基于RPA-CRISPR/Cas12a技术快速检测犬猫皮肤癣菌方法的建立

旨在建立重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA)结合CRISPR/Cas12a技术的荧光检测方法,以快速、灵敏、可视化检测犬猫皮肤癣菌。以犬小孢子菌、石膏样小孢子菌及须毛癣菌为研究对象,针对真菌内转录间隔区,设计并合成特异性RPA引物和CRISPR RNA(crRNA),建立可同时或分别检测上述皮肤癣菌的荧光检测方法,并评价其检测灵敏度,通过检测临床样本评价本检测方法的敏感性和特异性。结果表明:RPA-CRISPR/Cas12a在37℃、总反应时间30 min的条件下,对三种皮肤癣菌的检测灵敏度可低至单拷贝。对24份临床样本进行检测,以真菌培养和菌落测序结果作为标准,使用可同时识别犬小孢子菌、石膏样小孢子菌及须毛癣菌的皮肤癣菌crRNA(dermatophyte crRNA,crRNA-DM)和可特异性识别犬小孢子菌的犬小孢子菌crRNA(Microsporum canis crRNA,crRNA-Mc)参与RPA-CRISPR/Cas12a反应时,敏感性和特异性均为100%。RPA-CRISPR/Cas12a技术可同时和分别检测犬小孢子菌、石膏样小孢子菌及须毛癣菌,所需时间短,结果可视化,敏感性和特异性高,无需昂贵仪器,适合临床快速诊断。

猫瘙痒性皮肤病病例临床特征与治疗效果回顾性分析

本研究旨在总结猫瘙痒性皮肤病临床特征及常见治疗方案的疗效,同时调查奥拉替尼在诊断为猫过敏性皮肤病病例中的应用情况,并与泼尼松龙进行疗效对比分析。本研究收集了自2021年1月—2022年3月前往中国农业大学动物医院就诊的符合要求的138例病例,记录患病猫的基本信息、临床特征、治疗方案及疗效等信息,进行统计学分析。结果显示:在此138例病例中,占比最高的品种是英国短毛猫(27.54%),雄性与雌性的比例为1.42∶1,平均就诊年龄为2.84岁。标签外使用奥拉替尼治疗猫过敏性皮肤病的有效率虽然稍逊于泼尼松龙,但针对有效病例而言,其疗效显著(P<0.05),且两者对症状的改善程度无显著差异(P>0.05)。本研究表明,猫瘙痒性皮肤病无明显品种和性别倾向,发病多集中于青年时期,最常见的病灶类型为抓痕,最常见的病灶部位为头颈部。在猫瘙痒性皮肤病的病因诊断中,猫过敏性皮肤病占主导地位,亟需引起重视。在治疗方面,视情况联合用药效果更佳。基于奥拉替尼和泼尼松龙的作用机理,前者的安全性要高于后者,故可以尝试使用奥拉替尼替代泼尼松龙对猫过敏性皮肤病进行瘙痒控制,但猫用奥拉替尼属于标签外使用,因此仍需进一步研究奥拉替尼对猫的安全性及使用剂量。