基于p53/SLC7A11/GPX4信号轴探讨七叶内酯诱导小鼠乳腺癌4T1细胞铁死亡的作用机制

目的:探讨七叶内酯对小鼠乳腺癌4T1细胞铁死亡的影响及其作用机制。方法:对七叶内酯与p53、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)进行分子对接,并绘制Kaplan-Meier和time ROC曲线。将4T1细胞分为对照组、1/2 IC_(50)组、IC_(50)组、2 IC_(50)组、erastin组和卡培他滨组。采用CCK-8法观察4T1细胞活力情况,筛选药物干预浓度;电镜观察4T1细胞线粒体形态,评估线粒体损伤情况;试剂盒检测4T1细胞活性氧(ROS)、Fe2+、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和GPX4的水平;采用划痕和Transwell小室实验检测4T1细胞侵袭和迁移能力;Western blot检测p53、SLC7A11、GPX4和酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)的表达水平。结果:与对照组相比,七叶内酯1/2 IC_(50)、IC_(50)和2 IC_(50)组细胞活力,GSH和GPX4表达水平,侵袭和迁移能力,以及SLC7A11和GPX4蛋白表达水平均降低,细胞线粒体变小,膜密度增高,嵴减少(P<0.05),Fe2+、ROS和MDA水平及p53和ACSL4蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:七叶内酯可促进4T1细胞铁死亡,其作用机制可能与p53/SLC7A11/GPX4信号通路相关。

药食同源中药治疗胃癌癌因性疲乏的用药规律

目的:通过对文献的数据挖掘,初步探讨干预胃癌癌因性疲乏(CRF)的药食同源中药用药规律,并结合CRF中医病机及现代药理学研究进行分析。方法:检索国家知识基础设施数据库(CNKI)、中国学术期刊数据库(CSPD),筛选自建立数据库开始至2022年4月10日期间治疗胃癌CRF的临床文献,借助Microsoft Excel 2021及SPSS Modeler 26.0统计软件,以2018年卫健委公布的110种药食同源中药为参考,对收集文献所涉及的药食同源中药进行频数频率、性味归经、药效分类、关联规则分析、聚类分析,根据统计结果探讨药食同源中药干预胃癌CRF的用药规律。结果:收集文献中共有药食同源中药43味(占2018年卫健委所公布110种药食同源中药的39.09%),出现频数376次(占文献全部165味中药出现频数的49.41%);频数≥10次的药食同源中药共14味,按频数降序排列依次为黄芪、茯苓、当归、甘草、党参等;干预胃癌CRF的药食同源中药四气以平、温为主,五味以甘味药为主,归经以归脾经最多;发掘出21组治疗胃癌CRF的药食同源中药组合,支持度最高的组合是黄芪-当归;聚类分析提取获得3个核心聚类群。结论:药食同源中药干预胃癌CRF以健脾和胃为基本治则,辅以补肺滋肾,养血生津,理气燥湿为法,常用药食同源中药为黄芪、茯苓、当归等,可将这些药食同源中药用于胃癌CRF的治疗及保健食品的开发中。

基于“寒、热、饮”探讨张仲景对外感咳喘辨治经验

《伤寒杂病论》中对外感咳喘的论述十分丰富,张仲景围绕“寒、热、饮”三大因素,为外感咳喘的辨治提供了参考标准。本文对相关条文进行梳理后发现,由外感引起的咳喘有10个证型,围绕其病因病机进行分析,发现张仲景用药,详辨邪之性质、轻重,配伍及剂量灵活变化。外寒者以麻黄为重,轻重不同,配伍发汗散寒药也有差异;兼有里热者以石膏为重,轻重不同剂量也随之变化;若内有饮者主以温化,重者以逐水饮,或痰饮上逆者,加下气化痰药;若见正气不足者则补益正气可用人参。张仲景用药权衡各因素轻重缓急,调整药物配伍及剂量,辨证细致入微,思路清晰。

