基于高光谱技术的穿心莲药材中穿心莲内酯类成分检测研究

基于高光谱技术结合化学计量学,建立不同种质穿心莲药材中穿心莲内酯类成分含量的检测方法。采集穿心莲样品的高光谱信息,获得原始光谱数据(Raw Data)。采用一阶导数(D1)、二阶导数(D2)、SG平滑(SG)、乘性散射校正(MSC)对Raw Data预处理,结合偏最小二乘判别分析(PLS-DA)建立分类模型,结合偏最小二乘回归(PLSR)、反向传播神经网络(BPNN)、随机森林回归(RFR)建立回归模型。应用连续投影算法(SPA)简化模型。不同种质的穿心莲最佳分类模型为D1-PLS-DA。穿心莲内酯、新穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯4种穿心莲内酯类化合物总含量的最佳回归模型分别为SG-PLSR、MSC-PLSR、Raw Data-SPA-BPNN、MSC-SPA-BPNN和Raw Data-PLSR。应用高光谱技术可实现穿心莲品质的快速准确检测。

基于ICP-MS的不同产地丹参元素差异分析及健康风险评估

目的:通过测定不同产地丹参中40个无机元素含量,研究元素分布差异,并对重金属及有害元素进行健康风险评估。方法:收集来自5个丹参主产区的31批467份样品,采用ICP-MS法测定其中无机元素的含量,利用化学计量学方法进行产地鉴别分析和差异元素筛选,通过计算重金属及有害元素的单项污染指数、内梅罗综合污染指数对其进行安全性评价,并根据每日最大耐受摄入量和致癌风险进行健康风险评估。结果:四川丹参的稀土元素La、Ce含量最高,山东丹参的无机元素Na、Sr、Nb和Cu的含量最高,其余元素以河南和陕西丹参的含量相对较高。不同产地丹参无机元素的含量具有显著差异,线性判别分析模型对丹参元素产地的判别效果最佳,其训练集和预测集准确率均达到90%以上。安全性评价表明大部分样品污染状况均处于安全状态。健康风险评估模型结果显示使用丹参无明显健康风险,但个别基地的As暴露引起的致癌性健康风险需要被关注。结论:不同产地丹参无机元素分布具有特征性,可利用这些特征进行产地鉴别。丹参药材的重金属含量均处于安全水平,并无明显健康风险。本研究为大宗药材丹参溯源检测体系的构建及健康风险评估和质量评价体系建立提供了参考。

四物汤及组方中药植物雌激素活性的实验研究

目的:首先考查四物汤及其组方中药对性未成熟雌性SD大鼠子宫系数的影响,然后考查含药血清对雌激素受体亚型ERα阳性人乳腺癌MCα衡和随机的原则分为7组(正常对照组、己烯雌酚组、四物汤组、熟地组、白芍组、当归组和川芎组),分别每天分早、晚两次灌胃给药,给药均持续4天,第5天腹主动脉取血,分离血清,-20℃贮存备用,断颈处死动物后,分离子宫并称重,计算子宫系数;应用MTT法检测药物血清对MCF-7细胞的增值率、流式细胞技术检测细胞周期和ERα蛋白表达。结果:熟地、白芍和当归组的幼鼠子宫系数均高于正常对照组(P<0.05);川芎组和四物汤组的幼鼠子宫系数与正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);白芍、当归和川芎等中药的药物血清均可显著促进MCF-7细胞体外增殖(P<0.01),熟地可促进MCF-7细胞体外增殖(P<0.05);熟地、当归和川芎等中药的药物血清均可显著促使MCF-7细胞周期S期细胞数增加(P<0.01),白芍的药物血清可促使MCF-7细胞周期S期细胞数增加(P<0.05);而在本实验条件下四物汤复方的含药血清使MCF-7细胞数略有增加,但无统计学意义(P>0.05);当归和川芎可提高ERα蛋白的表达水平(P<0.05),熟地、白芍和四物汤也可提高ERα蛋白的表达水平,但与正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:熟地、白芍、当归等中药有植物雌激素活性,本实验配伍比例条件下,四物汤复方的植物雌激素活性弱于其组方的各味中药。

