药物性肝损伤患者血清抗核抗体阳性临床意义探讨

目的分析不同临床类型和血清抗核抗体(ANA)阳性的药物性肝损伤(DILI)患者临床特征和转归。方法2019年12月~2023年4月安徽医科大学第一附属医院感染病科诊治的DILI患者64例,均行肝活检术和常规血清检测,排除自身免疫性肝炎(AIH)。其中血清ANA阳性31例,ANA阴性33例。结果在本组64例DILI患者中,导致疾病的药物为中草药占59.4%,抗生素占10.9%和非甾体类药物占4.7%;肝细胞型42例(65.6%),胆汁淤积型11例(17.2%)和混合型11例(17.2%);ANA阳性组肝细胞型、胆汁淤积型和混合型分别占77.4%、6.5%和16.1%,而ANA阴性组分别为54.5%、5.2%和30.3%,无统计学差异(P>0.05);ANA阳性组血清球蛋白和Ig G水平分别为26.1(22.2,29.9)g/L和13.6(12.1,17.7)g/L,显著高于ANA阴性组【分别为22.9(21.6,25.2)g/L和11.5(9.4,12.9)g/L,P<0.05】;两组所有患者均获得肝功能指标恢复正常,其中在31例ANA阳性DILI患者中,1例最终导致药物诱自身免疫性肝炎(DI-AIH),2例考虑为免疫介导的药物性肝损伤(IM-DILI),这3例患者均加用糖皮质激素治疗后,血清ALT和AST水平恢复正常。结论大多DILI患者预后良好,但血清ANA阳性者可能发展至DI-AIH或IM-DILI,需加用皮质激素治疗,值得注意。

基于生物化学异常模式的药物性肝损伤临床病理特征分析

目的分析基于生物化学异常模式不同分型的药物性肝损伤(drug-induced liver injury,DILI)的临床病理特征及与用药类型之间的相关性。方法收集50例DILI的基本资料、临床特征、实验室指标、用药情况及肝脏穿刺病理结果;采用免疫组化EnVision法检测CK19蛋白表达;采用网状纤维染色显示肝组织网状支架。结果50例DILI中肝细胞损伤型、胆汁淤积型和混合型分别为29例、11例和10例,其中肝细胞损伤型占比最多(58%)。诱导DILI的药物合计7大类,其中排名首位的是中草药(52%)。不同种类药物诱导的DILI分型存在差异,中草药诱导的肝细胞损伤型DILI为17例(58.62%),而抗感染药物和抗肿瘤药物诱导的胆汁淤积型DILI均为3例(27.27%)。不同分型DILI的病理特征存在差异,肝细胞淤胆、羽毛样变性和小胆管胆栓形成主要出现在胆汁淤积型和混合型,而桥接坏死、亚大块及大块坏死主要见于肝细胞损伤型。结论不同分型DILI在临床病理特征上存在差异,且病理特征和用药类型具有一定的相关性,肝穿刺活检有助于提高DILI的诊治。

宏基因二代测序在肺部感染病原菌检测的应用

目的分析研究宏基因二代测序技术(mNGS)在肺部感染病原菌检测中的应用价值,为临床诊断提供理论依据。方法回顾性选取疑似肺部感染患者161例为研究对象,采集肺泡灌洗液标本、痰液、肺组织活检标本、胸水和血液同时进行常规培养、呼吸道病原体核酸检测及病原微生物mNGS检测,分别计算3种检测方法的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值,评估mNGS的临床应用价值。结果161例疑似肺部感染患者中,确定为肺部感染的有113例。入组的161例患者中,mNGS灵敏度、阴性预测值相比常规培养及呼吸道病原体核酸检测提高,差异有统计学意义(P<0.001)。mNGS的特异度虽然高于呼吸道病原体核酸检测,但差异无统计学意义。mNGS阳性预测值最高,高于呼吸道病原体核酸检测,但是与常规培养相比差异无统计学意义。结论mNGS在肺部感染病原微生物诊断中灵敏度均超过了常规培养及呼吸道病原体核酸检测,降低了诊断的假阴性率,综合评价较好;常规培养检测灵敏度低,但特异度较高;呼吸道病原体核酸检测灵敏度相较常规培养有所提高,但其特异度下降。