态靶理念下基于数据挖掘探讨中药干预骨转移的靶方靶药

目的态靶理念下,通过数据挖掘技术探讨中药干预骨转移的靶方靶药,为恶性肿瘤骨转移的临床治疗提供参考。方法检索中国知网、维普数据库、万方数据库,构建中医内服中药处方数据库;通过药物频次频率、性味归经、关联规则及复杂网络图分析数据得到核心靶药组;通过聚类分析得到聚类靶方。结果共纳入176首方,共有药物247味,甘草、黄芪、熟地黄、骨碎补、白芍、茯苓、白术、补骨脂、蜈蚣、白花蛇舌草为频次前10味药,以补虚药为主,性味归经中以温、寒、平,甘、苦、辛,肝、脾、肾为主。关联规则33条,白术-茯苓-甘草药组综合评分较高。结合复杂网络图得到7味药的核心靶药组为甘草、黄芪、熟地黄、白术、茯苓、补骨脂、骨碎补。聚类分析得到10组聚类靶方。结论骨转移以虚态为主,兼有实态,实态分为寒、瘀、痰三态,治疗当扶正祛邪,攻补兼施,补肾健脾调肝与散寒祛痰化瘀并举。

双硫仑联合铜在肿瘤耐药治疗中的应用及机制研究进展

目前肿瘤耐药性不断发展成为癌症治疗面临的主要问题。金属元素的应用越来越广泛,尤其是近年来铜死亡的发现,让我们重新聚焦铜在肿瘤治疗上的应用。而铜离子载体与铜联合使用可以提高细胞内Cu水平并发挥抗癌活性。其中双硫仑(disulfiram,DSF)成本低,高效且安全,是一种有效的铜离子载体,已被证明可以促进癌细胞死亡,包括铜死亡。DSF可以与二价铜离子螯合,产生二乙基二硫代氨基甲酸铜(Cu[DDC]2)复合物,用来抗肿瘤,还可以调节肿瘤多药耐药性(multidrug resistance,MDR)。近期双硫仑联合铜在国外展开了丰富的临床试验,并验证了其疗效及安全性。该文就双硫仑联合铜抗肿瘤耐药的应用及机制研究进展进行探讨,为肿瘤耐药的干预提供借鉴。

“益气温经通痹”中药外洗治疗化疗所致周围神经病变经验浅析

化疗所致周围神经病变(chemotherapy-induced peripheral neuropathy,CIPN)的发生率逐年增多,严重影响患者的生存质量及化疗治疗效果。中医药治疗CIPN具有极大的潜力,但缺乏以病机为核心的理论指导。本文从“虚、毒、瘀”角度出发,提出CIPN的病机特点为本虚标实,以气血亏虚为本,毒瘀互结为标,二者互为因果,共同致病;总结其治疗思路重点在于“益气温经通痹”,采用中药外洗的方式治疗CIPN,安全有效,并附验案一则,以期为CIPN的治疗提供新思路。

基于P53/xCT/GPX4通路探讨实脾消积方干预糖代谢异常肝癌细胞铁死亡的机制研究

目的:探讨实脾消积方(SPXJF)对糖代谢异常下肝癌细胞体外模型铁死亡的作用及机制。方法:使用高胰岛素干预HepG2细胞建立糖代谢异常肝癌细胞模型,并采用葡萄糖氧化酶法检测葡萄糖含量和CCK-8法检测抑制率验证模型是否成功;设立对照组、模型组、二甲双胍组和SPXJF低、中、高剂量组,检测各组葡萄糖消耗量、细胞活力和细胞增殖、迁移、侵袭能力;检测细胞谷胱甘肽(GSH)、活性氧簇(ROS)及丙二醛(MDA)水平以评估脂质过氧化水平;Western blot法检测铁死亡相关蛋白P53、溶质载体家族7成员11(SLC7A11/xCT)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达。结果:与对照组相比,糖代谢异常肝癌细胞葡萄糖消耗量显著降低(P<0.05),细胞活力和增殖能力无显著差异(P>0.05),但迁移和侵袭能力显著提高(P<0.05),而二甲双胍及SPXJF能明显抑制糖代谢异常下肝癌细胞活力以及增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05);模型组GSH水平高于其他组,而ROS和MDA水平低于其他组,此外,模型组P53表达下调,xCT和GPX4表达下调,而加入SPXJF及二甲双胍处理后上述指标表达逆转(P<0.05)。结论:SPXJF能通过P53/xCT/GPX4通路诱导糖代谢异常下肝癌细胞铁死亡。

