与MELAS综合征相关的线粒体基因异质性研究进展

MELAS综合征是一种由线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)或核DNA突变引起的遗传性疾病,约80%的病例是由m.3243A>G突变导致线粒体功能障碍而引起的。当细胞中同时存在正常和突变的mtDNA,即为异质性,其与MELAS综合征的严重程度关系复杂。本文将系统阐述与MELAS综合征相关的mtDNA异质性的研究,以期为MELAS综合征的诊疗提供新的思路。

GMPPB基因变异致肢带型肌营养不良合并先天性肌无力综合征一例

患者女性,31岁。因波动性四肢无力10余年、加重1年,于2020年10月15日入院。患者10年前无明显诱因出现四肢无力,自述双上肢抬举受限、行走困难,无法长距离行走、蹲起费力,休息后症状略有缓解,呈晨轻暮重。近1年自觉上述症状加重,为求进一步诊断与治疗,于2020年10月15日至我院神经内科就诊,门诊以“发作性下肢无力原因待查”收入院。患者自发病以来,神志清楚、精神差,饮食、睡眠一般,大小便正常,体重无明显变化。既往史、个人史及家族史无特殊。

细胞间粘附分子-1和E-选择素在局部脑缺血中的作用

目的 探讨细胞间粘附分子 1(ICAM 1)和E 选择素 (E selectin)在局部脑缺血炎性反应过程中的作用。方法 采用尼龙线栓堵大鼠大脑中动脉 ,造成局部持续脑缺血模型 ,用RT PCR方法检测缺血侧脑组织持续缺血后不同时间点ICAM 1和E selectinmRNA的表达。结果 假手术组及手术组非缺血侧大脑皮层未见ICAM 1和E selectinmRNA的表达。持续脑缺血后 1h ,手术组缺血侧大脑皮层ICAM 1和E selectinmRNA的表达量开始升高 ;缺血后 6h ,ICAM 1mRNA的上调达高峰 ,且持续至缺血后 48h。而E selectinmRNA的上调在缺血后 12h达高峰。结论 ICAM 1和E selectin参与了持续局部脑缺血后脑组织损伤的病理过程。两者协同发挥作用 ,在白细胞进入缺血区脑组织的病理过程中起重要作用。

缺血性脑卒中血脑屏障内皮细胞ICAM-1的实验研究

目的 探讨高血压大鼠脑卒中过程中血脑屏障 (BBB)内皮细胞细胞间粘附分子 - 1 (ICAM - 1 )的表达。 方法 采用尼龙线栓堵自发性高血压大鼠和正常血压SD大鼠大脑中动脉建立局灶性永久性脑缺血模型 ,在缺血至梗塞不同时期 ,用免疫组化ABC法观察脑组织BBB内皮细胞ICAM - 1表达。 结果 自发性高血压大鼠脑缺血 1h ,BBB之内皮细胞开始出现ICAM - 1的表达 ,至 6h达高峰 ,并持续至 1 68h;正常血压大鼠则在脑缺血至 3h开始出现ICAM - 1的表达 ,至 1 2h达高峰 ,并持续至 1 2 0h。两种大鼠在缺血早期对侧非缺血区脑组织BBB之内皮细胞亦有少量ICAM - 1的表达。 结论 自发性高血压大鼠在未缺血时BBB内皮细胞未见ICAM - 1的表达 ;缺血性脑卒中时ICAM - 1开始表达及达高峰时间均早于正常血压大鼠 ,持续时间亦较正常血压大鼠为长。

脑干出血15例临床分析

随着 CT 的广泛应用,人们对于脑干出血有了进一步的认识。我科1987年4月至1989年8月收治经 CT 确诊的脑干出血15例,占同期高血压性脑出血住院病人的5.3%,现分析报告如下。临床资料一般资料本组男11例,女4例。年龄34～69岁,平均53.5岁。其中有高血压病史者11例,脑梗塞病史者3例,偏头痛病史者1例。安静状态下发病6例,其中4例系睡眠中发病。余均在活动中突然发病。

选择素在缺血性脑损伤中的作用

选择素是粘附分子的一个新家族，由Ｐ选择素、Ｌ选择素和Ｅ选择素组成。３种粘附分子均参与了缺血性脑损伤的炎性病理过程，其中Ｌ选择素主要在白细胞表达，介导白细胞在微血管内皮细胞的滚动接触，Ｐ选择素主要在激活的血小板和内皮细胞表达，而Ｅ选择素仅在血管的内皮细胞表达，后两者共同介导白细胞。

一氧化氮与缺血性脑血管病

一 氧 化 氮 与 缺 血 性 脑 血 管 病郝延磊，蒲传强１９８０年，Ｔｕｒｃｈｇｏｔｔ和Ｉａｗａｄｚｋｉ首先发现许多血管舒张剂，如硝基化物、乙酰胆碱、缓激肽等都是作用在血管内皮细胞，使其释放出一种血管内皮舒张因子（Ａｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍ－ｄｅｒｉ...

