黄瓜悬浮细胞蛋白质组双向电泳分析技术

为建立适于黄瓜悬浮细胞蛋白质组分析的双向电泳体系,对黄瓜悬浮细胞蛋白质双向电泳分析所采用的胶条pH范围、样品制备方法、裂解液配方及分离胶浓度等参数进行研究。结果表明,采用pH范围为4～7的IPG胶条,直接裂解后丙酮沉淀法制备黄瓜悬浮细胞蛋白质,裂解液为8mol/L尿素、2mol/L硫脲、2%IPG Buffer、4%CHAPS、1%TBP、65mmol/L DTT、2mmol/L EDTA、0.001%溴酚蓝和1%鸡尾酒,分离胶浓度为11%,可获得蛋白质点分离清晰的双向电泳图谱。

黄瓜叶片蛋白质双向电泳样品分级优化

以‘津研4号’苗期叶片为材料,采用聚乙二醇(PEG)分级沉淀法对黄瓜叶片蛋白质样品进行分级分离,将黄瓜叶片中存在的高丰度蛋白1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶特异性地集中于一个组分之中,以提高对黄瓜叶片蛋白质双向电泳中低丰度蛋白质的检测率。结果表明:(1)分级后各组分和全蛋白在SDS-PAGE谱带中差异显著,全蛋白得到了有效的分离。(2)二维电泳图谱上点的分辨率有很大的提高,所有组分的点数是未分级前的3倍之多。(3)浓度为24%的PEG-4000富集高丰度蛋白Rubisco的效果最好。该方法可推广应用于黄瓜叶片蛋白质组分析的样品制备。

黄瓜根系蛋白质组分析的双向电泳技术条件优化

双向电泳(2-DE)是蛋白质组学研究的重要支撑技术之一。为建立适于黄瓜根系蛋白质组分析的双向电泳技术,对黄瓜根系蛋白质样品提取方法、裂解缓冲液配方及SDS-PAGE分离胶浓度等参数进行研究。结果表明:采用TCA/丙酮法提取黄瓜根系中的蛋白质,裂解缓冲液为8mol·L-1尿素、2mol·L-1硫脲、2%IPG Buffer、4%CHAPS、1%TBP、65mmol·L-1DTT、2mmol·L-1EDTA、0.001%溴酚蓝和1%鸡尾酒,SDS-PAGE分离胶浓度为11%时,可获得分离效果较好的双向电泳图谱。该技术条件为适合黄瓜根系蛋白分离的较优双向电泳体系。

乳酸乳球菌乳酸亚种T0625菌株产Nisin最佳培养条件的研究

对从大白菜叶片上分离得到的一株乳酸乳球菌乳酸亚种T0625产乳酸链球菌素(Nisin)的适宜培养条件进行了研究。采用单因素分析法首先确定了T0625菌株在改良的M17G培养基中产Nisin的最适碳源、氮源、金属离子的种类,即:碳源为葡萄糖;氮源为蛋白胨、酵母膏和牛肉膏组成的混合氮源;金属离子为Mg2+。并确定了各成分的最适浓度。之后确定了装液量、接种量、起始pH和培养温度的最适指标。最终通过正交试验的方法,确定T0625产Nisin的最佳营养条件:葡萄糖2%、蛋白胨4%、酵母膏2%、牛肉膏1%、MgSO4.7H2O0.003 mol/L、VC0.05%。T0625产Nisin的最佳发酵条件:装液量250 mL(250 mL三角瓶)、接种量7%、起始pH 6.5、35℃下发酵培养12 h。

化学教师在教学中注意的几个问题

笔者从事化学教学工作几年来,对提高教学质量,促进学生知识水平提高等问题有了一些感受和想法,认为中学化学教师在教学工作中应注意以下几个问题。一、中学化学教师必须不断强化教师职业道德修养以身立教,加强自身的修养,强化教师职业道德是教师在学生面前树立威信的必要条件,是搞好教育工作的重要保证。教师的思想品德、治学态度、生活作风、行为习惯对可塑性和模仿性极强的中学生起着直接的影响。教师必须正其身,才能使学生令而行,禁而止。教师职业道德作用于教育过程的调节,作用于对教育学生的影响,作用于对社会进步的促进。因此,中学化学教师必须加强职业道德的修养。其内容有以下几点: (一)不断提高教师职业道德认识水平。