固脾消积饮对肝星状细胞共培养条件下HepG2细胞氨基酸代谢和能量代谢的影响

目的 观察固脾消积饮对人肝星状细胞LX-2共培养条件下肝癌细胞HepG2氨基酸代谢和能量代谢的影响。方法 建立HepG2细胞和LX-2细胞共培养体系,与单独培养的HepG2细胞同时设置对照组、空白血清组、中药血清组(固脾消积饮含药血清)和阳性药组(顺铂)。干预24 h后,CCK8法检测细胞增殖活力,DAPI染色观察细胞状态,ELISA检测细胞上清液三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、丙酮酸和葡萄糖含量,试剂盒检测细胞丙二醛(MDA)含量和糖酵解速率,高效液相色谱法检测细胞上清液氨基酸含量,Western blot检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)α表达。结果 与同一培养体系对照组比较,10%、20%中药血清组及阳性药组单独培养和共培养HepG2细胞增殖活力降低,上清液TG、TC、葡萄糖含量减少,丙酮酸含量增加,细胞糖酵解速率降低,MDA含量增加,17种氨基酸含量减少(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果显示,10%中药血清能升高单独培养和共培养HepG2细胞p-AMPKα/AMPKα比值。结论 固脾消积饮能调节肝星状细胞共培养条件下HepG2细胞氨基酸代谢和能量代谢,其机制与激活p-AMPKα通路有关。

基于铁死亡相关基因的生物信息学分析及结肠癌预后模型构建

目的筛选结肠癌(CC)差异预后铁死亡基因(CFRGs)并构建CC预后模型。方法通过癌症基因组图谱(TCGA)、FerrDb数据库获取相关数据,采用生物信息学方法筛选出CFRGs;通过TCGA数据库对所筛选出的CFRGs进行表达差异分析;采用Kaplan-Meier曲线与时间依赖性ROC曲线对所筛选出的CFRGs进行预后分析;采用单因素和多因素Cox回归分析构建CFRGs Nomogram图,并采用Calibration分析验证该模型的预测能力。结果共获取CFRGs 3个,即ALOXE3、CRYAB、CDKN2A;其中ALOXE3、CDKN2A表达上调,CRYAB表达下调。ALOXE3、CRYAB、CDKN2A高表达的CC患者生存结局均较差。联合3个基因的风险评分系统公式为0.172×ALOXE3_(exp)+0.126×CRYAB_(exp)+0.171×CDKN2A_(exp)-0.772,其预测CC患者1、3、5年生存的AUC分别为0.642、0.643、0.593。以年龄、性别、风险评分为因子构建CFRGs Nomogram图,预测能力较好(C指数为0.651);Calibration分析显示其预测的1、3、5年生存率与理想线段吻合良好。结论ALOXE3、CRYAB、CDKN2A与CC患者的生存预后显著相关,联合3个基因构建的风险评分系统和以年龄、性别、风险评分为因子构建的CFRGs Nomogram图均有良好的预测效能。

益气化瘀解毒法的应用及其抑制“炎-癌”转化作用探讨

恶性肿瘤严重威胁人们的生命健康和生活质量,寻求更有效的治疗措施预防不良反应,提高治疗效果一直以来是医学研究界中热衷的话题。研究表明,慢性炎症是肿瘤发生的潜在因素,有效控制和治疗慢性炎症是预防肿瘤的措施之一。中医药在肿瘤防治中具有独特的优势,联合西医常规治疗亦能发挥减毒增效的作用。该课题组基于与肿瘤发生发展相关的慢性炎症和部分恶性肿瘤的常见基本病机——“虚、瘀、毒”互结,提出益气化瘀解毒法的治疗法则,并对近年来有关益气化瘀解毒法治疗慢性炎症和肿瘤的临床应用及研究进行综述,同时探讨其抑制“炎-癌”转换的可能机制,为临床治疗提供参考。

从“癌毒驱动-态靶同调-阴阳复衡”探讨肿瘤相关负性情绪干预模式

负性情绪是影响恶性肿瘤形成、发展及预后的重要因素。“癌毒驱动”和七情郁结与肿瘤发生、发展关系密切,曾普华教授结合“癌毒”理论、“态靶医学”理论及阴阳学说,从“癌毒驱动-态靶同调-阴阳复衡”探讨肿瘤相关负性情绪干预新策略和新方法,即运用中药方剂、药膳、针灸、耳穴压豆、推拿、传统功法(如六字诀、五禽戏、八段锦、易筋经、太极拳)和五行音乐等传统中医治疗手段针药并举、内外兼治“、杂合以治”,旨在实现和完善对肿瘤患者的身心全程管理和全面康复。

