Caspase-1选择性抑制剂VX-765在大鼠急性肾损伤相关性肺损伤中的作用

目的评价caspase-1选择性抑制剂VX-765在大鼠急性肾损伤(AKI)相关性肺损伤中的作用。方法SPF级SD雄性大鼠72只,9~10周龄,体重350~400 g。采用随机数字表法分为四组:假手术组(S组)、AKI组(A组)、DMSO+AKI组(D组)和VX-765+AKI组(V组),每组18只。S组暴露双肾45 min;A组采用切除右肾、夹闭左肾肾蒂45 min的方法建立AKI模型;D组建立AKI模型前经鼠尾静脉注射2%DMSO 0.5 ml/kg;V组建立AKI模型前经鼠尾静脉注射10%VX-7650.5 ml/kg。AKI模型建立24 h后取主动脉血样,采用酶偶联速率法与肌氨酸氧化酶法检测血清尿素氮(BUN)和肌酐(Scr)浓度,ELISA法检测血清IL-1β和IL-18浓度。随后处死大鼠取左肾组织和左肺组织。采用免疫荧光法检测肾组织caspase-1/DAPI双阳性细胞百分比,Western blot法检测肾组织cleaved GSDMD蛋白及肺组织ZO-1蛋白含量,Paller评分法评估HE染色后的肾小管损伤情况,烘干法检测肺部干湿比重,计算肺含水率,ELISA法检测肺伊文斯蓝评估肺血管通透性,肺损伤评分评估MASSON染色后的肺组织损伤程度。结果与S组比较,A组、D组、V组血清BUN、Scr、IL-1β和IL-18浓度明显升高,肾组织caspase-1/DAPI双阳性细胞百分比明显升高,肾组织caspase-1和cleaved GSDMD蛋白含量明显升高,肾损伤Paller评分明显升高,肺组织ZO-1蛋白含量明显降低,肺含水率、肺血管通透性、肺损伤评分明显升高(P<0.05)。与A组比较,V组血清BUN、Scr、IL-1β和IL-18浓度明显降低,肾组织caspase-1/DAPI双阳性细胞百分比明显降低,肾组织caspase-1和cleaved GSDMD蛋白含量明显降低,肾损伤Paller评分明显降低,肺组织ZO-1蛋白含量明显升高,肺含水率、肺血管通透性、肺损伤评分明显降低(P<0.05)。A组、D组各指标差异无统计学意义。结论Caspase-1选择性抑制剂VX-765可以降低血清中BUN、Scr、IL-1β和IL-18浓度,减少肾组织细胞焦亡,改善肺水肿及肺血管通透性,减轻AKI相关性肺损伤。

外源性一氧化碳通过抑制细胞过度自噬改善老龄大鼠术后焦虑样行为的作用

目的探讨外源性一氧化碳(CO)通过抑制星形胶质细胞过度自噬改善老龄大鼠围术期应激后焦虑样行为的作用。方法清洁级健康雄性SD大鼠36只,分为3组(n=12):假手术组(S组)、腹腔探查组(P组)、腹腔探查+一氧化碳释放分子-3(carbon monoxide-releasing molecule 3,CORM-3)组(PC组)。PC组大鼠在手术结束后即刻、24、48 h经尾缘静脉注射外源性CORM-3(4 mg/kg)。术后第7天采用行为学评估大鼠焦虑样行为;采用免疫荧光法评估杏仁核区神经元数量及星形胶质细胞、小胶质细胞和神经元内自噬相关蛋白B细胞淋巴瘤-2相互作用蛋白1(Bcl-2 interacting protein 1,Beclin1)和泛素(ubiquitin,Ub)的表达情况,采用Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)的表达;采用透射电镜法检测杏仁核区自噬小体的数量。结果旷场试验结果显示,与S组比较,P组和PC组大鼠中央区停留时间百分比明显下降,焦虑样行为增加(P<0.05);高架十字迷宫试验表明,与S组比较,P组和PC组大鼠开放臂停留时间百分比及开放臂进入次数百分比显著下降,焦虑样行为增加(P<0.05);组织病理学结果显示,与S组比较,P组和PC组大鼠杏仁核区NeuN阳性细胞数降低(P<0.05),星形胶质细胞内Beclin1、Ub表达上调(P<0.05);Western blot检测结果显示,与S组比较,P组和PC组大鼠LC3Ⅱ/Ⅰ的比值上调(P<0.05);透射电镜下观察,S组大鼠星形胶质细胞内未见自噬小体,P组和PC组大鼠星形胶质细胞内可见自噬小体;与P组比较,PC组大鼠上述各项指标均明显改善(P<0.05)。结论外源性CO能够改善老龄大鼠围术期应激后的焦虑样行为,其机制可能与抑制杏仁核区星形胶质细胞过度自噬相关。

