基于“肾主藏精”再认识论肿瘤表观遗传修饰

肾主藏精,精含先天与后天,本文基于肾主藏精其本质为藏后天之精的再认识,结合与后天环境因素密切相关的表观遗传修饰、肿瘤微环境(TME),剖析肾主藏精与表观遗传修饰的生理病理联系,将肾精失守与重塑表观遗传修饰、营造TME相接轨,为中医理论现代化深入研究提供思路和借鉴。

不对称还原苯乙酮的酵母菌株筛选与分子鉴定

利用苯乙酮作为模式底物,对145株菌株进行初筛和复筛,获得一株具有高效立体选择性的酵母菌株YS6-2,能够不对称还原苯乙酮生成(S)-1-苯基乙醇。在苯乙酮浓度为70mmol/L时,底物的初始转化率达26.8%,产物(S)-1-苯基乙醇的对映体过量值为98.8%。基于形态学、生理生化特征、18SrDNA和26SrDNAD1/D2区域的分析表明,YS6-2为胶红酵母(Rhodotorula muci-laginosa)。

四神丸含药血清抑制人结肠癌细胞有氧糖酵解的效应及机制

目的:探究四神丸含药血清对人结肠癌细胞HCT116有氧糖酵解的影响和作用机制。方法:采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测四神丸含药血清(2.5%、5%、10%)处理结肠癌HCT116细胞24、48、72 h的细胞活力;微量法检测细胞培养液中乳酸浓度和细胞内葡萄糖含量,以及己糖激酶(HK)和果糖-6-磷酸激酶(PFK)活性;实时荧光定量聚合酶链式反应(Realtime PCR)检测葡萄糖转运酶1(GluT1)mRNA含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测GluT1、甲基转移酶样3(MettL3)蛋白表达;免疫荧光染色法检测细胞GluT1表达;比色法检测N6-甲基腺苷(m^(6)A)RNA甲基化水平。结果:与空白组比较,2.5%、5%、10%四神丸含药血清24 h对HCT116细胞活力均无明显影响,10%四神丸含药血清在48 h可明显抑制HCT116细胞活力(P<0.05),故后续实验选用10%四神丸含药血清,给药时间为48 h。与空白组比较,10%四神丸含药血清能够降低乳酸生成(P<0.05),并下调细胞对葡萄糖摄取(P<0.05),并降低糖酵解关键限速酶HK和PFK的活性(P<0.05),同时四神丸含药血清还可降低GluT1蛋白(P<0.01)及其mRNA表达(P<0.05),并减少表达GluT1的细胞比例(P<0.01)。与空白组比较,四神丸含药血清还能降低MettL3蛋白含量(P<0.05)及m^(6)A RNA甲基化水平(P<0.01)。结论:四神丸能够抑制结肠癌细胞糖酵解,其作用机制可能与降低MettL3过表达,抑制m^(6)A RNA甲基化,下调GluT1及细胞内HK、PFK等有氧糖酵解相关酶的活性有关。