基于PI3K-AKT-mTOR信号通路探讨灵芝孢子对2型糖尿病大鼠睾丸的保护作用

目的:观察2型糖尿病对大鼠睾丸的损伤作用及灵芝孢子通过PI3K-AKT-mTOR信号通路对其损伤的保护作用。方法:选取40只雄性SD大鼠随机分为正常组(NC)、高脂高糖饮食组(HF)、糖尿病模型组(DM)及灵芝孢子干预组(GLSP),每组10只。通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ30mg/kg)联合高脂高糖饮食制备糖尿病大鼠模型,模型制备成功后治疗组使用灵芝孢子300mg/(kg·d)灌胃,其余3组使用同体积生理盐水灌胃,连续12周,期间观测各组大鼠一般情况及状态,每周测定1次大鼠血糖及体质量变化。末次称量体质量及检测空腹血糖后处死大鼠,称量睾丸质量,取附睾尾制涂片染色观察精子形态,试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)水平;Western blotting检测PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白水平。结果:DM组大鼠较NC组大鼠血糖升高,精神萎靡,SOD水平降低,MDA水平升高,体质量及睾丸质量减轻(P<0.01),精子形态差。灵芝孢子可改善DM大鼠的精神状态及精子形态,降低DM大鼠血糖、MDA水平,升高DM大鼠体质量及睾丸质量(P<0.01)。同时灵芝孢子可使p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR、SOD水平升高(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.05)。结论:灵芝孢子可减轻DM大鼠的睾丸损伤情况,其机制可能与抑制PI3K-AKT-mTOR信号通路有关。

Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪常见故障及排除

日本东亚希森美康公司生产的全自动血细胞分析仪XE-2100在临床应用已久，每小时可检测150个标本，可分析血液样品的32个参数，还可分析用于研究的4个参数。它提供了4种分析模式：手动模式、末梢血模式、使用进样器装置的进样器模式和手动模式，能满足临床不同标本的检测要求。

人B细胞活化因子基因启动子活性研究

为探索与自身免疫病发病密切相关的B细胞活化因子(BAFF)基因高水平转录的启动序列及IFN-γ等炎性细胞因子对其活性的影响,以人BAFF基因转录起始点上游-1 349 bp至-329 bp的片段为靶序列,取长度不等的片段作为启动子与含氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因的质粒组成5个重组体,脂质体转染法转染上述重组体至人骨髓白血病细胞株:HL-60,CAT-ELISA测定细胞CAT表达水平以比较各重组体的启动子活性;同时加入细胞因子IL-10、IFN-γ、IL-4、重组人BAFF蛋白(rBAFF),以测定其对BAFF启动序列的影响。结果表明,-1 349^-329 bp、-1 349^-743 bp序列具有强启动调控活性,而-1 349^-1 099 bp片段启动活性最低。细胞因子IFN-γ、IL-10和rBAFF均能在一定程度上调人BAFF基因的启动活性,IL-4则一定程度地抑制BAFF基因的启动活性。研究提示,人BAFF基因-1349^-743 bp片段是进一步研究BAFF基因转录相关DNA结合蛋白的重要调控靶序列。细胞因子IL-10、IFN-γ、IL-4、rBAFF可以一定程度的在转录水平影响BAFF合成和分泌。

糖尿病导致男性不育机制的研究进展

糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一种常见慢性病,可导致男性病人精子数目减少、畸形等从而引发男性生殖障碍。糖尿病与男性不育息息相关,本文就DM导致的睾丸异常自噬、凋亡、氧化应激水平及其对附睾组织的损伤展开综述。

果酒催陈技术研究进展

陈酿是高品质果酒生产的重要环节,对果酒的香气、颜色、稳定和澄清具有非常重要的作用。因此,在保证果酒品质的前提下,一种可行的陈酿技术成为研究热点。该文综述了国内外现有果酒传统陈酿和人工催陈物理技术,如超声波、超高压、微波、红外等,分析了各个催陈技术对果酒品质的影响并加以评价,以期对果酒产业的发展起到推进作用。

房建工程施工技术及现场施工管理分析

随着经济的快速发展 , 人们越来越重视房屋建筑质量 , 并且对房建工程施工技术提出了更高的要求。为了满足人们的住房需求 , 建筑企业应该加强房建工程施工技术及现场施工管理研究。

各向异性水凝胶的制备和应用

水凝胶具有类似于生物组织的富水结构,长期以来被认为是人工组织和器官的良好支架。在结构各向异性方面,大多数合成水凝胶与生物体系有本质上的不同。合成水凝胶通常由随机定向的三维聚合物网络组成,而生物系统是由有序分层单元组成的各向异性结构。这种各向异性结构在生物系统中发挥着重要的作用。在此背景下,各向异性水凝胶为探索水凝胶的仿生应用提供了一个切入点。综述了几种重要的各向异性水凝胶,包括具有定向纳米填料的各向异性水凝胶、具有定向聚合物链网络结构的水凝胶、具有定向空腔通道的水凝胶和具有各向异性微组装结构的水凝胶,介绍了各向异性水凝胶的用途和前景,特别是它们的制备、结构和应用。

