类似Wolffian肿瘤的输卵管子宫内膜样癌1例并文献复习

形态类似Wolffian肿瘤的输卵管子宫内膜样癌罕见,易误诊为Wolffian肿瘤及其他肿瘤。2020年本院诊断1例形态类似Wolffian肿瘤的输卵管子宫内膜样癌,现总结其临床及大体、病理特征,旨在提高对其的诊断和认识,避免误诊。1材料与方法1.1临床资料患者女性,52岁,主因宫颈高级别上皮内病变于2020-11-04入院治疗,无阴道出血及流液。

枣树抗坏血酸过氧化物酶基因ZjAPX生物信息学分析及植物表达载体的构建

利用生物信息学软件对已获得的枣树抗坏血酸过氧化物酶基因cDNA序列ZjAPX进行了同源性及功能位点等多项参数分析。结果表明,此序列为全长753 bp的开放读码框(ORF),编码251氨基酸,分子量为62.55 kDa,理论等电点为5.10,为一个膜外蛋白;序列保守性分析表明,该序列具有典型的铁氧化还原蛋白结合区域,属于一个典型的植物亚铁血红素过氧化物酶家族蛋白;氨基酸序列相似性分析表明,该蛋白与已知的其他植物抗坏血酸过氧化物酶APX具有极高的同源性,与可可树APX和陆地棉APX同源性均为93%,命名为ZjAPX(DDBJ/EMBL/GenBank注册号:AB608053)。用Swiss Model程序(http://au.expasy.org/tools/)推测了ZjAPX基因编码蛋白的三维结构。以ZjAPX的cDNA序列为模板,PCR扩增后,经限制性内切酶消化,与PEZR(K)-LNY载体进行重组连接,测序结果显示,其植物表达载体构建成功。此结果为研究枣树抗坏血酸过氧化物酶基因在植物体内的生物学功能以及可能的活性调节方式奠定了基础。

转ZjAPX基因拟南芥对NaCl、干旱胁迫的耐性研究

旨在探讨枣树抗坏血酸过氧化物酶基因ZjAPX在植物渗透胁迫中的作用。将ZjAPX基因转入到模式植物拟南芥,以野生型(WT)、转ZjAPX拟南芥株系T2为试材,进行不同浓度NaCl胁迫和干旱胁迫。结果表明,转基因株系的种子萌发、植株生长均优于野生型株系;荧光定量PCR检测转基因拟南芥植株在干旱和盐胁迫处理10 d后目的基因ZjAPX的表达量显著高于野生拟南芥,表明ZjAPX的高表达明显提高了植株的抗旱和耐盐性。

枣树ZjAPX基因的原核表达

为了解枣树抗氧化系统中抗坏血酸过氧化物酶基因的作用和功能,将从枣树结果枝cDNA文库中筛选获得的ZjAPX cDNA序列,连接到原核表达载体pGEX-4T-2,导入E.coli体内进行了表达产物鉴定。SDS-PAGE电泳检测表明,1.0 mmol/L的IPTG诱导4 h表达了蛋白产物;IPTG的浓度和诱导时间优化表明,1.2 mmol/LIPTG诱导5 h时,蛋白的表达量最大。研究为枣抗坏血酸过氧化物酶基因生物学功能的深入研究奠定了基础。

女性生殖道分泌物真菌快速检测与鉴定

近年来,女性生殖道真菌感染患者日渐增多且居高不下,长期困扰着我国妇女。临床上由念珠菌及类酵母菌感染引起的阴道炎是一种常见的妇科疾病,其临床致病具有反复发作的特点,且女性阴道炎患者经验性用药以及抗真菌药物的滥用不仅延误最佳治疗时机,同时也增加患者的经济负担。因此,阴道分泌物感染真菌的快速检测,对女性生殖道真菌感染的早期诊断、合理用药均十分必要。

