“90后”诗人的大力扶持，主要是提供一个对话的平台，让“90”后诗人自己走上历史的舞台。

苏东坡在海南——九死南荒吾不恨,兹游奇绝冠平生

“我本儋耳人，寄生西蜀州。忽然跨海去，譬如事远游。平生生死梦，三者无劣优。知君不再见，