四物汤及其组方中药的药物血清对MCF-7细胞体外增殖和细胞周期的影响

目的:探讨四物汤及其组方的四味中药的药物血清对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞体外增殖、细胞周期和凋亡的影响,评价其植物雌激素活性。方法:正常性未成熟雌性SD大鼠,体重70±5g,按体重均衡和随机的原则分为7组(正常对照组、己烯雌酚组、四物汤组、熟地组、白芍组、当归组和川芎组),每天分别早、晚两次灌胃给药,给药均持续4d,第5d腹主动脉取血,分离血清,0.22μm微孔滤膜过滤,-20℃贮存备用,应用MTT法检测药物血清对MCF-7细胞增值率、流式细胞技术检测细胞周期和凋亡率。结果:白芍、当归和川芎等中药的药物血清均可显著促进MCF-7细胞体外增殖(P<0.01),熟地可促进MCF-7细胞体外增殖(P<0.05),熟地、当归和川芎等中药的药物血清均可显著促使MCF-7细胞S期细胞数和细胞增殖指数PI增加(P<0.01),白芍的药物血清均可促使MCF-7细胞增殖指数PI增加(P<0.05),而在本实验条件下四物汤复方的含药血清使MCF-7细胞数略有增加,但无统计学意义(P>0.05);白芍、当归、川芎和四物汤的药物血清均可显著抑制MCF-7细胞的凋亡(P<0.01);结论:熟地、白芍、当归和川芎等中药有植物雌激素活性,本实验配伍比例条件下,四物汤复方的植物雌激素活性弱于其组方的各味中药。

不同产地三七栽培加工技术调查

目的：采集三七样品，对不同产地、小生境、农业措施、田间管理、病虫害和采收加工等方面进行了较详细的调查比较，以期为比较和优化三七栽培及产地加工提供参考。方法：实地调查和走访调查。结果：通过调查不同地区17个三七样地，发现栽培用种苗的种质均为购于云南文山的自繁自种种质，样地地理范围在北纬22°-25°、东经102°～106°之间，在760～2114m海拔高度的地方都有栽培；三七病害普遍存在，主要有黑斑病、根腐病和疫病；前作是玉米、花生或豆类的三七长势较好，前作是水田的三七长势较差，并且病害情况较严重。三年生三七天棚的透光度可达到30％以上；某些三七田间化肥用量较大，农药使用情况复杂。结论：三七栽培已突破了传统的栽培区域，连作障碍及土壤污染严重制约了三七道地药材的可持续生产，技术传承和规范化程度低限制了三七栽培的现代化及规模化，应加大这方面的投入和研究。

彝药满山香的资源调查和鉴别研究

目的:对彝药满山香药材的来源、野生植物资源实地调查和样品采集,性状和薄层鉴别进行研究,以期为满山香野生药材资源的合理利用和保护提供参考。方法:本草考证、实地采样调查、性状鉴别和薄层鉴别。结果:满山香药材的来源为木兰科五味子属植物合蕊五味子的根和藤茎。满山香植物生长在河谷、山坡常绿阔叶林中或阳光充足的山坡石缝中,成簇生长,种群稀少,蕴藏量小;满山香植物嫩枝叶呈暗红色,根茎剥去皮部后显出鲜艳的粉红色;药材粉末呈棕黄色或棕绿色。薄层色谱在365 nm波长下有特征的荧光斑点,在与β-谷甾醇和胡萝卜苷对照品色谱相应的位置上,显现相同颜色的斑点,用薄层色谱方法可以方便地鉴别满山香药材。

以小鼠子宫增重实验考察四物汤植物雌激素样作用的配伍规律

目的用正交设计原理,通过研究不同配伍比例的四物汤(熟地、当归、白芍、川芎)对幼鼠子宫增重和血清雌激素水平的影响,探讨四物汤的植物雌激素样作用。方法将正常性未成熟雌性ICR小鼠,随机分为9个正交实验组,每组12只,分别灌胃按L9(34)正交实验设计配制的9个生药质量浓度为1g·mL-1的四物汤药液,每天1次,连续7天,第8天眼眶取血,分离血清,用ELISA试剂盒检测血清E2、P、FSH水平,分离子宫并称重,计算子宫系数。结果熟地等四味药物对幼鼠子宫系数影响顺序为B>D>C>A,子宫系数增加较大的组合为A3B2C1D2,川芎对幼鼠子宫系数影响有统计学意义;四味药物对幼鼠血清E2水平的影响顺序为D>A>B>C,血清E2水平较高的组合为A3B3C3D2,四味药物对血清E2水平的影响均无统计学意义;四味药物对血清P的影响顺序为A>C>D>B,血清P水平较高的组合为A1B2C2D2,熟地对血清P的影响有统计学意义;四味药物对血清FSH水平影响顺序为D>A>C>B,血清FSH水平较高的组合为A3B2C2D2,川芎对血清FSH水平影响有统计学意义。结论不同配伍比例的四物汤,植物雌激素活性有显著差异,临床应根据患者的具体情况,综合考虑用药。

