MK571对脓毒症大鼠急性肺损伤的影响

目的观察MK571对脓毒症大鼠急性肺损伤的影响。方法将45只雄性SD大鼠随机分为假手术组、脓毒症组和MK571干预组,每组15只。脓毒症组和MK571干预组采用盲肠结扎穿刺法制作脓毒症模型。MK571干预组术前30 min腹腔注射MK571 25 mg/kg。术后12 h和24 h采静脉血分别检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。术后24 h行支气管肺泡灌洗,留取灌洗液行白细胞计数,并留取肺组织做病理学观察评估肺组织损伤程度。结果脓毒症组大鼠术后血清IL-1β和TNF-α水平及支气管肺泡灌洗液中白细胞计数均显著高于假手术组(P均<0.05),肺组织损伤明显。MK571干预组大鼠血清IL-1β和TNF-α水平及支气管肺泡灌洗液中白细胞计数均明显低于脓毒症组(P均<0.05),肺组织损伤明显减轻。结论 MK571可有效减轻脓毒症大鼠急性肺损伤。

细胞凋亡在缺血性心肌病中作用的研究进展

细胞凋亡在急性心肌梗死（AMI）后心脏损伤中起着重要的作用，并且参与AMI后的左心室重构和有症状心功能衰竭的发生。发现细胞凋亡的敏感生物标志物有助于评估AMI患者的预后，并对寻找新的治疗方案具有重要意义。细胞凋亡的起始途径有外在的死亡受体途径和内在的线粒体途径，两个途径在相同的终末通路上汇集。肿瘤坏死因子相关性凋亡诱导配体（TRAIL）是评价AMI患者预后的重要标志物。现就细胞凋亡在缺血性心肌病发病过程以及凋亡标志物在临床治疗中的应用价值进行综述。

脓毒症精准免疫治疗的新进展

脓毒症是宿主对感染的反应失调而导致危及生命的器官功能不全,相当于感染+序贯器官衰竭评分(SOFA)>2分,是宿主对感染反应失控而导致的促炎-抗炎反应失衡.近年来,脓毒症治疗除给予抗菌药物、病因治疗、液体复苏和器官功能支持外,尚无单一的辅助疗法.过去对脓毒症的治疗重点一直是免疫抑制,但脓毒症诱导的免疫麻痹在患者发病及死亡过程中起重要作用,从而导致脓毒症的研究领域转向增强免疫应答.因此,确定免疫系统严重受抑制或过度活跃,并且准确监测免疫和治疗反应至关重要.现就脓毒症患者精准免疫治疗的进展及存在的的挑战进行综述.

多药耐药相关蛋白4过表达对脂多糖诱导血管内皮高渗透性的影响及其机制

目的 探讨多药耐药相关蛋白4（MRP4）基因过表达对脂多糖（LPS）诱导大鼠肺微血管内皮细胞（PMVECs）渗透性的影响及其分子机制.方法 体外培养PMVECs细胞,待细胞传至3~6代后分为3组：LPS组无血清培养基培养24 h后,用10μg/mL LPS刺激细胞;Ad-shRNA组用腺病毒空白载体转染细胞2 h,无血清培养基培养24 h后,用10μg/mL LPS刺激细胞;Ad-MRP4组用携带MRP4的重组腺病毒载体转染细胞2 h,无血清培养基培养24 h后,用10μg/mL LPS刺激细胞.于LPS刺激2、6、12、24 h采用Transwell小室法检测单层细胞渗透性;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞内环磷酸腺苷（cAMP）水平;激光共聚焦荧光显微镜下观察细胞内纤维型肌动蛋白（F-actin）形态及分布情况.于LPS刺激12 h收集细胞,采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测PMVECs中MRP4、β-连环蛋白（β-catenin）、血管内皮-钙黏蛋白（VE-cad）和紧密连接蛋白（ZO-1）的表达水平.结果 ①LPS刺激后PMVECs细胞渗透性及细胞内cAMP水平逐渐增加,12 h达到高峰,24 h开始下降.用携带MRP4的重组腺病毒载体转染PMVECs后,细胞渗透性较LPS组及Ad-shRNA组显著增加〔12 h渗透性（A值）：1.88±0.06比1.12±0.17、1.10±0.18〕,细胞内cAMP水平显著降低〔12 h cAMP（μg/L）：2.39±0.02比2.97±0.01、3.00±0.02,均P〈0.05〕;而LPS组与Ad-shRNA组各时间点各指标差异均无统计学意义（均P〉0.05）.② 激光共聚焦荧光显微镜下显示,3组细胞均出现F-actin重构、应力纤维形成,但Ad-MRP4组细胞破坏程度较LPS组和Ad-shRNA组更加严重.③ 与LPS组和Ad-shRNA组比较,Ad-MRP4组PMVECs中MRP4蛋白表达显著上调（灰度值：0.76±0.03比0.44±0.02、0.43±0.02,均P〈0.05）,β-catenin、VE-cad和ZO-1蛋白表达显著下调〔β-catenin（灰度值）：0.14±0.03比0.23±0.04、0.23±0.03;VE-cad（灰度值）：0.21±0.01比0.34±0.02、0.35±0.04;ZO-1（灰度值）：0.14±0.02比0.37±0.06、0.33±0.07,均P〈0.05〕;而LPS组与Ad-shRNA组间各蛋白表达差异无统计学意义（均P〉0.05）.结论 MRP4基因过表达可降低细胞内cAMP水平,下调细胞间连接蛋白表达,从而增加LPS诱导的血管内皮渗透性.