行政单位档案管理信息化技术的应用

档案是重要的原始资料,它需要合理的整理与分类才可以得到更好的开发与利用。档案信息化,简单的来说就是从之前的传统手工管理,转变成依靠以信息技术为核心的信息数字。随着信息技术的快速发展,将档案管理带进了一个全新的时期,传统的人工管理模式逐步被信息技术方式所取代,从而大大提高了档案管理的效率。

浅谈如何提高档案管理质量

随着时代在不断的前进,目前我国政府机关档案管理制度已经无法完成社会发展的需求。为了顺应当代的发展趋势,需要将管理理念、数据资源建设、服务以及保障体系与时俱进,从而为用户提供更便捷的服务。

高产优质苜蓿栽培管理技术

本文分析了乌兰察布市高产优质苜蓿栽培管理技术,并大力推广节水灌溉技术,研究推广测土配方施肥技术,以及除草、抓苗、越冬等技术,以期建立一整套高产优质栽培技术,推动乌兰察布市高产优质苜蓿产业快速发展。

乌兰察布市饲料现状及发展对策

饲料工业是现代农牧业发展的重要支撑产业,也是保障动物性食品安全供给的民生产业。加快建立安全优质高效的饲料生产体系和质量安全监督管理体系,推动和保障乌兰察布市饲料工业健康快速发展,对于发展该地区生态效益型畜牧产业、促进草原生态保护,带动农村牧区经济发展,增加农牧民收入,推动该地区＂绿色农畜产品生产加工输出基地＂建设具有特别重要的意义。

VX-765对失血性休克复苏大鼠认知功能的影响

目的评价VX-765对失血性休克复苏大鼠认知功能的影响。方法清洁级健康雄性SD大鼠48只,9~10周龄,体重350~400 g。采用随机数字表法分为4组(n=12):假手术组(S组)、失血性休克复苏组(H组)、VX-765组(V组)和溶剂对照组(C组)。股静脉放血至MAP为25~35 mmHg并维持60 min,将收集的血液在15 min内回输体内达到初始血压水平进行复苏,必要时输注生理盐水,建立失血性休克复苏模型;V组和C组复苏结束后立即向股静脉注射VX-765 1 mg/kg或等量0.4%聚乙二醇(VX-765溶剂)。于复苏结束后12 h时每组随机取6只大鼠处死取大脑皮质,采用免疫荧光法确定神经元焦亡率,T2加权成像法检测皮质水肿程度,复苏后7 d时每组余6只大鼠采用旷场实验测定认知功能。结果与S组比较,H组、V组和C组复苏后12 h时皮质神经元焦亡率升高,水肿程度增加,复苏后7 d时大鼠中央格路程和直立次数减少,中央格停留时间缩短(P<0.05);与H组和C组比较,V组复苏后12 h时皮质神经元焦亡率降低,水肿程度降低,复苏后7 d时大鼠中央格路程和直立次数增加,中央格停留时间延长(P<0.05)。结论 VX-765可改善失血性休克复苏大鼠认知功能,其机制与抑制皮质神经元焦亡有关。

CORM-3对创伤性颅脑损伤大鼠输血相关性急性肺损伤的影响

目的评价一氧化碳释放分子-3(CORM-3)对大鼠创伤性颅脑损伤后输血相关性急性肺损伤的影响。方法清洁级健康雄性成年SD大鼠72只,体重300~350 g,采用随机数字表法分为4组(n=18):假手术组(S组)、创伤性颅脑损伤组(T组)、创伤性颅脑创伤+10 ml/kg血浆输注组(TP组)和创伤性颅脑创伤+10 ml/kg血浆输注+CORM-3组(TPC组)。采用自由落体法建立大鼠颅脑损伤模型,TP组和TPC组大鼠分别在创伤性颅脑损伤后经股静脉输注血浆10 ml/kg。血浆输注完毕24 h后处死大鼠,取肺组织,确定肺组织湿重/干重(W/D)比值,通过HE染色结果计算肺损伤评分,肺部超声检查进行声像图量化评分,通过TUNEL染色法计算细胞凋亡率,Western blot法检测肺组织活化caspase-3、Bid、Bim和Puma的表达。结果与S组比较,其余3组大鼠肺组织W/D比值、肺损伤评分、声像图量化评分和细胞凋亡率升高,肺组织活化caspase-3、Bid、Bim和Puma表达上调(P<0.05);与T组比较,TP组大鼠肺组织W/D比值、肺损伤评分、声像图量化评分和细胞凋亡率升高,肺组织活化caspase-3、Bid、Bim和Puma表达上调(P<0.05);与TP组比较,TPC组大鼠肺组织W/D比值、肺损伤评分、声像图量化评分和细胞凋亡率下降,肺组织活化caspase-3、Bid和Bim和Puma表达下调(P<0.05)。结论CORM-3可减轻创伤性颅脑损伤大鼠输血相关性急性肺损伤,其机制可能与抑制肺组织细胞凋亡相关。