基于靶方/靶药/靶标关联分析探讨肺癌脑转移之中药配伍规律

目的通过数据挖掘及网络药理学手段,从靶方/靶药/靶标关联分析中医药治疗肺癌脑转移的组方用药规律,为中药治疗肺癌脑转移提供指导。方法从中国知网、万方、维普数据库中筛选出近30年有关中医药治疗肺癌脑转移的文献,把所收集的方剂录入中医传承辅助平台V2.5中,同时采用软件集成的数据分析方法进行数据挖掘,对所筛选出的方剂进行组方用药规律分析。运用TCMSP检索高频药对入脑成分,经瑞士目标预测网站获得对应靶点,与Genecards、OMIM、Disgenet数据库筛选出“肺癌”“脑转移”的靶点取交集,使用Cytoscape3.7.2构建“药物-疾病-成分-靶点”的网络图,在STRING数据库中构建关键靶点的PPI网络,并以Degree值等条件进行筛选,最终得到高频药对治疗肺癌脑转移的核心靶点的相关信息。再对关键靶点用R语言进行GO富集和KEGG通路富集分析,在KEGG网站中标记主要通路的干预位点。根据以上结果,从靶方/靶药/靶标关联分析中医药治疗肺癌脑转移的组方用药规律。结果筛选出治疗肺癌脑转移的方剂42首,其中涉及中药162味,用药频次≥8次的中药20个,出现频度≥9次的药对9组,经辅助平台分析得出演化的新处方9张。黄芪-石菖蒲作为核心药对,发现作用于肺癌脑转移的关键靶点共64个,核心靶点14个,GO功能分析发现与蛋白酪氨酸激酶信号通路、无机物反应等生物过程有关,KEGG通路富集分析出重要通路15条。结论肺癌脑转移的核心病机虚实夹杂,以虚、痰、瘀、毒为主,治疗多以益气养阴、化痰通络、活血化瘀、清热解毒为法。黄芪-石菖蒲高频药对治疗肺癌脑转移的主要靶点为EGFR、ERBB2、AKT1、STAT3、SRC、MTOR等,主要通过影响癌症的通路、EGFR-TKI的耐药性相关通路、癌症中的小分子核糖核酸、MAPK信号通路、IL-17通路、RPTKs信号通路等发挥作用。中医药治疗肺癌脑转移的靶方为桃红四物汤合三虫散加减,靶症药可选择白术、茯苓、丹参、天麻、麦冬等,靶标药可选择黄芪、石菖蒲、白花蛇舌草、猫爪草、莪术、蟾酥、壁虎等。

曾普华教授基于“癌毒驱动-态靶同调”辨治肿瘤恶液质

总结曾普华教授从“癌毒驱动-态靶同调”辨治肿瘤恶液质的临证经验。曾普华教授认为癌毒驱动、因癌致虚、损正伤形是肿瘤恶液质的核心病机,尝试建立了肿瘤恶液质的态靶同调体系。肿瘤恶液质以虚态为主,癌毒是核心病靶,炎性细胞因子和白蛋白、血红蛋白等指标可为标靶,纳差、腹胀、消瘦等为症靶。临证治疗要紧扣核心病机,强调态靶结合,从宏观调正虚之态势,微观打癌毒之病靶,以扶正培本为基本治则,同时注重抗癌解毒、化瘀散结等以泻实祛滞,邪气衰则正气渐复。

曾普华教授治疗新型冠状病毒奥密克戎变异株感染核酸转阴迟缓经验

总结曾普华教授治疗新型冠状病毒奥密克戎变异株感染核酸转阴迟缓经验。曾教授认为,奥密克戎变异株感染属中医“疫病”范畴,病性属风热夹湿,蕴久化热伤阴。初起病位在肺及膜原,中期下传阳明,肺脾同病,累及肝肾可转为重型。核酸转阴迟缓易使患者产生焦虑情绪,治疗依从性下降,增加病情转重风险。曾教授指出,核酸转阴迟缓的基本病机为正气不足、疫毒内恋,两湿相合、壅遏气机。治疗上应以疏风清热为法,兼顾利湿化浊,宣肺醒脾,固表养阴。创“古丹路1号方”,有效促进核酸转阴。