武汉市方舱医院117例新型冠状病毒肺炎患者出院后随访结果

目的对武汉市洪山方舱医院治愈出院的新型冠状病毒肺炎(新冠肺炎)患者进行随访,分析出院患者的流行病学和临床特点以及新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测结果,为疫情的防控提供依据。方法以电话随访的方式收集2020年2月6日至3月10日武汉市洪山方舱医院收治的117例确诊为新冠肺炎并治愈出院患者的临床资料,并分析其流行病学特点、临床症状、实验室及其影像学检查资料,以期为新冠肺炎的防治提供依据。结果117例达到出院标准的新冠肺炎患者中,男性49例,女性68例;年龄(49.00±11.88)岁,住院时间为(17±6)d,其中91例患者出院后无明显症状(占77.78%),少部分患者出院后有胸闷、心悸、气喘等临床症状,7例患者出院后有胸闷表现,有咽痛和心悸的患者各为5例,4例患者出院后仍有咳嗽表现,有气喘和胸痛的患者均为3例,有头痛、腹泻、呼吸困难的患者各为1例。7例出院患者的2019-nCoV核酸检测呈阳性,复阳率约5.98%,均在达到出院标准后10~19 d出现核酸复阳情况;大部分患者出院后未再行胸部CT检查,但随访时行胸部CT检查的30例患者中有24例表现正常,6例患者CT结果均较出院时吸收或正常。结论武汉市方舱医院新冠肺炎患者出院后存在2019-nCoV核酸复阳现象,未造成续发传播,且这些核酸结果复阳的患者与其住院时间及出院后临床症状存在与否和CT表现无明显相关性。建议对于治愈出院的患者增加粪便或其他标本的检测,同时对出院患者加强定期监测和随访。

多药耐药相关蛋白4对脂多糖诱导的内皮细胞通透性及细胞骨架的影响

目的探讨多药耐药相关蛋白4（MRP4）对脂多糖（LPS）诱导的大鼠肺微血管内皮细胞（PMVECs）通透性及细胞骨架的影响。方法PMVECs细胞株培养3至6代后随机分为4组，对照组（细胞不做任何处理）、LPS组（细胞仅接受LPS刺激）、shMRP4重组腺病毒组（Ad—shMRP4，将针对大鼠MRP4基因设计的短发夹RNA构建腺病毒载体上，通过腺病毒感染细胞＋LPS刺激）、shRNA重组腺病毒组（Ad—shRNA，带绿色荧光蛋白基因空白的重组腺病毒载体感染细胞＋LPS刺激）。通过荧光显微镜观察细胞感染率，Western botting检测MRPg的表达水平，Transwell小室法检测单层细胞通透性，激光共聚焦显微镜观察细胞内纤维肌动蛋白（F—actin）形态及分布情况。多组间差异采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD—t检验，以P〈0．05为差异有统计学意义。结果与对照组比较，LPS组及Ad—shRNA组MRP4的表达水平显著上调（P〈0．05）、单层细胞通透性显著增加（2、6、12、24h分别为：0．28±0．02和0．41±0．04、0．32±0．02；0．30±0．01和0．53±0．04、0．39±0．03；0．33±0．04和1．12±0．17、0．70±0．07；0．32±0．03和0．79±0．02、0．57±0．05，P〈0．05），F-actin分布紊乱、重构以及应力纤维形成。与LPS组比较，Ad．shMRP4组MRP4的表达水平明显下调（P〈0．05）、单层细胞通透性明显降低（2、6、12、24h分别为：0．41±0．04和0．32±0．02；0．53±0.04和0．39±0．03；1．12±0．17和0．70±0.07；0．79±0．02和0．57±0．05，P〈0．05），F-actin重构以及应力纤维形成显著减少。结论MRP4基因沉默显著增减轻LPS诱导的内皮细胞通透性增高及细胞骨架破坏，对内皮细胞屏障发挥保护作用。

