重组耻垢分枝杆菌Ag85B-ESAT6-rMs对小鼠巨噬细胞功能的影响

目的:探讨重组耻垢分枝杆菌Ag85B-ESAT6-rMs对小鼠巨噬细胞功能的影响。方法:将耻垢分枝杆菌(Ms)与重组耻垢分枝杆菌Ag85B-ESAT6-rMs分别感染小鼠巨噬细胞系RAW264.7,通过抗酸染色和细胞内细菌菌落形成单位计数评价Ms和Ag85B-ESAT6-rMs被巨噬细胞吞噬和消化能力;采用流式细胞术检测巨噬细胞凋亡情况;分别采用实时定量PCR技术和ELISA检测细胞因子TNF-α的表达和分泌水平。结果:小鼠巨噬细胞实验证实,Ag85B-ESAT6-rMs比Ms具有更强的感染和促进巨噬细胞的吞噬能力,Ag85B-ESAT6-rMs可增加巨噬细胞表达和分泌TNF-α的水平,并促进受感染巨噬细胞的凋亡。结论:Ag85B-ESAT6-rMs可以促进巨噬细胞的吞噬消化功能,将有助于增强巨噬细胞对Ms抗原的递呈和机体抗Ms感染的特异性免疫。

新型结核疫苗的研究进展

结核病是一种古老的疾病。据估计,全世界有1/3的人口感染结核分枝杆菌（mycobacterium tuber-culosis,MTB）,每年大约有200万结核病患者死亡,90%的感染者为潜伏感染,病原体以休眠的方式存在于机体内,约有10%的感染者为活动性结核患者。在一些发展中国家,对结核病的预防和治疗相当落后,结核病仍然阻碍社会经济的发展。

结核分枝杆菌Ag85B-ESAT-6融合蛋白重组耻垢分枝杆菌对小鼠的免疫原性研究

目的评价表达Mtb Ag85B-ESAT-6融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌(Ag85B-ESAT-6-rM.s)在小鼠中的免疫原性。方法6周龄BALB/c小鼠经背部皮下注射1×106 CFU(colony-forming unit,菌落形成单位)的Ag85B-ESAT-6-rM.s,同时设M.s免疫组(10只)、BCG免疫组(10只)、Ag85B-ESAT-6融合蛋白免疫组(10只)和生理盐水组(10只)。接种免疫后1～6周,尾静脉采血,检测小鼠外周血CD4+和CD8+T细胞所占百分比;免疫后6周,MTS[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,innersalt]法检测小鼠脾淋巴细胞增殖和酶联免疫斑点检测(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)检测脾淋巴细胞分泌γ干扰素(interferonγ,IFN-γ)、白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)和白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)等细胞因子的水平。结果Ag85B-ESAT-6-rM.s免疫小鼠后能够明显刺激小鼠外周血CD4+和CD8+T细胞的产生,其所占百分比[(59.6±1.5)%]明显高于BCG免疫组[(48.8±2.3)%](t=12.252,P<0.05)和原始M.s免疫组[(45.7±1.6)%](t=20.166,P<0.05)。Ag85B-ESAT-6-rM.s免疫小鼠的脾淋巴细胞增殖指数(3.23±0.31)与BCG免疫刺激的增殖指数(2.95±0.36)相当(t=1.864,P>0.05),但其诱生IFN-γ的能力[斑点形成细胞(spotforming cells,SFC)][(167.5±36.6)SFC/106]明显高于BCG[(98.5±26.9)SFC/106](t=4.804,P<0.05)。结论Ag85B-ESAT-6融合蛋白在耻垢分枝杆菌中的表达能够明显提高M.s的免疫原性,并能够刺激小鼠机体产生有利于抗Mtb感染的免疫反应,作为TB新型候选疫苗具有一定的研究前景。

