低温β-1,4-内切葡聚糖酶的基因挖掘、异源表达及其酶学性质表征

β-1,4-内切葡聚糖酶在洗涤行业有着广泛的应用价值,其中具有较好的低温和碱性耐受能力是其实现工业应用的重要前提。该论文通过基因挖掘获得一株具有低温耐受能力的Deinococcus cellulosilyticus来源新型β-1,4-内切葡聚糖酶基因EgDC,并将其在大肠杆菌中实现了可溶性表达,其中大部分存在于周质空间,少部分分泌至胞外。对EgDC酶的酶学性质进行了表征,发现该酶的最适温度和最适pH值分别为40℃和pH 6.5,其在20℃能保持70%以上活力,且在pH 8.0和pH 9.0的半衰期分别达到83.43 min和53.79 min。EgDC酶具有较好的催化性质,其比酶活力k_(cat)/K_(m)值分别为(26.38±1.43)U/mg和(520.03±17.07)s^(-1)/mg,且对于金属离子以及表面活性剂均具有较强耐受能力。由此可见,新型β-1,4-内切葡聚糖酶EgDC具有较好的催化能力,且在低温、碱性以及存在表面活性剂环境下较为稳定,因此具有潜在的工业应用价值。

不同来源胰蛋白酶的基因挖掘、在Komagataella phaffii GS115的异源表达及其酶学性质分析

胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶,广泛应用于皮革、食品加工、生化检测和制药行业。该文旨在挖掘不同来源的胰蛋白酶,并在Komagataella phaffii GS115进行异源表达,最终分析并比较其酶学性质。通过基因挖掘手段分别克隆了人源胰蛋白酶(homo spanies trypsin,HST)、牛源胰蛋白酶(bos taurus trypsin,BTT)、虾源胰蛋白酶(penaeus vannamei trypsin,PVT)和弗氏链霉菌源胰蛋白酶(Streptomyces fradiae trypsin,SFT),以pPIC9k为载体构建重组质粒,并在Komagataella phaffii GS115中成功实现异源表达。经纯化激活后,HST,BTT,PVT,SFT的酰胺酶活性分别为18.6、12.3、44.7、13.8 U/mL;4种来源胰蛋白酶的最适温度分别为20、35、40、45℃,而其最适pH值分别为9、8.5、8.5、9,其中SFT在pH 9~11的稳定性更优。

温度对豆瓣酱发酵过程理化指标、风味物质和微生物群落的影响

该文通过设置恒温豆瓣酱发酵实验,考察不同温度对豆瓣酱发酵过程中理化指标、风味物质、生物胺和微生物群落组成的影响,并与自然温度发酵豆瓣酱进行比较。结果发现,温度的提高有利于氨基酸态氮和还原糖的积累,同时促进了游离氨基酸和挥发性风味物质的形成,且能降低酱醅中食源性致病菌的丰度;然而,较高的温度同样会导致酱醅中总酸含量和生物胺含量偏高。发酵后,40℃发酵组中的氨基酸态氨、还原糖、挥发性风味物质和生物胺含量分别为1.02 g/100 g、12.07 g/100 g、25.65 mg/kg和54.10 mg/100 g,自然发酵组中的各物质含量分别为0.95 g/100 g、11.70 g/100 g、16.74 mg/kg和43.52 mg/100 g。因此,与自然发酵相比,提高发酵温度能够加速豆瓣酱发酵成熟,但是需要进一步的工艺优化消除总酸和生物胺偏高的风险。

适于红枣汁发酵的乳酸菌的筛选及其发酵特性分析

红枣富含活性成分,但存在不易储存、直接食用过于甜腻等问题,红枣产业体量小、附加值低。为筛选适合红枣汁发酵的菌株,从实验室保藏菌株和水果自然发酵液中筛选得到204株菌株,分析其发酵性能、益生潜力和发酵产品中风味物质组成等,获得1株有着益生菌特性且在红枣汁中发酵风味优良的植物乳植杆菌MY-12,使用该菌株发酵初始含糖量14%的红枣汁,发酵周期为48 h,发酵结束后发酵液糖酸比为20∶1(其中乳酸占有机酸93.01%),酒精含量低于0.1%,饮料有着明显红枣益生菌饮料的典型性,口感协调,香味馥郁,且红枣甜腻风味与涩味口感得到明显改善。研究结果对改善目前国内红枣资源深加工不足的现状,提升红枣农产品深加工的经济和社会效益有着重要参考价值,为发酵型益生饮料的研发提供了新的思路。

基于苯并呋咱类荧光探针的酒类中乙醛检测方法的研究

苯并呋咱类荧光探针具有斯托克斯位移大、摩尔消光系数大以及荧光量子产率高等优点,具有较强的荧光传感开发价值。该研究设计并合成了一种苯并呋咱类荧光探针,探究了该荧光探针与乙醛的荧光性质,并成功应用于酒类样品中乙醛含量的检测,并提出利用蒸馏法去除酒类中酮酸类物质等的干扰,线性范围和回收率分别为0.12~200 mg/L和91.50%~111.14%,开发的检测方法与气相色谱结果相比并无显著性差异。该研究提出的荧光探针检测方法为酒类质量管控提供了一种新思路。