行为干预防治卒中后认知功能障碍

卒中后认知功能障碍对脑卒中患者的康复有着巨大影响。卒中后认知功能障碍的治疗,分为药物治疗和非药物治疗,非药物治疗尤其是行为干预治疗越来越引起广大临床医生的关注和重视。尽管大量的研究显示行为干预治疗对卒中后认知功能障碍有明确的治疗效果,但由于个体的差异性,具体的干预方式、方法、时间可能还需要因人而异。

流动剪切力对鼠脑微血管内皮细胞ICAM-1表达的影响

利用内皮细胞流动小室方法 ,对大鼠脑微血管内皮细胞在剪切力作用下细胞内粘附分子 1(ICAM 1,intercellularadhesionmolecule 1)的表达进行了研究。图像分析结果提示 ,脑微血管内皮细胞在剪切力作用下ICAM 1的表达呈特异上调 ,且存在着时间依赖性 ,与一定范围内的剪切力强度无关。用对细胞施加剪切力作用后提取上清液孵育内皮细胞的方法证明 :剪切力对鼠脑微血管内皮细胞ICAM 1表达的影响 ,是直接作用于内皮细胞引起的细胞内的直接反应 ,而不是剪切力导致细胞先释放细胞因子 ,释放的细胞因子再引起ICAM 1变化的间接反应。

高血糖大鼠血脑屏障的超微形态及免疫组化研究

目的探讨糖尿病的慢性高血糖对血脑屏障(BBB)超微形态及其内皮细胞ICAM-1表达的影响.方法采用SD大鼠建立高血糖模型.以透射电镜和免疫组化方法动态观察3天～8个月不同时程高血糖条件下,BBB超微结构的改变及其内皮细胞ICAM-1的表达.结果高血糖大鼠3天～2个月时,BBB改变不明显,有少量ICAM-1表达;3个月时出现明显的BBB改变,ICAM-1大量表达;6～8个月时改变继续加重,ICAM-1仍保持明显表达,范围更广.对照组BBB无改变及内皮细胞ICAM-1无表达.结论长期高血糖能导致大鼠BBB形态异常和内皮细胞ICAM-1表达增加.后者可能是高血糖导致脑组织毛细血管结构及功能异常的重要病理学基础.

两次过滤体外分离培养原代血脑屏障内皮细胞

背景：内皮细胞是血脑屏障结构和功能的主要基础，要了解血脑屏障的作用，就必须在体外建立血脑屏障模型。目的：利用幼鼠脑微血管片段模拟血脑屏障内皮细胞的生物学特性，拟建立一种血脑屏障内皮细胞的体外培养技术。设计、时间及地点：细胞观察，于2006—04在解放军总医院神经内科实验室完成。材料：清洁级1月龄SD大鼠2只，用于脑组织微血管内皮细胞的制备。方法：取大鼠脑组织，加入D—Hank’s液培养基制备匀浆，149μm滤网过滤后收集滤液，以74μm滤网再次过滤。将滤网上的组织刮下，胶原酶消化后传代扩增。取传1代后的脑组织微血管内皮细胞用于指标检测。主要观察指标：细胞形态变化。锥虫蓝染色计数细胞活性。免疫组织化学染色鉴定。结果：①培养12h后大部分脑微血管片段贴壁，两三天微血管片段周边有成簇的细胞团及单个细胞生长，7～10d细胞生长为致密单层并呈典型鹅卵石样排列。传代细胞4h开始贴壁，培养一两天变为多角形并呈致密单层。②生长7～10d的细胞其活性〉96％。③培养的细胞第Ⅷ因子多克隆抗体免疫组化染色显示胞膜和胞浆呈阳性，胞核为阴性，为血脑屏障内皮细胞。结论：采用两次过滤培养技术可成功分离培养出较理想的原代血脑屏障内皮细胞。

外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值对动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者临床结局的预测