童年里的泥巴象棋

在我童年的记忆里，总会出现两个身影，我的两个叔叔，一个比我大6岁，一个比我大4岁。我的童年几乎都是与他们在一起度过的。

PD-1、PD-L1、肿瘤浸润淋巴细胞在神经母细胞瘤组织中的表达

目的探讨程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)、程序性细胞死亡配体1(PD-L1)、肿瘤浸润淋巴细胞在神经母细胞瘤中的表达及与患者临床病理特征之间的关系。方法选取2000年1月至2022年6月山西省儿童医院58例接受手术切除的神经母细胞瘤患者的术后肿瘤组织,免疫组化法检测PD-1在肿瘤中淋巴细胞的表达及PD-L1在肿瘤细胞中的表达情况,同时检测CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞密度,分析PD-1、PD-L1的表达和不同亚群T淋巴细胞密度与临床病理特征的关系。结果PD-1和PD-L1蛋白的阳性表达率分别为44.8%和43.1%。PD-L1的表达在INSS分期、INRGSS分期、病理类型及分化类型中肿瘤细胞差异有统计学差异(P<0.05)。PD-1表达在肿瘤发生部位、INSS分期及INRGSS分期中差异有统计学意义(P<0.05)。PD-1与PD-L1的表达具有相关性(r=0.318,P=0.011)。肿瘤浸润淋巴细胞密度在INSS分期及INRGSS分期中差异有统计学意义(P<0.05)。CD3^(+)T细胞巢周表达、CD3^(+)T细胞巢内表达及CD8^(+)T细胞巢周表达与PD-1表达均有相关性(r=0.265、0.287、0.309,P<0.05)。结论神经母细胞瘤高表达PD-L1预示更差的预后,肿瘤浸润T淋巴细胞可能参与了PD-1表达的调控,以PD-1/PD-L1信号通路为靶点的免疫治疗有望成为神经母细胞瘤的潜在治疗靶点。

吕梁地区遗传性耳聋GJB2基因和mtDNA 1555位点的突变筛查

目的通过对吕梁地区96例耳聋患者的GJB2基因和mtDNA 1555位点突变筛查,了解该地区的基因突变情况及热点突变位点。方法采用聚合酶链式反应(PCR)扩增96例标本的GJB2基因和mtDNA 1555位点所在区段,产物酶切、测序分析。结果 96例标本共计检出10个GJB2基因突变位点,与编码连接蛋白的非综合征耳聋突变数据库(http://davinci.crg.es/deafness/index.php?seccion=mut_db&db=nonsynd)比对,8个位点已见报道,其中包括4个多肽位点c.79 G>A、c.341 A>G、c.608 T>C、c.457 G>A和4个致病位点c.235delC、c.109 G>A、c.176-c.191 del16和c.299-c.300delAT,其中,c.235delC是主要突变方式,携带率为6.25%(12/192);2个位点(c.IVS1-35 G>T和c.88A>G)属首次报道。酶切发现1例患者携带mt.1555纯合突变,后经测序发现还携带有mt.1438A>G突变位点。结论吕梁地区耳聋患者以GJB2 c.235delC为主要致病位点,本次研究结果为吕梁地区的耳聋预防奠定了基础,同时为今后临床医师诊断、治疗及遗传咨询提供了参考。

山西省非综合征型耳聋患者常见耳聋基因的检测分析

目的探讨山西省各地区聋哑学校遗传性耳聋患者常见的致病基因以及突变位点。方法收集山西省各地区聋哑学校耳聋患者的外周血标本300份，通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱的方法，筛选常见的致病基因（GJB2、SLC26A4、GJB3、线粒体12SrRNA）的20个突变位点，并用测序的方法进行验证。结果基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱方法结果显示：GJB2基因中c．Z35delC突变的携带率最高（13．67％）;SLC26A4（PDS）基因中c．IVS7-2A〉G突变携带率为17．67％；线粒体12SrRNA基因中c．1555A〉G突变携带率为2．00％；GJB3基因未发现突变。测序结果与质谱符合度达99％以上。结论通过对山西省范围内的4种常见耳聋基因发生突变的情况进行分析，为该地区耳聋的早期诊断、治疗提供依据；同时验证得出基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱是一种可靠的检测耳聋基因的方法。