益气化瘀解毒方对人肝癌细胞MHCC97-H迁移能力及趋化因子CXCL12、CXCR4、CXCR7表达的影响

目的观察益气化瘀解毒方对人肝癌细胞MHCC97-H迁移能力及趋化因子CXCL12、CXCR4、CXCR7表达的影响,探讨其相关作用机制。方法以索拉非尼为阳性对照,CCK-8法测定益气化瘀解毒方及索拉非尼对MHCC97-H细胞增殖的作用及最佳作用浓度,划痕实验观察MHCC97-H细胞迁移能力;Western blot检测药物干预24 h后CXCL12、CXCR4、CXCR7的蛋白表达。结果益气化瘀解毒方及索拉非尼均能抑制MHCC97-H细胞生长,24 h半数抑制浓度分别为0.095 g/m L、10μmol/m L;益气化瘀解毒方及索拉非尼均有抑制MHCC97-H迁移的能力;经益气化瘀解毒方干预后,MHCC9-H细胞CXCL12、CXCR4、CXCR7蛋白表达量均下降。结论益气化瘀解毒方能抑制MHCC97-H细胞增殖及迁移,其机制可能是通过下调CXCL12/CXCR4/CXCR7趋化因子轴发挥作用。

益气化瘀解毒方含药血清对鸡胚尿囊膜血管生成的影响

目的:探讨益气化瘀解毒含药血清对鸡胚尿囊膜血管生成的影响。方法:取孵育7 d的种蛋制成CAM模型,加入益气化瘀解毒整方高、中、低3个剂量组的含药血清,继续孵育3 d,固定标本,拍熙,计数新生毛细血管数目。结果:高、中、低剂量组与不合药血清组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);高、中剂量组与低剂量组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);高、中剂量组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)结论:益气化瘀解毒方能抑制CAM血管新生,具有抗血管生成作用。

从麻黄汤、桂枝汤的应用探讨《伤寒论》顾护正气的思想

外感病是临床常见病,外感风寒为其主要发病原因,麻黄汤和桂枝汤是治疗风寒外感的主方,二者同为辛温解表剂,《伤寒论》中多条条文论述二者的应用。本文通过《伤寒论》中对麻黄汤和桂枝汤应用条文的分析,探讨其顾护正气、祛邪而不伤正的思想,为临床外感病的治疗提供借鉴。

益气化瘀养阴解毒方药物血清对人肺癌A549细胞增殖及周期的影响

目的观察益气化瘀养阴解毒方药物血清对人肺癌细胞A549增殖及周期的影响。方法大鼠灌胃制备益气化瘀养阴解毒方药物血清,采用MTT法观察药物血清干预24、48、72 h后对细胞增殖的作用(分为空白组及药物血清高、中、低剂量组)采用流式细胞检测分析药物血清干预24 h对细胞周期的影响(分为空白组、生长液组及药物血清高、中剂量组)。结果各药物血清组与空白组之间的吸光度差异有统计学意义(P<0.05),随着作用时间的延长,其吸光度逐渐降低,抑制率逐渐增高(P<0.05)。药物血清组细胞周期G1期增多,G2期及S期减少。结论益气化瘀养阴解毒方对肺癌细胞具有抑制作用,可能与其抑制细胞分裂有关。

《临证验舌法》及其“验舌三法”浅探

《临证验舌法》为舌诊专著,其对舌诊论述简明扼要,验舌三法井井有条,切要精当,其有理、有法、有方,其方组方合理,对于临床疾病诊断治疗具有重要指导价值。值得深入研读。就书中精华略论一二,以供广大医学爱好者参考。

《伤寒论》教学模式优化改革与实践

目的:通过教学模式优化与改革,提高学生学习兴趣,从而提高学生《伤寒论》的基础理论知识的掌握水平与临床运用能力。方法:以传统教学法为基础,结合小组学习法、病案讨论法、归纳比较法、研讨分析法、PBL教学法等运用到《伤寒论》教学中,多种教学法良好结合。结果:通过教学模式的优化与改革,提高了学生的学习热情和动力,学生反映良好,教学效果得到提高,教师的教学水平也不断得到提高。结论:优化教学模式与方法,符合《伤寒论》课程教学改革需要。