基因组重排选育优良发酵性能的高浓酿造啤酒酵母

高浓酿造技术是啤酒工业中常用的生产技术,选育发酵性能优良的高浓酿造啤酒酵母具有重要的生产意义。以啤酒酵母(Saccharomyces pastorianus)G03为出发菌株,利用基因组重排技术,结合杜氏小管产气实验、菌株耐受性测试、三角瓶发酵实验三轮筛选,选育高效发酵的高浓酿造啤酒酵母。G03经过了常压室温等离子体诱变处理和两轮递推式原生质体融合,最终获得了发酵速度及真正发酵度均提高的菌株F2-123,且主要风味成分的含量没有受到明显影响。F2-123传代发酵性能稳定,啤酒发酵实验结果表明其在24°P麦汁中、11℃发酵周期为11 d,与出发菌株G03相比,F2-123发酵周期缩短了1 d,酒精度提高了8.9%,真正发酵度提高了6.5%,其他风味物质没有明显差异。该研究获得的菌株在啤酒高浓酿造生产中具有一定的应用潜力。

酒类主要风味物质对乙醇-水体系中氢键的影响

研究酒类主要风味物质对乙醇-水体系中的氢键缔合影响。Plackett-Burman试验可知,异丁醇、β-苯乙醇、乙酸乙酯、KCl、NaCl、MgSO4、苹果酸、乳酸、丙酮酸对乙醇-水体系中氢键缔合影响最大。根据相关性分析,酒精度与啤酒中氢键缔合强度的相关系数为0.629,是主要影响因素;原麦汁浓度、异丁醇、氯离子、钾离子、丙酮酸、乳酸与氢键缔合均有一定的正相关性。

RAPD-PCR快速鉴定啤酒污染菌的研究

本研究主要评价RAPD-PCR技术在快速鉴定啤酒污染菌中的应用。首先评价了CTAB法和试剂盒提取DNA模板对RAPD指纹稳定性的影响以及乳酸菌专一性BP引物扩增的16SrDNA的5'末端740bp序列用于鉴定菌种的可行性,采用PCR产物直接测序鉴定分离的污染菌,构建标准污染菌库。对分离菌M-13的RAPD指纹聚类分析表明,相同来源的同一种菌能很好地归类在一起。根据建立的快速鉴定流程和初步确定的菌种相似性阈值(SCC),对8株分离菌的鉴定表明,RAPD-PCR技术是一项简单、快捷、可靠性强的鉴定技术,为研究啤酒酿造过程的污染菌提供了一个非常有用的快速鉴定工具。

髂内动脉栓塞术治疗顽固性子宫出血

目的 :总结和探讨顽固性子宫出血的发生、临床特点 ,研究用选择性子宫动脉栓塞术结合其他方法对未育妇女的顽固性子宫出血进行治疗。方法 :对 1例顽固性子宫出血的患者资料进行了回顾分析并复习文献。结果 :选择性子宫动脉栓塞术结合其他疗法使子宫大出血迅速减少 ,直至停止 ,保留了子宫。结论 :顽固性子宫大出血的原因可能是多方面的 ,使用髂内动脉栓塞术损伤小 ,恢复快 ,副反应少 。

啤酒污染乳酸菌PCR引物的设计

根据细菌 16srDNA序列的特点 ,通过对啤酒污染菌 16srDNA序列进行分析 ,设计合成了针对啤酒污染乳酸菌的引物。在 16srDNA基因水平证明了该引物对乳酸菌的特异性。该引物的特异性是PCR检测技术在啤酒厂推广应用的前提。同时反映了 16srDNA在微生物鉴定中所起的重要作用。

啤酒腐败菌的酒花抗性

酒花苦味物质具有抗菌活性,能抑制多种细菌生长。未解离的苦味物质作为一个离子载体,驱散细胞跨膜pH梯度(ΔpH),影响细胞吸收营养物质,使细胞因饥饿而死亡。小部分乳酸菌具有酒花抗性,使其能在啤酒中生长。这种酒花抗性是菌株特异性的,并需要诱导产生。研究表明它与多种抗性机制有关,如细胞壁成分、多个膜上运输载体。已有数个与酒花抗性相关的基因被报道,并用它们可作为PCR快速检测啤酒腐败菌的跨种基因标记。

酿酒工业分析课程教学改革与实践

文章针对酿酒工业分析(含实验)课程教学和人才培养要求,对课程教学目标、教学内容、教学方法和考核方式进行了系统分析,提出了提高教学质量和人才培养的改革方式,以期为酿酒行业分析检测人才的培养提供参考。

经阴道B超诊断异位妊娠的价值

异位妊娠是常见的妇产科疾病，近年来其发生率有明显升高的趋势［１］．我们从１９９５年１２月至１９９７年５月对临床疑诊异位妊娠进行了经阴道Ｂ超检查，并结合血β－ＨＣＧ检测，提高了早期异位妊娠诊断的准确率，现将资料完整９６例总结如下．１临床资料１．１资料来...