面粉中砷和硒的微波消解氢化物发生原子荧光测定法研究

用微波消解 氢化物发生原子荧光法对面粉中砷、硒的测定方法进行了研究.选定了最佳微波消解条件和测定条件,检出限As:0.23ng/mL,Se:0.15ng/mL,线性范围As:0～50ng/mL,Se:0～20ng/mL,线性系数大于0.9993,回收率分别为砷94.3%～104.5%,硒89.6%～107.2%,RSD小于6%.该方法简便快速、灵敏准确.对市售小麦粉精粉和玉米面进行测定,结果满意.

微波消解-氢化物发生原子荧光光谱法测定头发样品中的微量汞

对微波消解 -氢化物发生原子荧光光谱法测定头发样品中微量汞的方法进行了研究。采用HNO3 和H2 O2 作消解剂 ,在最佳微波消解条件和测定条件下 ,线性回归线方程为Y =2 5 9.7c +15 5 .4 ,相关系数r =0 .999 6 ,检出限为 0 .0 1ng/mL ,线性范围为 0～ 2 0ng/mL。测定结果的相对标准偏差为 0 .4 %～ 2 .8% ,回收率为 94 .0 %～10 2 .0 %。

紫外分光光度-CPA矩阵法同时测定2-(2′-呋喃基)苯并咪唑和邻苯二胺

研究了２－（２′－呋喃基）苯并咪唑（ＦＢＤ）和邻苯二胺（ＯＰＡ）在无水乙醇溶液中的紫外吸收光谱，建立了多波长同时测定ＦＢＤ和ＯＰＡ的紫外光度ＣＰＡ矩阵法。ＦＢＤ和ＯＰＡ分别在０．１～１０ｍｇ／Ｌ和１．０～１００ｍｇ／Ｌ的浓度范围，ＦＢＤ和ＯＰＡ的回收率均大于９３％，相对标准偏差小于７．５％。

UPLC测定彝药满山香中芦丁含量

目的:建立超高效液相色谱法(UPLC)检测彝药满山香中芦丁含量的方法。方法:利用BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以水-乙腈(0.1%甲酸)为流动相,梯度洗脱,流速为0.50 mL·min^(-1),柱温为40℃,检测波长为375 nm。结果:芦丁在1.64~210μg线性关系良好,回归线方程为Y=340.3X-1 386.8(r=0.999 6,n=8),平均回收率为100.15%,RSD=2.62%。根茎中芦丁含量范围15.50~199.00μg·g^(-1),叶片中芦丁含量范围4.2~13.6 mg·g^(-1)。结论:该方法简单、重复性好、准确性高,可用于彝药满山香中芦丁含量的测定。

光度法同时测定锌和镉——以AKC矩阵法计算

本文确定了以对羟基卟啉为显色剂同时测定锌、镉的条件。通过使用AKC矩阵法计算解决了混合体系中锌、镉分量的同时测定。两元素的比例在1/4或4/1范围时结果较好,回收满意。

溴化锂制冷剂中铬酸盐测定的快速光度法研究

对溴化锂制冷剂中铬酸盐的紫外 可见分光光度法进行了研究 ,用二苯碳酰二肼作显色剂 ,选择合适的实验条件 ,成功地测定了溴化锂制冷剂中铬酸盐的含量 .通过加标回收测得回收率在 98%～ 10 2 %之间 .方法简单、快速 ,结果准确。

多元系数校正分光光度法同时测定萘,α-氯萘和β-氯萘

本文研究了蔡,α-氯茶和β-氯萘在环己烷中的紫外吸收光谱,建立了该三组分同时测定的多元系数校正分光光度法,回收率在90％～109％之间,相对标准偏差小于1％,并与经典解三元方程组法进行了比较,结果满意。