亚专科背景下PBL联合CBL整合教学模式在感染科住院医师规范化培训中的应用

目的探索亚专科背景下PBL联合CBL整合教学模式在感染科住院医师规范化培训中的应用效果。方法60名规培生随机分为实验组与对照组,每组30人。对照组采取LBL教学模式,实验组实施PBL-CBL整合教学模式,2组出科时均进行考核,内容包括理论知识、病例分析及技能操作3个部分;并填写满意度调查问卷,包括学习内容掌握程度、激发学习兴趣、自主学习能力、资料查阅能力、临床思维能力、分析解决问题能力、沟通交流能力及团队协作能力8项指标;对比2组的教学效果及其对教学方法的满意程度。结果实验组规培生理论知识、病例分析及技能操作考核成绩明显高于对照组(P<0.05)。实验组规培生对学习内容掌握程度、激发学习兴趣、自主学习能力、资料查阅能力、临床思维能力、分析解决问题能力、沟通交流能力及团队协作能力评分也明显高于对照组(P<0.05)。结论亚专科背景下感染科规培带教中使用PBL-CBL整合教学模式可有效提高教学质量及规培生对教学效果的满意度。

基于Lasso回归的慢性乙型肝炎发生肝硬化列线图预测模型的构建

背景慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)呈全球性流行,其进展成肝硬化的过程常被患者忽略.通过临床常规指标来构建肝硬化无创诊断模型,可为肝硬化的早期诊治提供参考价值.目的利用临床常见指标构建肝硬化的列线图预测模型.方法选取2010-2018初次就诊于安徽医科大学第一附属医院和第二附属医院感染科接受肝活检的CHB患者,收集其实验室检查指标并进行组间比较.采用Lasso回归模型筛选对肝硬化具有预测价值的预测因子,并采用多因素Logistic回归分析建立预测模型.采用Bootstrap法重采500次进行模型的内部验证,计算曲线下面积(the area under curve,AUC)以评估模型区分度.绘制决策曲线分析(decision curve analysis,DCA)以评估模型的获益度,校准曲线(calibration curve,CA)以评估模型的校准度.结果共纳入CHB病例1087例,其中并发肝硬化者135例,两组间除乙肝病毒脱氧核糖核酸(the deoxyribo nucleic acid quantification of hepatitis B virus,HBV DNA)定量、谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)外,其余指标均具有统计学差异(P<0.05).经Lasso回归分析后,最终筛选出的预测变量为年龄、甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)、清蛋白(albumin,ALB)、球蛋白(globulin,GLB)、谷氨酰转肽酶(glutamyl transpeptidase,GGT)、血小板计数(platelet,PLT).经多因素Logistic回归分析建立预测模型Logit P=1.26+0.02×年龄+0.001×AFP-0.10×ALB+0.07×GLB+0.004×GGT-0.02×PLT,其中AUC为0.83,95%置信区间(confidence interval,CI)为0.79-0.87.DCA曲线提示使用建立的预测模型能够使患者的净获益增加,CA曲线提示该预测模型的预测效应与实际结果间一致性良好.结论本研究以CHB患者的年龄、AFP、ALB、GLB、GGT、PLT作为预测变量,构建的对CHB并发肝硬化的列线图预测模型具有良好的预测效能,值得临床进一步推广.