酿造大麦品种及纯度的鉴定

在酿造工业中,大麦的品种对于啤酒质量有着极其重要的影响,目前我国每年需进口大量的大麦,而对其品种和纯度却没有行之有效的方法来进行鉴别.国外已对此进行了大量的研究,建立了多种准确的鉴别方法.其中以基因组分析法和蛋白质电泳法最为可行,它们都具有感官鉴别所没有的准确性和可信性,是将来大麦品种鉴定的首选方法.

啤酒污染菌酒花抗性基因型的多样性分析

为了评价采用酒花抗性基因horA和horC作为分子标记,快速检测和鉴定具有腐败能力的啤酒污染菌的准确性,对来自5家工厂的53株啤酒污染菌基因型和表型进行比较分析,包括M13-PCR指纹、horA/horC的PCR扩增、菌株的酒花抗性和啤酒腐败能力。M13-PCR指纹的聚类分析表明不属于同一菌种的指纹相似性一般小于70%,同菌种不同菌株之间的指纹也存在较大差异,因此53株菌株之间存在一定的个体差异。表型的比较分析表明,酒花抗性或腐败性较强的菌株,horA/horC检测结果一般为阳性,针对这一类菌株其检测准确性较高。然而,部分弱酒花抗性或无腐败能力的菌株,horA/horC检测结果也为阳性,其中无腐败能力的菌株的假阳性检出率达到了78.6%;部分弱腐败能力菌株的horA/horC检测为阴性,即假阴性率为28%。2株具有较强酒花抗性的菌株的horA/horC检测为阴性,表明可能存在新的酒花抗性机制。令人感兴趣的是,通过菌株间的比较分析表明horA/horC在L.plantarum中具有较高的保守性。以上研究结果表明,horA/horC作为单一的分子标记,难以准确地检测和鉴定所有啤酒污染菌的酒花抗性和腐败性。

梯度平板法定量分析啤酒污染细菌的四氢异-α-酸抗性

快速定量分析啤酒污染细菌的酒花抗性和腐败啤酒能力,对啤酒的工业生产具有重要的应用价值。该研究首先优化并建立了基于酒花苦味物质四氢异-α-酸梯度平板的定量分析方法,并通过该方法定量分析23株啤酒污染细菌的四氢异-α-酸最小抑制浓度、比较分析液体培养基中的生长情况和菌株的腐败啤酒能力。研究结果表明,酒花苦味物质四氢异-α-酸的浓度梯度平板法,能够简单快速并定量分析啤酒污染细菌的四氢异-α-酸抗性,同时能够评估菌株的腐败啤酒能力。

电灼治疗女阴部尖锐湿疣110例

我科于1990年2月至1990年7月,应用高频电灼器直接电灼法,治疗女阴部尖锐湿疣110例,取得显著疗效,现介绍如下. (一)临床资料年龄16～19岁7例,20～30岁71例,31～39岁23例,40～49岁7例,50岁以上2例.病损部位:外阴、阴道、宫颈均累及3例,占2.7%;外阴部累及77例,占70%;阴道累及12例,占10.9%;宫颈累及7例,占6.4%;肛周累及11例,占10%.

啤酒口感品评的模糊综合评价法

本研究应用模糊数学的"隶属函数"描述不同啤酒口感协调性特征,通过隶属度确定其质量等级。很大程度克服了以往简单评分法给结果造成的主观性和片面性,具有较高的准确性和公正性,使评定结果更趋于合理性和实用性,为啤酒质量稳定与提高提供保障。

Survivin、Bcl-2、HPV 16/18在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中的表达及临床意义

目的:研究Survivin、Bcl-2、HPV16/18在宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌中的表达,探讨三者与宫颈癌的相关性。方法:采用原位杂交法检测正常宫颈组织(对照组)、CIN(CIN组)和宫颈癌(宫颈癌组)中Survivin mRNA及HPV16/18DNA的表达。采用免疫组织化学法检测Bcl-2蛋白在各组中的表达。结果:①Bcl-2蛋白、HPV16/18DNA、Survivin mRNA的阳性率在对照组、CIN组、宫颈癌组中逐渐升高,差异有高度统计学意义(P=0.000)。②Bcl-2蛋白和Survivin mRNA在宫颈癌的组织分化程度中,低分化组的表达高于高、中分化组(P<0.01),ⅡB～Ⅲ期显著高于Ⅰ～ⅡA期(P<0.05);Survivin mRNA在淋巴结转移组中高于无淋巴结转移组(P<0.01);Survivin mRNA及Bcl-2与组织类型及肿块类型无关(P>0.05);HPV16/18感染与宫颈癌组织类型、组织分化程度、临床分期、肿块类型均无关(P>0.05)。③Survivin与Bcl-2及HPV16/18在宫颈癌中的表达均呈正相关。结论:Survivin、Bcl-2及HPV16/18在宫颈癌中有异常表达。三者可能与宫颈癌的发生发展有密切关系。