山西汉族遗传性多发性骨软骨瘤家系EXT1及EXT2基因突变研究

目的对山西一个汉族遗传性多发性骨软骨瘤家系的EXTl和EXT2基因的全部外显子序列进行分析，以寻找致病突变。方法用PCR扩增先证者EXTl和EXT2基因的全部外显子，将PCR产物送直接测序分析。结果发现EXT1基因2种同义突变（P477P、E587E）、3种内含子突变（C．1537－48A〉G、C．1721＋203A〉G、c．1722－1。3c〉G）。EXT2基因共发现5种内含子突变（C．－29－148A〉T、C．1080－18T〉A、C．1336－93C〉T、C．1526－166C〉T、C．1526－195C〉T）。其中，EXTlP477P、EXTlE587E和EXT2C．1080－18T〉A为多发性骨软骨瘤突变数据库已收录的多态位点，其余7个位点尚未见报道。结论对该家系EXT1、EXT2基因全部外显子的测序分析未发现明确的致病突变，该家系遗传性多发性骨软骨瘤的发生是否由除EXTl、EXT2外的其它EXT相关基因引起尚需进一步的连锁定位分析。

应用高通量基因捕获技术寻找非综合征型耳聋新的热点突变

目的探索常见耳聋致病基因新的热点突变，并评估高通量基因捕获技术在非综合征型耳聋基因诊断中的应用价值。方法应用高通量基因捕获技术对耳聋致病基因GJB2、GJB3、SLC26A4、线粒体12SrRNA的20个常见致病位点未发现突变的18例具有明确家族史的耳聋患者（分别来自不同的家系）进行检测，并采用Sanger法对疑似突变进行验证。结果高通量测序在18例患者中共检测到8个耳聋相关基因的15种突变，其中包括14种错义突变以及1种剪切突变，其中3种错义突变（P．C2184G、P．L2825P、P．H1888Y）既往未见报道。新突变的致病性尚需进一步的验证。P．L445W、P．D866N、IVS919-2A＞G为热点致病突变。结论高通量基因捕获技术准确检测出P．L445W、P．D866N、IVS919-2A＞G为新的致病热点突变，对耳聋诊断及病因筛查具有重要的临床价值。

遗传性多发性骨软骨瘤一家系10例

先证者（图1．IV1）男，16岁。全身性骨软骨瘤、腿部骨瘤严重影响行走。于2000及2001年两次手术切除，在其家系中病情最为严重。

长治地区耳聋患者常见耳聋基因GJB2、GJB3和线粒体DNA 12S rRNA 1555A>G相关性分析

目的通过对长治地区115例耳聋患者常见基因GJB2、GJB3和线粒体DNA 12S rRNA 1555A>G测序分析,研究该地区耳聋基因的突变情况及热点突变位点。方法收集长治地区特殊教育学校的115例耳聋患者的外周血样本,提取其DNA后对它的目的基因进行扩增并测序。结果 115例耳聋患者中GJB2基因检测到81例发生突变,并发现了10个突变位点,其中c.7657T>C是主要的多态位点,其携带率为22.6%(52/115)。另外,长治地区发现2例线粒体DNA1555A>G位点突变,未检测出GJB3基因突变位点。结论通过对长治地区常见耳聋基因突变位点的研究,了解该地区的耳聋基因突变谱,为后续国内耳聋基因型分布提供数据支持,同时也为耳聋的早期诊断,治疗提供理论依据。