XGBoost机器学习模型对乙型肝炎肝硬化诊断的应用价值研究

背景 慢性乙型肝炎病毒感染(chronic hepatitis B virus infection,CHBV)进展成肝硬化是缓慢且容易被忽略的,通过临床常规指标来构建肝硬化无创诊断模型成为研究热点.然而,目前有关肝硬化早期诊断的机器学习模型仍是缺乏的.目的 探讨极限梯度提升机(eXtreme gradient boosting,XGBoost)机器学习模型在乙肝肝硬化无创诊断中的效能.方法 回顾性分析2010-2018年首次就诊于安徽医科大学第一附属医院和第二附属医院感染病科的CHBV患者1087例,按照随机原则以3:1的比例分为训练集和验证集.收集所有研究对象的临床资料并利用XGBoost机器学习模型构建预测模型.同时,计算谷草转氨酶与血小板比率指数(aspartate aminotransferase/platelet ratio index,APRI)、纤维蛋白-4(fibrosis-4 index,FIB-4)评分并与XGBoost机器学习模型进行比较.受试者工作特征曲线下面积(area under curve,AUC)以评估模型区分度,校准曲线(calibration curve,CA)及决策曲线(decision curve analysis,DCA)以评估模型校准度及获益度.结果 共纳入CHBV病例1087例,其中训练集817例,验证集270例.训练集与验证集两组间所有预测变量均无统计学差异(P>0.05).训练集中有103例患者发生肝硬化,肝硬化患者APRI和FIB-4评分明显高于非肝硬化患者(P <0.05).在所有预测因子中血小板的相对重要度最高.训练集和验证集的AUC分别为0.95和0.86(P<0.05),两者Kappa值分别为0.78和0.74,提示模型可重复性较好.CA曲线提示模型预测情况与真实情况拟合情况吻合度较高.训练集和验证集的DCA曲线提示所建立模型能够使患者获得较高的获益度.XGBoost机器学习模型对于肝硬化的效能优于APRI评分和FIB-4评分.结论 本研究利用C H B V患者常见的临床信息构建的XGBoost模型对肝硬化的诊断具有良好的性能,值得临床进一步推广.

雌激素受体基因α多态性与乙型肝炎病毒感染慢性化的相关性研究

目的了解雌激素受体α基因XbaI和PvuII多态性与乙型肝炎病毒感染慢性化的关系,从基因水平上探讨慢性乙型肝炎的发病机制。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法检测93例乙型肝炎病毒感染恢复期患者和169例慢性乙型肝炎患者雌激素α受体基因PvuII和XbaI多态性。结果慢性乙型肝炎患者雌激素受体基因PvuII多态性的C/T基因型和C等位基因频率(52.7%,44.1%)明显高于乙型肝炎病毒感染恢复期患者(37.6%,29.6%);TT基因型和T等位基因频率(29.5%,55.9%)明显低于后者(47.3%,70.4%),差异有统计学意义(P<0.05);CT+CC基因型乙型肝炎病毒感染慢性化的风险是TT基因型的2.54倍(OR=2.539,CI:1.50～4.29)。雌激素受体基因XbaI多态性分布在慢性乙型肝炎患者和乙型肝炎病毒感染恢复期患者间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论雌激素受体基因PvuIIC/T基因型和C等位基因可能是乙型肝炎病毒感染慢性化的遗传易感基因。

靶向ASGPR1的外源性microRNA对HBV表达和复制的抑制作用

目的:设计并构建ASGPR1靶向的microRNA表达载体,观察其对ASGPR1基因的抑制作用及其在HBV感染基因治疗中的应用价值.方法:以ASGPR1为靶基因,设计并构建3个针对ASGPR1不同位点的microRNA表达载体,通过脂质体方法转染HepG2.2.15细胞,RT-PCR和Western blot检测其对ASGPR1mRNA和蛋白的抑制作用,乙肝五项定量和HBVDNA检测其对HBV的抑制作用.结果:ASGPR1mRNA和蛋白的平均水平分别下降了57.3%和49.8%(P<0.01);在病毒水平3种amiRNA均能明显抑制相应细胞株中HBsAg和HBeAg的分泌,其中以a miRNA-ASGPR1-610抑制作用最强,对培养72h的细胞上清中的HBsAg和HBeAg抑制率分别为31.3%和33.6%(P<0.01),HBV DNA的抑制率为29.7%(P<0.01).结论:靶向ASGPR1的外源性microRNA能显著抑制靶基因的表达,进而抑制HBV的复制和表达.ASGPR1可以作为慢性HBV感染基因治疗的候选靶点.