多药耐药相关蛋白4抑制剂对脓毒症急性肺损伤大鼠的保护作用

目的探讨多药耐药相关蛋白4（MRP4）抑制剂对脓毒症急性肺损伤（ALI）大鼠的保护作用。方法将60只雄性sD大鼠按随机数字表法分为假手术（Sham）组、脓毒症组及MRP4抑制剂MK571干预组，每组20只。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）建立大鼠脓毒症模型，Sham组仅开腹不进行盲肠结扎和穿刺。MK571干预组于制模前30min腹腔注射20mg／kgMRP4抑制剂MK571，Sham组和脓毒症组给予等量生理盐水。于术后24h取大鼠股动脉血进行血气分析，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平；取肺组织计算湿／干质量（W／D）比值，采用蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测MRP4蛋白表达。结果与Sham组相比，脓毒症大鼠动脉血pH值和动脉血氧分压（PaO：）显著降低[pH值：7．18±0．03比7．40±0．03，PaO，（mmHg，1mmHg=0．133kPa）：63．15±6．24比98．05±2．58]，而动脉血二氧化碳分压（PaCO：）明显升高（mmHg：56．60±8．30比37．85±3．18），血清TNF-α水平亦显著升高（ng／L：146．24±19．99比25．77±9．83）；肺组织W／D比值明显增加（7．75±0．47比4．09±0．58），MRP4蛋白表达显著上调（灰度值：0．153±0．006比0．087±0．005，均（P〈0．05）。与脓毒症组相比，MK571预处理后大鼠动脉血pH值（7．30±0．02比7．18±0．03）和PaO2水平（mmHg：80．30±5．34比63．15±6．24）显著升高，PaC02明显降低（mmHg：29．25±3．24比56．60±8．30），血清TNF-α水平显著降低（ng／L：97．96±16．72比146．24±19．99）；肺组织W／D比值明显减少（5．89±0．51比7．75±0．47），MRP4蛋白表达显著下调（灰度值：0．124±0．006比0．153±0．006，均P〈0．05）。结论MRP4抑制剂通过下调MRP4表达可明显改善脓毒症AI大鼠肺功能，降低炎性因子水平，从而对ALl大鼠起到保护作用。

介绍一种改良经皮扩张气管切开术

目的 介绍一种新的改良经皮扩张气管切开术（PDT）并观察比较PDT改良前后在危重症患者中的应用效果.方法 收集2016年1月至2017年1月重症医学科（ICU）行PDT的120例患者的临床资料,分别为常规PDT术组60例和改良PDT术组60例,对两组患者的性别、年龄、体质量、体质量指数（BMI）、APACHEⅡ评分等一般情况和两组患者手术所需时间、手术切口大小、术中出血量、拔除气管套管后切口愈合时间以及手术后并发症的发生率进行比较.结果 两组患者在性别、年龄、体质量、体质量指数（BMI）、APACHEⅡ评分等指标方面差异无统计学意义（P〉0.05）;与常规PDT术组相比较,改良PDT术组手术时间、术中出血量、切口大小明显减少[（5.80±1.19）min比（7.65±1.05）min、（8.33±3.30）ml比（11.33±4.34）ml、（1.08±0.30）cm比（1.27±0.25）cm]（P〈0.05）,差异有统计学意义,但两组患者的切口愈合时间比较差异无统计学意义（P〉0.05）;两组并发症的发生率比较差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 与常规PDT相比较,改良PDT减少手术时间和术中出血量,手术切口小,值得广泛推广应用.

心脏术后脓毒症的研究新进展

脓毒症是心脏术后严重并发症,当发展为脓毒症休克、多脏器功能衰竭时是导致心脏术后患者死亡的重要原因之一。目前,心脏术后脓毒症发病机制尚未明确,有研究表明可能与术中缺血再灌注、体外循环、免疫抑制剂以及手术损伤等原因有关。尽管有药物可调节脓毒症相关的免疫反应,但仍缺乏心脏术后脓毒症治疗的特效药物。该文就心脏手术后脓毒症发生机制及治疗进展进行综述。