150例无精子和少精子症患者Y染色体AZF区微缺失检测及染色体核型分析

目的分析无精子和少精子症患者Y染色体AZF基因微缺失与染色体核型的关联。方法对无精子、少精子症男性患者Y染色体AZF基因区15个STS位点进行检测和染色体核型分析。结果 150例患者经15个STS位点检测发现AZF区微缺失12例,总缺失率为8.0%。其中AZFa缺失2例,缺失频率为1.3%;AZFb缺失1例,缺失频率为0.6%;AZFc缺失11例,缺失频率为7.3%;AZFd缺失10例,缺失频率为6.7%。AZF区缺失频率为AZFc>AZFd>AZFa>AZFb。12例AZF区微缺失的患者共存在4种缺失类型,其中10例患者为AZF区的联合缺失。所有患者经核型分析共检测出14例异常核型,异常率为9.3%。14例异常核型患者中有1例存在Y染色体微缺失;136例正常核型患者存在11例Y染色体微缺失。结论 Y染色体AZF区有缺失,不一定染色体核型异常,染色体核型异常也不排除有AZF的缺失;Y染色体微缺失与染色体核型异常不呈一一对应关系。

阳泉地区非综合征性耳聋患者常见耳聋基因突变的分析

目的通过对阳泉市盲聋哑学校69例耳聋患者进行GJB2、PDS及线粒体DNA基因热点突变筛查,分析该地区耳聋的突变分布及分子病因。方法收集山西省阳泉市69例耳聋患者,对所有患者线粒体DNA A1555G/C1494T、GJB2基因、PDS基因第7、8和19外显子进行扩增及测序。结果 69例非综合征性耳聋患者共有60例检测到基因突变,突变率为86.96%(60/69)。57例患者检出GJB2基因突变,检出率达82.61%(57/69),其中c.235del C突变率为10.14%;3例患者有PDS基因突变,分别为c.2168 A>G 1例,IVS7-2 G>A 2例;未检测到线粒体DNA A1555G/C1494T突变。结论山西省阳泉市常见耳聋基因突变以GJB2基因突变率较高,为耳聋的诊断与治疗提供依据。

一例遗传性多发性骨软骨瘤患者的基因突变分析

目的对1例遗传性多发性骨软骨瘤患者进行相关基因的突变检测,以寻找致病位点。方法采集患者及其家系成员的外周血标本,提取其全基因组DNA,用PCR对EXT1和EXT2基因的所有外显子进行扩增并测序,测序结果在Gen Bank上比对分析。结果患者:EXT1基因中发现一种内含子突变(c.1721+203T>TC),EXT2基因中发现三种内含子突变(c.1526-195C>T、c.1807-51T>C、c.1936-41T>C)。父亲:EXT1(c.1721+203T>TC)、EXT2(c.1526-195C>T、c.1807-51T>C、c.1936-41T>C),母亲:EXT2(c.1807-51T>CT),妹妹:EXT2(c.1807-51T>C)。结论通过对患者进行EXT1、EXT2基因的所有外显子扩增并测序分析,未发现明确的致病位点,该患者的发病是否由除EXT1、EXT2基因以外的其他相关基因突变引起,还需进一步的连锁定位分析。

太原地区200例非综合征型耳聋致病基因突变分析

目的通过对太原市200例非综合征型耳聋患者常见基因GJB2、GJB3、SLC26A4和线粒体DNA 12S r RNA 4个基因20个位点的检测分析,研究该地区耳聋基因的突变情况及热点突变位点,为当地大规模开展耳聋基因筛查提供依据。方法收集太原市特殊教育学校的200例非综合征耳聋患者的外周血样本,提取DNA后对常见耳聋基因进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法检测,并对突变位点进行测序验证。结果 200例耳聋患者中GJB2基因检测到73例发生突变,SLC26A4基因64例发生突变,线粒体DNA 12S r RNA 1555A>G检测到6例发生突变。而GJB3基因和线粒体DNA 12S r RNA 1494C>T未检测到突变。结论 GJB2和SLC26A4基因在太原市耳聋患者中具有较高的携带率。通过对太原市常见耳聋基因突变位点的研究,了解该地区的耳聋基因突变谱,为后续国内耳聋基因型分布提供数据支持,同时也为耳聋的早期诊断,治疗提供理论依据。