MELD评分在终末期肝病中的应用

终末期肝病模型(MELD)是主要应用血清胆红素、国际标准化比值和血清肌酐指标来评价终末期肝病病情严重程度及预后的评分系统。其在预测终末期肝病短、中期死亡率及肝移植病例选择、移植器官的管理应用中已渐趋成熟,应用范围开始扩大到重型肝炎和原发性肝癌。部分学者针对腹水、血钠浓度等影响终末期肝病预后的因素也做了相关研究,对MELD评分系统进行了补充和完善。

靶向La的外源性microRNA抑制HBV复制和表达的实验研究

目的设计并构建靶向La的microRNA表达载体,观察其对La基因的抑制作用,探讨其在HBV感染基因治疗中的应用价值。方法以La为靶基因,设计并构建3个针对La不同位点的microRNA表达载体,通过脂质体方法转染HepG2.2.15细胞,RT-PCR和Western blot检测其对La mR-NA和蛋白的抑制作用,乙肝五项定量和HBV DNA检测其对HBV的抑制作用。结果 3个外源性miRNA(amiRNA)均能明显降低La mRNA和蛋白的表达,其中amiRNA-La-1130抑制效应最强,转染后72h La mRNA和蛋白的水平平均下降了58.6%和50.6%(P<0.01);但仅有amiRNA-La-1130质粒能显著抑制相应细胞株中HBsAg和HBeAg的分泌,抑制率为23.3%和25.8%(P<0.01),HBV DNA的平均抑制率为22.3%(P<0.01)。结论靶向La的amiRNA能显著抑制靶基因的表达,进而抑制HBV的复制和表达。La基因可作为慢性HBV感染联合基因治疗的候选靶点之一。

外源性microRNA介导的RNA干扰抑制HBV复制和表达

目的设计并构建靶向HBV的外源性microRNA表达载体,观察其对HBV表达和复制的抑制作用。方法以HBVP基因和X基因为靶基因,根据pcDNA6.2-G/W-miR载体要求,设计靶向HBV的microRNA序列,进行直接合成获得目的片段并克隆到载体中,测序正确的载体通过脂质体方法转染HepG2.2.15细胞,RT-PCR、乙肝五项定量和荧光定量PCR检测其对HBVmRNA和HBVDNA的抑制作用。结果质粒的转染效率为50%～60%,在这种状态下,外源性microRNA表达载体在HBVmRNA和HBsAg、HBeAg和HBVDNA水平上均能显著抑制HepG2.2.15细胞中HBV的复制和表达(P<0.05)。结论外源性microRNA表达载体构建成功,并能抑制HBV靶基因的表达,为其在慢性HBV感染基因治疗中的应用奠定了基础。

乙型肝炎病毒感染者肝组织IL-12表达及其意义

目的探讨乙型肝炎病毒感染者肝组织白细胞介素12(IL-12)表达与临床表现和肝脏病理学变化的关系。方法应用免疫组化法检测9例正常肝脏组织、183例慢性乙型肝炎(CHB)、41例乙型肝炎肝硬化、37例HBV相关肝癌患者肝组织IL-12表达情况,并与临床特点和病理分级等进行相关性分析。结果 CHB患者肝组织IL-12以弱阳性表达为主,阳性和强阳性表达的比例仅为26.8%,而肝硬化和肝癌患者阳性和强阳性表达的比例分别为36.6%和48.6%,均显著高于CHB患者(P<0.05);HBeAg阴转且HBV DNA阴转的CHB患者肝内IL-12阳性表达比例为64.3%,显著高于HBeAg阳性伴肝功能异常者(30.0%)和肝功能正常者(20.4%)(P<0.05);未发现IL-12表达与肝脏炎症分级或纤维化分期具有相关性。结论 IL-12可能参与HBV感染后的疾病进展与转归。

IL-18在慢性HBV感染后不同转归患者肝脏组织中的表达及意义

目的探讨白细胞介素-18(IL-18)的表达与慢性HBV感染后不同疾病转归患者的相关性及其临床意义。方法收集230例慢性HBV感染后不同疾病患者肝脏组织和临床资料,采用半定量SP免疫组织化学法检测HBV感染者肝组织中IL-18的表达情况,并与患者的临床生物化学指标、肝脏炎症分级和纤维化分期进行比较,分析肝脏组织中IL-18表达与上述指标的相关性。结果 IL-18在肝脏组织中以肝细胞细胞质表达为主,半定量分析结果显示,在健康者、CHB、肝硬化、HBV相关性肝癌患者肝组织中的IL-18表达,差异均有统计学意义(P<0.05);IL-18在HBV感染者肝组织中的表达与ALT水平、肝脏炎症及纤维化程度均呈正相关(r=0.184、0.169、0.085,P=0.015、0.021、0.032)。结论IL-18表达强弱与HBV感染的免疫发病机制有关,IL-18参与了HBV感染的慢性化和疾病的转归。