目的探讨外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)预测动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aneurysmal subarachnoid hemorrhage,aSAH)患者的临床结局。方法连续选取2015年1月至2019年12月在济宁医学院附属医院神经内/外科住院的aSAH患者413例。根据患者发病3个月后改良Rankin量表(modified Rankin Scale,mRS)评分情况,分为预后良好组(mRS评分0-2)和预后不良组(mRS评分3-6)。通过单因素及多因素分析影响预后独立因素。结果两组患者性别、年龄、高血压病、糖尿病、冠心病史、吸烟史、饮酒、红细胞计数、血红蛋白、血小板、血钾、血糖、血尿素氮、血肌酐,差异均无统计学意义(P>0.05);两组患者入住ICU、Hunt-Hess分级4-5级者、改良Fisher分级3-4级者、白细胞计数、淋巴细胞百分比、单核细胞百分比、中性粒细胞百分比、淋巴细胞计数、中性粒细胞计数、外周血NLR、血钠、活化部分凝血活酶时间、肺炎、谷丙转氨酶,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析示,Hunt-Hess分级4-5级者、入住ICU、NLR高是aSAH预后不良的独立危险因素。结论外周血NLR对aSAH患者临床结局有一定预测价值,NLR高可以作为aSAH预后不良的独立危险因素。

TNF-α和LPS对培养大鼠BBBEC胞间通讯的影响

目的:观察体外培养的血脑屏障内皮细胞(blood brain barrier endothelial cells,BBBEC)之间是否存在缝隙连接及在TNF-α和LPS刺激下BBBEC胞间通讯的改变。方法:利用荧光染料CFDA进行负载,在CLSM下用荧光光淬灭恢复技术观察BBBEC间缝隙连接介导的胞间通讯情况,并检测TNF-α和LPS对BBBEC胞间通讯的影响。结果:正常体外培养的BBBEC经荧光淬灭后,30s内出现荧光恢复,至120s达到高峰。与对照组相比,不同浓度TNF-α刺激BBBEC后,其胞间通讯的降低均有显著性意义(P<0.01);但在不同浓度TNF-α之间,胞间通讯的改变无显著性差异(P>0.05)。与对照组相比,低浓度(1μg/ml)LPS不能显著地降低BBBEC的胞间通讯(P>0.05);但高浓度LPS可显著降低细胞间通讯(P<0.01)。结论:体外培养的BBBEC间存在缝隙连接。TNF-α和LPS均可抑制BBBEC缝隙连接介导的胞间通讯。

TNF-α和LPS对体外培养血脑屏障内皮细胞胞浆内钙离子浓度的影响

目的观察脂多糖 (Lipopolysaccharid ,LPS)和肿瘤坏死因子α(Tumornecrosisfactor -α ,TNF -α)对血脑屏障内皮细胞 (Blood_brainbarrierendothelialcell,BBBEC)胞浆内钙离子浓度(plasmicinnerconcentrationofcalcium ,[Ca2 +]i)的影响。方法用Fluo -3/AM做为荧光探针对钙离子进行负载 ,激光扫描共聚焦显微镜观察不同浓度LPS和TNF -α刺激下BBBEC胞浆内钙离子浓度的变化。结果在TNF -α刺激下 ,单个BBBEC[Ca2 + ]i呈浓度依赖性的一过性升高。不同浓度TNF -α引起的BBBECCa2 + 的荧光强度达高峰的时间基本一致 ,高峰荧光强度和荧光持续时间随TNF -α浓度的升高而增加。低浓度LPS(1μg/ml和10μg/ml)刺激细胞时 ,BBBEC[Ca2 +]i无明显变化 ,高浓度LPS刺激细胞时 ,可见[Ca2 +]i呈短暂性升高 ,随后下降。结论TNF -α和LPS在极短的时间内导致BBBEC[Ca2 + ]i的升高 ,激活BBBEC ,这一过程是缺血性脑损伤极早期的重要病理机制之一。

真空负压ABC法在ICAM-1抗原检测中的应用

ＡＢＣ法是目前应用越来越广泛的免疫组织化学方法。但在其应用过程中仍存在一些不足。其中最主要的是由于非特异性染色过多或背景染色过深，无法充分显示所需的相关抗原；另外，由于染色时程较长，易造成切片脱离载玻片而导致染色失败。细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１...