外源性CO对失血性休克复苏大鼠急性肾损伤时细胞凋亡的影响

目的评价外源性CO对失血性休克复苏(HSR)大鼠急性肾损伤时细胞凋亡的影响。方法清洁级健康雄性SD大鼠48只,9~10周龄,体重350~400 g,采用随机数字表法分为4组(n=12):假手术组(S组)、HSR组(H组)、HSR+CORM-3组(HC组)和HSR+iCORM-3组(HiC组)。失血性休克通过股静脉放血至MAP为30~35 mmHg维持45 min,将收集的血液在15 min内回输体内达到初始血压水平作为复苏,必要时输注生理盐水,建立HSR模型;HC组和HiC组在HSR模型进行液体复苏时分别加入CORM-3和iCORM-34 mg/kg(CORM-3在超净台中静置24 h,充分释放CO后作为对照)进行处理;S组只进行股静脉、股动脉穿刺置管。于复苏后3 h时采集大鼠尾静脉血样,测定血清尿素氮(BUN)和肌酐(Scr)浓度;于复苏后12 h时处死大鼠取肾脏组织,Western blot法测定Bcl-2、Bak及cleaved caspase-3的表达,TUNEL染色检测肾脏细胞凋亡情况,观察病理学结果并行损伤评分。结果与S组比较,H组、HC组和HiC组血清BUN、Scr浓度、病理学损伤评分和肾脏细胞凋亡率升高,Bcl-2/Bak比值降低,cleaved caspase-3表达上调(P<0.05);与H组比较,HC组血清BUN、Scr浓度、病理学损伤评分和肾脏细胞凋亡率降低,Bcl-2/Bak比值升高,cleaved caspase-3表达下调(P<0.05);与HC组比较,HiC组血清BUN、Scr浓度、病理学损伤评分和肾脏细胞凋亡率升高,Bcl-2/Bak比值降低,cleaved caspase-3表达上调(P<0.05);H组和HiC组比较,上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论外源性CO改善HSR大鼠急性肾损伤的机制可能与抑制细胞凋亡有关。

STING信号通路在CORM-3减轻肝缺血再灌注大鼠肝细胞焦亡和凋亡中的作用

目的评价干扰素基因刺激蛋白(STING)信号通路在一氧化碳释放分子-3(CORM-3)减轻肝缺血再灌注大鼠肝细胞焦亡和凋亡中的作用。方法清洁级健康雄性SD大鼠48只,9~11周龄,体重320~380 g,采用随机数字表法分为4组(n=12):假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、CORM-3组(C组)和STING激动剂ADU-S100组(A组)。IR组、C组和A组采用可逆性结扎肝左中叶肝动脉、门静脉及胆管分支45 min后恢复灌注的方法建立肝缺血再灌注损伤模型。C组于再灌注即刻股静脉注射CORM-34 mg/kg,S组、IR组和A组股静脉注射含二甲基亚砜的等容量生理盐水。股静脉注射后1.5 h,A组腹腔注射ADU-S10010 mg/kg,S组、IR组和C组腹腔注射等量生理盐水。再灌注3 h时,采用速率法检测血清ALT和AST浓度。再灌注12 h时处死,取肝组织,采用比色法检测一氧化碳(CO)含量,进行肝损伤评分,采用Western blot法检测IL-1β、IL-18、Bcl-2、Bax、干扰素调节因子3(IRF3)、磷酸化IRF3(p-IRF3)、STING、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)和活化的caspase-1的表达,采用免疫荧光染色法确定肝细胞焦亡率和凋亡率。结果与S组比较,IR组血清ALT和AST浓度、肝损伤评分、CO含量、肝细胞焦亡率和凋亡率升高,IL-1β、IL-18、p-IRF3、STING、NLRP3、GSDMD和活化的caspase-1表达上调,Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05);与IR组比较,C组血清ALT和AST浓度、肝损伤评分、肝细胞焦亡率和凋亡率降低,CO含量升高,IL-1β、IL-18、p-IRF3、STING、NLRP3、GSDMD和活化的caspase-1表达下调,Bcl-2/Bax比值升高(P<0.05);与C组比较,A组血清ALT和AST浓度、肝损伤评分、肝细胞焦亡率和凋亡率升高,CO含量降低,IL-1β、IL-18、p-IRF3、STING、NLRP3、GSDMD和活化的caspase-1表达上调,Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05)。结论CORM-3减轻肝缺血再灌注大鼠肝细胞焦亡和凋亡的机制可能与抑制STING信号通路激活有关。