基于真实诊疗实践的多元评价体系在抗菌药物合理应用培训中的作用

目的:探讨基于真实诊疗实践开展的多元评价体系在抗菌药物合理应用培训中的效果。方法:将60名参加住院医师规范化培训的专业学位研究生随机分为观察组和对照组,各30人,分别完成为期2个月的抗菌药物合理应用培训教学。观察组将基于真实诊疗实践的多元化评价体系应用于教学查房和实践,围绕每个病例进行反复即时考核。对照组按照以往的课堂教学式查房进行带教,带教医生对每个疾病进行理论联系实践的课堂式教学,查房结束后不检查学生对相关知识的掌握程度。培训结束后,进行抗菌药物合理应用出科测试评估,比较2组测试得分。结果:观察组在病史采集水平、体格检查能力、医患沟通能力和操作技能规范程度四个方面的考核得分均明显高于对照组(P<0.01)。观察组对感染性疾病的理论知识和诊断能力得分均明显高于对照组(P<0.01),抗菌药物合理应用得分亦明显高于对照组(P<0.01)。结论:基于真实诊疗实践的多元评价体系在抗菌药物合理应用培训中的效果较好,值得进一步推广。

2011～2013年安徽省临床分离铜绿假单胞菌的耐药性分析

观察安徽省近3年来临床分离的铜绿假单胞菌（ PA）对常用抗菌药物的耐药性变迁情况。 PA对阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦的耐药率平均值为15．3%、17．0%，对亚胺培南的耐药率平均值为25．2%，对三代头孢菌素头孢噻肟、头孢曲松和头孢唑肟的耐药率为42．0%~55．0%；对头孢他啶、头孢吡肟、头孢曲松和头孢唑肟的耐药水平有显著性提高（P〈0．05）。 PA对三代头孢菌素的耐药性呈增高趋势，需引起临床重视。

新形势下传染病学课程教学方式和策略的探讨

随着计划免疫的推广落实和卫生条件的改善,我国传染病的疾病谱已经有所改变,典型的传染病例逐渐少见,传染病的某些症状和体征由于早期的治疗干预也逐渐减少。部分传染病如白喉、脊髓灰质炎、乙型脑炎、麻疹等发病率明显下降,重症传染病逐渐减少,但新发传染病仍层出不穷,

抑癌基因甲基化与乙型肝炎病毒相关性肝癌研究进展

抑癌基因DNA高度甲基化后可以引起基因的转录抑制,从而可以导致细胞异常增殖,甚至发生癌变,而甲基转移酶抑制剂如5-脱氧杂氮胞苷等通过DNA去甲基化,可以恢复多种抑癌基因的正常表达,使细胞的异常增殖受阻。抑癌基因P16、P15。RASSFlA等在肝癌中存在DNA甲基化失活,乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝癌的发生发展与P16、P15、RASSFlA等基因甲基化失活有密切的关系,因此抑癌基因去甲基化有望成为肝癌基因治疗的一种有效手段。