实验性超负荷血糖大鼠脑缺血后脑毛细血管内皮细胞ICAM-1表达的研究

目的 了解超负荷血糖条件下，脑缺血后，脑毛细血管内皮细胞细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ－１）表达的情况。方法 采用ＳＤ大鼠尾静脉注射链脲霉素，建立超负荷血糖模型。用免疫组化方法动态观察大鼠超负荷血糖１ 月条件下以尼龙线栓堵大鼠大脑中动脉造成持续性局灶性脑缺血后不同时间，脑毛细血管内皮细胞ＩＣＡＭ－１ 的表达。结果 超负荷血糖１月脑缺血０．５ 小时ＩＣＡＭ－１ 的表达明显升高；１小时达高峰，表达范围弥漫整个缺血半球；缺血３～１２ 小时， ＩＣＡＭ－１表达仍很明显，但主要集中在颞、顶叶缺血区；缺血２４ 小时表达不明显；假手术组大鼠脑组织毛细血管内皮细胞ＩＣＡＭ－１只有较少的表达；正常血糖对照组及阴性对照者脑毛细血管内皮细胞均未见ＩＣＡＭ－１ 表达。结论 与正常血糖ＳＤ大鼠脑缺血相比，超负荷血糖大鼠脑缺血后， ＩＣＡＭ－１ 在脑毛细血管内皮细胞上表达出现的早而明显，提示对加重脑缺血后的病理损伤起到了重要作用。

对献血员血液流变学指标、血清脂蛋白变化的研究

作者测定了371例献血员的血色素(Hb)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)及血液流变学指标、血清脂蛋白分类等。同时以371名正常人作对照。结果表明:献血组Hb、RBC、PLT均较对照组降低(P<0.005),甘油三脂、高密度脂蛋白、极低密度脂蛋白下降(P<0.001),而纤维蛋白原升高(P<0.001)。献血时间长短其上述主要指标的改变无意义(P>0.05)。

铁死亡在神经系统疾病中的研究进展

铁死亡(Ferroptosis)是一种铁离子依赖的、以脂质过氧化产物和致死活性氧的积累为特点的非典型的细胞死亡方式,近几年的机制研究发现,铁死亡参与某些神经系统疾病的发生发展,本文将系统的介绍铁死亡在神经系统疾病中的最新研究进展,为临床、疾病发病机制研究提供更多思路。细胞死亡对哺乳动物的生长发育、疾病的发生等各方面至关重要。细胞死亡命名委员会认为细胞死亡有两种方式[1]:(1)细胞意外死亡:常由物理、化学、生物等因素导致,不可逆;(2)调节性细胞死亡:受基因和药物调节,包括程序性细胞死亡,其中半胱天冬酶(caspase)依赖的细胞死亡是最先发现的程序性细胞死亡方式。2012年学者们提出了一种新的细胞死亡方式:铁死亡,其是一种铁离子依赖的、以脂质过氧化产物和致死活性氧的积累为特点的非典型的细胞死亡方式[2]。

献血者血红蛋白、红细胞、血小板、血液流变学、脂蛋白的调查研究

本文采用职业、性别、年龄配对分析的方法,对70例献血者与70例非献血者血液成分、血脂、血液流变学指标进行比较。经配对 t 检验,提示献血组虽多项指标明显降低,但仍然在生理范围之内,结合体格检查和 ECG 无异常发现,表明根据我国人口的一般体质及现在的饮食条件,献血者每次间隔3个月,献血量不超过300ml 是安全的。

Guillain-Barré综合征患者脑脊液蛋白水平与疾病严重性及预后的关系

目的总结Guillain-Barré综合征(GBS)患者CSF蛋白细胞分离现象(AD-CSF)的特点,分析GBS患者CSF蛋白水平与疾病严重性和预后的关系,探讨其临床意义。方法回顾性收集2007年1月至2016年10月在济宁医学院附属医院住院的206例GBS患者的一般临床资料(性别、年龄、前驱感染和电生理分类)、CSF细胞数和蛋白水平、高峰期及12个月后残疾评分(GDS),比较发病后≤7d、8~14d、15~21d、≥22d患者AD-CSF的阳性率。利用Pearson相关及Spearman相关分析电生理正常组、脱髓鞘型组、轴索型组、不能分型组患者CSF蛋白水平与高峰期及12个月后GDS的关系。结果患者发病第3周时腰穿的AD-CSF阳性率最高(85.7%),与其他时间点相比,差异有统计学意义(均P<0.001)。电生理正常组CSF蛋白水平与高峰期GDS呈正相关(r=0.707,P=0.003),与12个月后GDS无相关性;脱髓鞘型组CSF蛋白水平与高峰期及12个月后GDS均呈正相关(r=0.495,P=0.019;r=0.770,P<0.001)。回归分析表明,CSF蛋白水平是脱髓鞘型GBS患者高峰期GDS以及12个月后更高GDS的预测因子。结论GBS患者AD-CSF的阳性率与腰穿的时间密切相关;CSF蛋白水平可作为脱髓鞘型GBS高峰期疾病更重以及预后不良的预测因子。