临汾地区特教学校非综合征性耳聋GJB2、PDS及线粒体A1555G基因突变的分析

目的对临汾地区特教学校152例耳聋患者进行GJB2、PDS及mtDNA 1555位点突变分析,了解该地区耳聋患者的突变情况及分子学病因。方法收集临汾地区152例耳聋患者,PCR扩增患者GJB2基因、PDS基因第19外显子及mtDNA 1555位点所在区段,所得产物进行测序分析。结果 152例非综合征患者共有90例检测到基因突变,突变率为59.2%(90/152)。GJB2基因突变84例,共发现9个突变位点,包括5个多态位点(c.79 G>A、c.283G>A、c.341 A>G、c.368C>A、c.608 T>C)、3个致病位点(c.109 G>A、c.299-300delAT、c.235delC)及1例新发现突变位点c.127G>C。PDS基因第19外显子突变检出c.2168 A>G 3例,c.2107C>G 1例。检出mtDNA 1555A>G突变患者3例,突变率为2.0%(3/152)。结论山西临汾地区耳聋基因突变以GJB2基因突变率最高,为耳聋的早期诊断与治疗提供理论依据。

多重耐药革兰阴性菌整合子及其耐药基因盒与耐药表型的相关性

目的 通过对90株多重耐药革兰阴性菌携带的整合子及耐药基因盒类型的检测,探讨整合子、基因盒与耐药表型的相关性.方法 采用PCR法扩增90株革兰阴性菌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类整合子及整合子阳性菌株的可变区,测序分析整合子可变区耐药基因盒的类型;药敏试验检测整合子阳性菌株与阴性菌株的耐药率.结果 90株多重耐药革兰阴性菌中整合子检出率为81.1％ （73/90）,其中有Ⅰ类整合子70株,Ⅱ类整合子3株,未检测出Ⅲ类整合子.Ⅰ类整合子可变区扩增片段介于730 ～ 3300 bp,GenBank数据库BLAST分析,检测到8种整合子基因盒谱,分别为aadB 11株、aac（6’）-Ⅱ7株、aadA5 10株、dfrA17-aadA5 14株、dfrA12-OrfF-aadA2 1株、aacA4-catB8-aadA1 24株、aacC1-OrfA-OrfB-aadA1 3株与catB3-aadB-dhfrV-aacA4-nit-nit2 1株,其中catB3-aadB-dhfrV-aacA4-nit1-nit2是一种新型的耐药基因盒组合形式;Ⅱ类整合子可变区片段为1600 bp,3株均携带sat2-aadA1基因盒.药敏试验表明整合子阳性菌株对氨基糖苷类和磺胺类药物耐药率高,与整合子可变区耐药基因盒的结果相符;阳性菌株对阿米卡星较为敏感,耐药率为32.9％（24/73）;另外所有菌株对多数β-内酰胺酶类药物耐药率≥80％.结论 多重耐药革兰阴性菌Ⅰ类整合子携带率较高,且菌株耐药表型与其整合子可变区耐药基因盒的类型有相关性.

2型糖尿病CDKAL1基因rs7754840多态性与线粒体ND1基因突变的相关性研究

目的：研究CDKAL1基因rs7754840的单核苷酸多态性（ SNP），探讨其与2型糖尿病以及线粒体ND1基因突变的相关性。方法选取正常人34例， T2 DM患者80例作为研究对象（其中携带线粒体ND1基因突变患者38例），采用PCR-RFLP方法检测CDKAL1基因rs7754840（ G＞C）多态性，并测序验证；使用SPSS13.0统计软件比较分析各组间基因型频率和等位基因频率的相关性。结果 PCR-RFLP结果可见3种带型： GG型、 GC型和CC型。统计结果显示正常对照组和T2 DM组差异有统计学意义（ P＜0.05），正常组、线粒体ND1基因突变组和线粒体ND1基因未突变组差异无统计学意义（ P＞0.05）。结论 CDKAL1基因rs7754840多态性与T2 DM有相关性，但T2 DM患者CDKAL1基因rs7754840多态性与线粒体ND1基因是否突变无关。