扭角羚肺炎克雷伯氏菌的分离鉴定

本试验旨在报告四川省野生扭角羚自然生存过程中致病性细菌的检测及生物学特征。试验对发病死亡扭角羚病变组织进行细菌学检查及分离,对分别从肝脏、脾脏和肺脏分离得到的4株优势菌进行形态特征、生化特性和16SrDNA分子鉴定,判定为肺炎克雷伯氏菌。这4株菌对供试小白鼠均有致病性。测其LD50,分别为2.9×107、2.9×107、4.5×107和1.1×108 CFU/只。4株分离菌对供试的先锋霉素等敏感,对阿米卡星等中度敏感,对红霉素等耐药。推测这4株肺炎克雷伯氏菌是导致扭角羚死亡的主要病原菌。

圈养林麝养殖场内铜绿假单胞菌的分布及其耐药性分析

从陕西镇坪、四川宝兴两个林麝养殖中心共采集124份样品进行铜绿假单胞菌的分离鉴定,并采用微量肉汤稀释法检测其耐药情况。结果显示,共分离出60株铜绿假单胞菌,其中镇坪34株,宝兴26株。两个养殖场铜绿假单胞菌检出率由高到低依次为伤口脓汁>死亡林麝组织器官>伤皮>鼻拭子>土壤>粪便>尿液>空气,且镇坪比宝兴的总检出率高。所分离的60株铜绿假单胞菌耐药表型趋于一致,都对阿米卡星、庆大霉素、环丙沙星敏感,对亚胺培南中等敏感,对多西环素、四环素、磺胺异恶唑严重耐药。

不同生境大熊猫源肠球菌耐药性分析

目的为了了解大熊猫源肠球菌耐药性发展和流行现状,为大熊猫源细菌耐药性监测体系的建立和大熊猫细菌性疾病的控制奠定基础,同时为临床合理选用抗菌药物提供参考。方法本试验采用临床实验室标准化协会推荐的纸片法,对从不同生境来源的254份大熊猫粪便样品分离鉴定出的11种大熊猫源肠球菌共计381株进行21种抗生素的药物敏感试验。结果在381株大熊猫源肠球菌中,对青霉素、先锋霉素V、链霉素耐药率均在10%以上,其余抗生素的耐药率均低于10%,未发现有对恩诺沙星、复方新诺明、万古霉素、庆大霉素、替考拉宁耐药的菌株;不同种类的大熊猫源肠球菌对同一种抗生素的耐药率不同;同一种大熊猫源肠球菌对不同抗生素的耐药率也有差异;不同生存方式来源的大熊猫源肠球菌耐药情况各有不同,但耐药最严重的均为粪肠球菌;多重耐药主要以1～3重耐药为主。结论大熊猫源肠球菌对大部分抗生素产生了耐药性,整体和多重耐药情况较轻微,耐药性差异主要体现在肠球菌的种类上,大熊猫的生存环境和方式等对其影响相对较小,尤其是圈养大熊猫、野化大熊猫和野生大熊猫之间只有很细微的差别,可以从侧面反映出目前给予圈养大熊猫使用的抗菌药物较为科学合理,提示在治疗肠球菌感染时,应根据分离株的耐药特点和药敏试验结果合理选用或及时更换抗生素,以减少耐药菌株的产生和耐药基因的传播。

四川宜宾地区规模猪场腹泻仔猪大肠杆菌耐药性监测及血清型鉴定

为有效监测四川宜宾地区规模化猪场仔猪大肠杆菌耐药性及优势血清型变化,对采自该地区腹泻仔猪的38株大肠杆菌进行药物敏感性检测和O抗原血清型鉴定。结果表明,菌株对14种药物存在不同程度的耐药性,其中对氨苄西林、林可霉素、四环素和磺胺嘧啶极度耐药,耐药率分别为100%、100%、92.11%、89.47%;敏感性最高的是庆大霉素,敏感率为68.42%,氧氟沙星、丁胺卡那、环丙沙星和氟苯尼考相对比较敏感;所有菌株至少对4种药物耐受(4耐),最高达14耐。通过血清型鉴定,确定了15种血清型,共27株大肠杆菌,其中以O60、O101和O8为优势血清型。

仔猪大肠杆菌病病原分离鉴定及自家苗的制备

试验以腹泻仔猪肠道为试验材料,对其肠道内容物进行细菌学检查及分离,对从肠道内容物分离得到的优势菌进行形态特征、生化特性和16S r DNA分子鉴定,判定为大肠杆菌。此菌株对供试的小白鼠有致病性,测其LD50为1.26×107 CFU/只。菌株对供试的氧氟沙星等敏感;对庆大霉素等中度敏感;对林可霉素等耐药。推断此菌株是导致仔猪腹泻致死的主要病原菌。利用病死猪肠道制作自家苗,给产前母猪注射,其后代仔猪腹泻率大幅降低。研究弄清了四川某猪场仔猪腹泻的原因,减少了猪场的经济损失,也为仔猪大肠杆菌病的预防和治疗提供了一定参考,为临床早期合理用药提供一定借鉴。