强直性脊柱炎和类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中Toll样受体4基因的表达及临床意义

目的探讨Toll样受体4(TLR4)mRNA在强直性脊柱炎(AS)、类风湿关节炎(RA)患者以及健康个体外周血单个核细胞(PBMC)中的表达差异及其临床意义。方法应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测2006年3月至10月第二军医大学附属长征医院60例AS患者、20例RA患者及30例健康对照PBMC中TLR4 mRNA的表达水平;应用ESR自动化分析仪和特定蛋白电泳仪分别测定红细胞沉降率(ESR)和血浆C-反应蛋白(CRP)。结果AS和RA患者PBMCTLR4 mRNA的表达水平明显高于对照组,但两疾病组之间差异并无显著性意义;人类白细胞抗原(HLA-B27)阳性和阴性AS患者均显著高于健康对照组,且HLA-B27阳性AS患者显著高于RA组,但两组AS患者以及HLA-B27阴性AS与RA患者之间,TLR4 mRNA差异无显著性意义;在HLA-B27阳性AS患者中,TLR4 mRNA的表达与ESR及CRP呈显著相关性,但在HLA-B27阴性AS患者中则无这种相关性。在RA患者中,TLR4 mRNA与CRP呈显著相关性。结论AS和RA患者PBMCTLR4 mRNA的表达均上调,AS患者上调与HLA-B27阳性与否无关,但HLA-B27阳性AS患者比RA上调更明显,且HLA-B27抗原影响AS患者TLR4 mRNA与ESR及CRP的相关性。TLR4的异常表达可能在AS和RA的发生和发展中起作用。

细胞因子对人B细胞活化因子基因启动子的调节作用

目的探讨干扰素（IFN）-γ、向细胞介素（IL）-10和IL-4对人B细胞活化因子（BAFF）基因启动子转录活性的影响。方法以人基因组DNA为模板，聚合酶链反应（PCR）扩增获得含BAFF基因完整启动子序列的-1349—329bp片段，与氯霉素乙酰基转移酶（CAT）报告基因组成重组体phBAFF1．02，瞬时转染至人骨髓白血病细胞株HL-60，经上述细胞因子干预后，CAT-酶联免疫吸附试验（ELISA）测定CAT活性，观察重组体的启动转录活性的变化。结果5ng／ml的IFN-γ、100ng／ml的IL-10分别使重组体DhBAFF1．02的CAT活性升高4．18、2．13倍，而浓度为100ng／ml的IL-4则不能改变重组体的CAT活性；联合应用IFN-γ和IL-4、IL-10和IL-4仅能使重组体的CAT活性升高3．41、1．58倍，与单独应用IFN-γ、IL-10相比，CAT活性差异有统计学意义（P〈0．05）。结论细胞因子IFN-γ、IL-10能明显上调人BAFF基因启动子的转录活性，IL-4对BAFF基因启动子的转录活性无影响，但能明显减弱IFN-γ、IL-10对BAFF基因启动子的促进作用。

细胞因子IFN-γ、IL-10通过转录调控促进人骨髓白血病细胞HL-60对B细胞活化因子的表达

目的探讨常见炎性细胞因子IFN-γ、IL-10和IL-4对人骨髓白血病细胞HL-60中B细胞活化因子（BAFF）表达的影响及其可能的分子调控机制，为研究BAFF异常表达调控在骨髓白血病发病过程中的作用提供实验依据。方法以细胞因子IFN-γ、IL-10和IL-4刺激体外培养的HL-60细胞1～3d后，流式细胞术、ELISA和荧光定量RT-PCR方法检测BAFF的核酸和蛋白表达含量的变化。并对人BAFF基因上游的启动子序列（-1349～-329bp）进行5’系列基因缺失研究，组成5个不同长度的含报告基因的重组体，瞬时转染至HL-60细胞，经上述细胞因子干预后，报告基因测活技术观察各重组体启动转录活性的变化。结果细胞因子IFN-γ、IL-10干预后，HL-60细胞中BAFF的核酸和蛋白表达含量均明显升高（P〈0．05）；IFN-γ、IL-10均能明显上调人BAFF基因启动子的转录活性（P〈0．05），且其在转录水平的有效调控区域为序列-929～-719bp。结论细胞因子IFN-γ、IL-10可能通过上调BAFF基因转录来促进HL-60细胞对BAFF核酸和蛋白的表达。

IFN-γ、IL-10对HL-60细胞表达B细胞活化因子的影响

B细胞活化因子(BAFF)的异常表达与骨髓瘤、淋巴瘤的发病相关,为探索常见炎性细胞因子是否能影响人骨髓白血病细胞HL-60中BAFF的表达,以细胞因子IFN-γ、IL-10和IL-4刺激体外培养的HL-60细胞1~3 d后,采用流式细胞术、ELISA和荧光定量RT-PCR方法检测BAFF的核酸和蛋白表达含量的变化。结果显示,细胞因子IFN-γ、IL-10干预后,HL-60细胞表面BAFF蛋白表达水平、细胞上清液中BAFF蛋白含量、细胞内BAFF mRNA的含量均能明显升高(P<0.05),其中在INF-γ、IL-10干预的第1天,HL-60细胞内BAFF mRNA的含量为最高;在干预的第2天,HL-60细胞的上清液中BAFF蛋白含量及细胞表面BAFF蛋白表达水平均达最大值;而IL-4干预HL-60细胞后,仅对细胞上清液中BAFF蛋白水平稍有降低(P<0.05),细胞表面BAFF蛋白表达水平和细胞内BAFF mRNA的含量均无显著性差异。研究提示,INF-γ、IL-10可能是通过促进HL-60细胞对BAFF核酸的表达来上调BAFF蛋白的合成与分泌,而IL-4则仅能一定程度的降低HL-60细胞对BAFF蛋白的分泌...