瞬时弹性成像联合APRI和FIB-4指数模型无创诊断慢性HBV感染者肝纤维化的临床价值

目的探讨瞬时弹性成像联合谷草转氨酶/血小板比值(APRI)和FIB-4指数无创诊断慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者肝纤维化程度的临床价值。方法对265例慢性HBV感染者进行肝脏穿刺病理学检查,并于穿刺当日检测患者相关临床指标,应用瞬时弹性成像技术(FibroT ouch)检测肝脏硬度(LSM),根据临床指标分别得出APRI和FIB-4指数结果。以肝脏病理结果为金标准,分别绘制LSM、APRI及FIB-4指数的受试者工作曲线(ROC),评价其对显著纤维化(≥S2)、严重肝纤维化(≥S3)和肝硬化(S=4)的预测价值,并将APRI、FIB-4指数分别与LSM值联合诊断慢性HBV感染者肝脏纤维化程度,并利用联合法计算诊断肝纤维化程度的灵敏度、特异度等。结果随着肝纤维化程度的加重,LSM值(rs=0.622,P<0.001)与肝纤维化分期相关性明显高于APRI及FIB-4指数。在265例患者中,FibroT ouch在诊断慢性HBV感染者显著肝纤维化(≥S2)、严重肝纤维化(≥S3)、肝硬化(S=4)的AUC分别为0.810、0.881、0.961,明显高于APRI和FIB-4相应的ROC曲线下面积。据ROC曲线得出诊断显著肝纤维化(≥S2)、严重肝纤维化(≥S3)、肝硬化(S=4)的FibroT ouch、APRI和FIB-4各自截断值,得出在肝纤维化各分期的诊断中,FibroT ouch特异度及敏感度均高于APRI、FIB-4。同时将FibroT ouch分别与APRI、FIB-4联合诊断,并联诊断可提高诊断的敏感度。其与APRI并联时其敏感度可达到91.11%以上,与FIB-4并联时敏感度亦可明显上升。而串联诊断则可明显提高诊断的特异度,其中FibroT ouch与APRI串联时其特异度可达94.42%以上。结论 FibroT ouch无创诊断肝纤维化的灵敏度及特异度均优于APRI及FIB-4。APRI、FIB-4与FibroT ouch联合诊断肝纤维化的灵敏度及特异度明显优于FibroT ouch、APRI、FIB-4单项指标。

艾滋病合并机会性感染104例临床分析

目的总结和分析艾滋病患者合并机会性感染的临床特点和预后。方法回顾性分析安徽医科大学第二附属医院收治的104例确诊为艾滋病(AIDS)患者合并机会性感染的临床资料。结果收治AIDS患者104例,共发生机会性感染约162次,其中以呼吸道和消化道感染受累最多见,病原菌主要类型为细菌、真菌、结核杆菌、巨细胞病毒和卡氏肺孢子虫多见。结论AIDS并发呼吸道和消化道的机会性感染明显高于其他系统,且与CD4+T细胞数值相关。肺部感染常以混合感染为主,其中以细菌和真菌为主;巨细胞病毒和结核杆菌为最常见机会性感染。

骨桥蛋白和P21在原发性肝癌中的表达及其临床意义

目的 探讨骨桥蛋白(OPN)和P2 1在原发性肝癌组织中的表达及它们在肝癌转移中的作用。方法 采用免疫组化S P法检测69例原发性肝癌组织中OPN和P2 1的表达情况。结果 ①OPN和P2 1的阳性表达主要定位于癌细胞的细胞浆;OPN、P2 1在69例肝癌组织中阳性表达率分别为72 .5 % (5 0 / 69)和62 .3 % (4 3 / 69)。②在发生转移的肝癌组织中OPN和P2 1阳性表达率分别为84.2 % (3 2 / 3 8)和76.3 % (2 9/ 3 8) ,高于无转移的肝癌组织中OPN(5 8.1% ,18/ 3 1)和P2 1(4 5 .2 % ,14 / 3 1)阳性表达率,差异具有显著性,P <0 .0 5。③两者均阳性表达的3 5例肝癌中有2 4例(74.3 % )已发生转移,与两者均阴性表达的11例肝癌中仅有1例(9.1% )发生转移比较差异有显著性,P <0 .0 5 ,提示OPN和P2 1均阳性表达与肿瘤转移的发生密切相关。④OPN和P2 1的表达与肿瘤的大小、AFP水平、有无HBV感染、肿瘤分化、性别、年龄等因素无关,但与肿瘤侵袭转移的发生有关,P <0 .0 5。⑤OPN和P2 1的表达呈显著正相关(r =0 .2 5 7,P <0 .0 5 )。结论 OPN和P2 1的表达与肝癌侵袭转移的发生有密切关系,两者均阳性表达时对预测肝癌已发生转移具有指导意义。