某规模化猪场猪瘟、蓝耳病及伪狂犬病抗体检测与分析

为应用酶联免疫分析(ELISA)试剂盒,分别对某规模化猪场送检的70份血清进行猪瘟病毒抗体、猪蓝耳病病毒抗体、猪伪狂犬病病毒g B抗体检测和猪伪狂犬病病毒g E抗体检测。结果显示,上述4种试剂盒检测,阳性率分别为72.9%、90%、58.6%和1.4%。据此对该猪场免疫状况进行了分析。

猪圆环病毒2型和副猪嗜血杆菌混合感染的实验室诊断及细菌耐药性分析

2014年8月,四川成都某猪场断奶仔猪表现下痢,眼睑水肿,进行性消瘦,生长迟缓,呼吸困难,呈明显的腹式呼吸,皮肤出现紫红色隆起病变,中央部位还有一个黑点。病死猪剖检可见腹股沟淋巴结肿大出血,腹腔粘连十分严重且有纤维素性渗出;肺脏外观灰色至褐色呈斑驳状并伴有出血,间质增宽、水肿,对称性肉变;肾脏苍白有出血点;脾梗死、质脆;肠道鼓气出血,肠系膜出血;关节肿大,关节液增多。

猪致病性大肠杆菌的分离鉴定与耐药性分析

为有效监测四川巴中某猪场病死仔猪大肠杆菌的耐药性和致病性,对从该猪场病死仔猪的内脏和组织中分离得到的13株大肠杆菌进行了药物敏感性检测和动物致病性试验。结果表明,菌株对12种药物均存在不同程度的耐药,其中,对强力霉素、氟苯尼考和红霉素等7种药物的耐药率均达100%;对阿米卡星的敏感性最高,为69%。动物致病性结果显示,3号小鼠注射对应菌液16 h内死亡,剖检可见多个脏器组织均有出血;仔猪注射死亡小鼠分离纯化液后都没有死亡,但不同猪只出现不同的临床病理变化。该猪场大肠杆菌耐药性较为严峻,建议制定合理的用药方案实行交替用药,避免长期使用同一种药物。

猪瘟抗体检测试纸条与ELISA试剂盒的检测结果比对试验

四川成都某生物技术有限公司研发了一款检测猪瘟抗体的免疫胶体金试纸条,为检验此产品,选取美国产、武汉产ELISA试剂盒与其做对比试验,比较猪瘟抗体检测的特异性、敏感性和符合率。结果表明:成都产试纸条同批次产品性能稳定,总符合率与美国产、武汉产ELISA试剂盒间差异不显著。

犬瘟热病毒H基因变异及其细胞受体研究进展

犬瘟热(CD)是由犬瘟热病毒(CDV)引起的一种急性、高度接触性传染病。通过对CDV血凝蛋白(H)基因序列分析证实,野生动物暴发CDV野毒株感染与CDV H蛋白变异有极大关系。H蛋白主要影响CDV的抗原性、宿主范围和组织嗜性,其高变异率使CDV种间传播现象加剧,并扩大CDV宿主范围至灵长类猕猴。目前已发现2种CDV的细胞受体,即信号淋巴细胞激活因子(SLAM)和黏连蛋白4(PVRL-4/nectin-4),PVRL-4是2011年新发现的上皮细胞受体。SLAM和PVRL-4受体在哺乳动物体内的广泛存在为解释CDV对多种肉食动物具有易感性这一现象提供理论基础。论文对CDV H蛋白功能和其高变异率进行了概述,并结合H蛋白变异和其2个受体在CDV感染中的作用,以及对CDV宿主范围扩大现象进行阐述。

GA306浆纱机新工艺分析

介绍了ＧＡ３０６型浆纱机的结构特征，通过分析老机型的一些不足，阐述了该机设计中所采用的新工艺，认为用电脑控制确保上浆质量是该机型的最大特点。

四川省山羊皮下脓肿的流行病学调查及病原体分析

为调查达州、广安、攀枝花、巴中、资阳等四川省主要山羊产业区内的山羊皮下脓肿病的流行病学和致病病原,并对临床分离菌进行药物敏感性评价,以指导合理使用抗生素。在厌氧和常规培养条件下从临床病例中分离细菌,结合细菌的菌落形态和细菌生化特性分析,通过16Sr RNA基因序列分析进行细菌鉴定;测定分离菌的半数致死量（LD50）以判定其毒力强弱;使用CLSI推荐的K-B法进行药敏试验。结果表明,该病以1周岁左右的母山羊在春秋季发病为主,发病率为8.36%-11.27%,平均发病率为9.44%;分离的主要致病菌是伪结核棒状杆菌和金黄色葡萄球菌;其中伪结核棒状杆菌xw2株的LD50为107.5CFU/m L,金黄色葡萄球菌xj5株的LD50为109.7CFU/m L;药敏试验发现这两种分离菌的耐药现象比较普遍,对青霉素和庆大霉素的耐药现象比较严重,但20株伪结核棒状杆菌菌株对环丙沙星、利福平、头孢噻污的敏感率均≥85.00%,14株金黄色葡萄球菌菌株对氨苄西林、左氧氟沙星、利福平的敏感率均≥85.71%。