异补骨脂素的植物雌激素作用及其机制的探讨

目的利用雌激素受体(estrogenic receptor,ER)阳性乳腺癌T47D细胞和ER阴性乳腺癌MDA-MB231细胞观察异补骨脂素(isopsoralen)的雌激素样作用,并探讨其可能的作用靶点和机制。方法以ER拮抗剂ICI182,780为工具药,采用MTT细胞增殖实验观察异补骨脂素对T47D和MDA-MB231细胞增殖的影响;通过流式细胞术检测细胞周期分布的变化。同时,利用实时荧光定量PCR法及流式细胞术检测异补骨脂素对T47D细胞pS2 mRNA及蛋白表达情况的影响。结果1×10-6mol·L-1和1×10-7mol·L-1异补骨脂素能够促进T47D细胞增殖,提高细胞分裂增殖指数,且该作用可被ICI182,780所拮抗;1×10-6mol·L-1和1×10-7mol·L-1异补骨脂素对MDA-MB231细胞增殖无影响。PCR及流式蛋白检测结果显示:1×10-6mol·L-1和1×10-7mol·L-1异补骨脂素可使pS2 mRNA和蛋白表达增加,同时加入ICI182,780可部分拮抗异补骨脂素对pS2表达的诱导和促进作用。结论异补骨脂素具有植物雌激素作用,该效应可通过作用于靶细胞雌激素受体途径实现。

丹参酮ⅡA抗乳腺癌细胞增殖作用研究

目的利用雌激素受体(estrogenic receptor,ER)阳性乳腺癌T47D细胞和ER阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞观察丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA)对细胞增殖活性的影响及其对雌激素受体亚型的调节功能。方法以ER拮抗剂ICI182,780为工具药,采用MTT细胞增殖实验观察1×10-6mol.L-1和1×10-7mol.L-1丹参酮ⅡA对T47D和MDA-MB-231细胞增殖的影响。利用实时荧光定量PCR法及流式细胞术检测其对T47D细胞ERα和ERβmRNA及蛋白表达情况的影响。结果丹参酮ⅡA能够抑制T47D细胞增殖,且该作用可被ICI182,780部分拮抗;对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用较其对T47D细胞的作用更为明显。丹参酮ⅡA可使T47D细胞ERα和ERβmRNA和蛋白表达明显增加,并使ERα/ERβ比值有所上升。结论丹参酮ⅡA具有抑制乳腺癌细胞增殖的作用,抑制强度与对其ER亚型的调节作用相关。

多波长分光光度法同时测定铝和镓

本文确定了以ＰＡＲ为显色剂同时测定铝和镓的条件，并用矩阵法计算，两元素的比例在１／１０或１０／１的范围内结果较好，回收率满意。

雷公藤与昆明山海棠采样调查报告

目的:通过采样调查,获取雷公藤与昆明山海棠野生资源现状、种植、商品流通等方面的资料。方法:在全国13个样地采集样品,比较雷公藤和昆明山海棠的形态特征与生长习性的差异;调查雷公藤与昆明山海棠的野生资源现状、种植信息、民间混淆种及不同市售药材的商品特征。结果:(1)雷公藤和昆明山海棠主要采集于林下或林地边缘,光照和水分对雷公藤属植物的分布有一定的影响;(2)雷公藤与昆明山海棠的野生资源量正在萎缩,两种植物种植历史较短,种植技术水平较低;(3)雷公藤的采收加工尚缺乏规范,市售药材将雷公藤属植物的根、根茎、茎均作商品药材销售,饮片规格多样。结论:雷公藤与昆明山海棠的野生资源正在萎缩,人工种植、采收加工及市售药材的管理等方面的研究尚需规范深入的开展。

β-谷甾醇对T47D细胞雌激素受体表达及其下游基因PS2的影响

目的:观察β-谷甾醇对T47D细胞雌激素受体(estrogen receptor,ER)及下游基因PS2的影响,探讨其植物雌激素样作用机制。方法:以ER拮抗剂ICI182 780为工具药,应用实时荧光定量PCR技术检测ERα、ERβ及PS2mRNA表达变化,western-blot技术检测ERα、ERβ蛋白表达变化。结果:β-谷甾醇可诱导ERα、ERβ及PS2 mRNA表达,且上调ERβ更显著,对PS2 mRNA的诱导作用可以被ICI182 780抑制,能够上调ERα和ERβ蛋白表达,且可以被ICI182 780抑制。结论:β-谷甾醇可以通过ER途径调节下游靶基因的表达而发挥植物雌激素样作用。

中药材质量变异概述

由于受品种、产地、生长年限、采收季节、药用部位、栽培及野生等诸多因素的影响,中药材的质量具有很大变异性。本文在综合分析中药材质量变异影响因子的基础上,提出了针对质量变异研究的采样策略,认为中药材标准制定中应充分考虑指标因子的变异幅度,强调在中成药制剂时,作为原料的中药材应固定产地,稳定栽培措施。