致林麝猝死的病原豚鼠气单胞菌的分离与鉴定

为了确定引起两头圈养林麝猝死的主要病原菌,确定合理的临床用药和预防方案,本研究采用血平板对死亡林麝的心、肝、脾、肺、肾等组织器官中可疑病原进行分离,通过菌落形态学观察、革兰染色镜检、16S rDNA序列测定分析、生化试验、致病性试验及药敏试验(DST)进行鉴定。通过16S rDNA基因的系统进化研究发现,从猝死林麝体内分离的细菌与豚鼠气单胞菌S5-3株的同源性高达99.9%,结合生化试验结果进行综合分析,确定致林麝猝死的致病菌为豚鼠气单胞菌。药敏试验结果显示,该菌株对氨苄西林、卡那霉素、链霉素、环丙沙星、头孢哌酮较敏感,对头孢他啶、哌拉西林、庆大霉素、复方新诺明、四环素为中敏,对红霉素、青霉素、利福平、头孢拉定、呋喃妥因存在多重耐药性;通过PCR检测分析,发现该菌株携带耐药基因bla-OXA和bla-PER;动物试验表明,给予小鼠接种3.9×10~8 CFU/0.3 m L的剂量会导致小鼠全部死亡,说明该菌株具有较强致病性。本研究结果对林麝养殖生产中临床用药具有一定的指导意义。

圈养林麝铜绿假单胞菌的分离鉴定及耐药性和病原特性分析

【背景】铜绿假单胞菌感染所致的化脓性疾病是困扰林麝驯养的重要因素,是一类较难防治的细菌性疾病,目前尚无疫苗可用来预防该病。【目的】研究林麝源铜绿假单胞菌的感染现状和分子流行病学规律。【方法】对2014年10月至2015年10月四川宝兴和陕西镇坪两个林麝养殖中心发病林麝中铜绿假单胞菌进行分离鉴定,并对其耐药情况进行分析,利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型技术研究分离菌的PFGE指纹图谱,探究其流行病学趋势,并对部分菌株的致病性进行分析。【结果】分离得到60株铜绿假单胞菌,其中34株来自镇坪,26株来自宝兴。耐药结果表明:60株林麝源铜绿假单胞菌对17种抗菌药物呈现不同程度耐药性,不同地区和不同样本源间分离的铜绿假单胞菌对17种抗菌药物的耐药性总体趋于一致,多重耐药情况严重,以5耐、6耐为主。分型结果显示:60株铜绿假单胞菌PFGE图谱的相似性为49.1%-100%。经聚类分析得到A-O共15种基因簇,其中优势基因簇为C、E、G、J。致病性结果表明,流行菌株的致病力强弱依次为:动物源菌株>环境源菌株,且主要流行菌株(基因簇E、F、J)的致病力大于其余菌群。【结论】铜绿假单胞菌在两地区具有水平传播的途径,本研究可为跨地区林麝化脓性炎症的防控提供理论依据。

犬细小病毒实时荧光环介导等温扩增检测方法的建立

参照GenBank中犬细小病毒(CPV)VP2基因保守区域序列设计合成特殊的内、外引物,在扩增反应体系中加入荧光染料SYBR GreenⅠ,通过恒温荧光检测仪Deaou-308C扩增检测,建立了一种快速检测CPV的实时荧光环介导等温扩增(LAMP)方法。结果显示,这种方法对CPV具有特异性的扩增反应,对照病毒核酸的扩增结果均为阴性。灵敏度试验最低可检出3.72 copies/μL的病毒核酸。重复性试验结果表明,其检测重复性良好。对30份临床宠物犬的粪便样品进行检测,与免疫胶体金检测试纸方法进行比较,符合率为90%。将本方法初步应用于大熊猫粪便中犬细小病毒的检测,结果表明,从大熊猫基地采集的84份粪便样品中有16份为细小病毒阳性,阳性率为19.0%。本方法在63℃下恒温45 min可以完成检测,操作简单、灵敏度高、特异性强,通过恒温实时荧光检测仪可实时检测及自动判读检测结果,对大熊猫的早期诊断非常重要。