铜模吸铸法制备Fe-Nd-Al-B-Dy合金的结构和磁性能

为了进一步改善Fe-Nd-Al-B非晶合金的非晶形成能力和磁性能,研究添加Dy元素对此体系合金的显微结构、磁性能以及晶化行为的影响。利用铜模吸铸法制备厚度为1mm的片状(Fe0.51Nd0.35Al0.10B0.04)100-xDyx(x=0,1,3,6)合金。采用示差扫描量热法(DSC),振动样品磁强计(VSM)和X射线衍射仪(XRD)研究Dy对该系列合金非晶形成能力、磁性能和晶化行为的影响。结果表明,添加少量Dy元素使得合金Fe-Nd-Al-B-Dy的磁性能各项指标大幅度提高,得到较好的硬磁性。然而,当进一步提高Dy含量到6%时,合金呈现顺磁性。Fe-Nd-Al-B-Dy系合金晶化后,磁性能会发生很大转变,其中具有较好硬磁性的(Fe0.51Nd0.35Al0.10B0.04)99Dy1合金在完全晶化后呈现为顺磁性。

基于智能手机的青中年2型糖尿病患者健康管理的效果观察

目的:观察基于智能手机对青中年2型糖尿病患者进行健康管理的效果。方法:选择126例青中年2型糖尿病出院患者,随机分为健康管理组和对照组。健康管理组除常规临床治疗外,在智能手机上下载使用交流软件和常见的糖尿病相关应用软件,随访后观察健康管理效果。结果:2组基线水平无统计学差异,具有可比性。干预后健康管理组空腹血糖、餐后2 h血糖和糖化血红蛋白水平比对照组显著改善,差异有统计学意义(P值均<0.000 1);健康管理组能够改善饮食结构、运动坚持情况,患者对治疗依从性和健康满意度均较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:与单纯常规应用临床治疗2型糖尿病相比,联合智能手机平台进行健康管理的方式可为青中年2型糖尿病的健康管理提供一个新的思路。

野战卫生检验装备PU4210与实验室常规尿液分析仪的对比分析

目的将野战检验装备PU4210和实验室常规使用的尿液分析手段进行比对分析,评价其性能。方法对123例尿液标本在PU4210、SIMENS干化学尿液分析仪、Sysmex UF-1000i尿流式细胞仪进行平行检测,并均进行沉渣镜检。计算出PU4210和SIMENS干化学分析仪间各项目的符合率,进行kappa检验评价两者的一致性;并分析PU4210及尿沉渣分析仪与沉渣镜检在检测红细胞和白细胞时的一致性。结果两台干化学尿液分析仪多数项目一致性较高,KET、PRO、NIT、LEU、URO、BIL、GLU、BLD的kappa值分别为1.0、0.929、0.895、0.877、0.805、0.723、0.656、0.573,但SG、PH的完全符合率仅为48.8%,结果间的差异具有统计学意义(P<0.01);PU4210检测红细胞的灵敏度为90.0%,特异性为85.7%,检测白细胞的灵敏度为82.6%、特异性为88.9%。结论野战检验装备PU4210与实验室常规干化学分析仪一致性较好,基本能够满足平时和战时临床对疾病诊断的需要。

表达结核分枝杆菌休眠相关抗原Rv2031c-Rv2626c融合蛋白重组耻垢分枝杆菌的构建与鉴定

利用大肠埃希菌—分枝杆菌穿梭表达载体pDE22,构建能够表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)休眠相关抗原Rv2031c-Rv2626c融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,M.s)。采用聚合酶链反应(PCR)方法,从MTB H37Rv基因组DNA中扩增MTB休眠相关抗原Rv2031c和Rv2626c基因片段并克隆入pMD18-T载体。序列测定正确后分别亚克隆入大肠埃希菌—分枝杆菌穿梭表达载体pDE22。将重组载体pDE22-Rv2031c-Rv2626c电穿孔导入M.s,42℃热诱导表达目的蛋白,并进行SDS-PAGE和Western-blot分析。利用PCR方法扩增获得MTB休眠相关抗原Rv2031c和Rv2626c基因片段,大小分别为435 bp和480 bp。基因测序与Genebank公布的基因序列完全一致。SDS-PAGE分析结果表明重组载体pDE22-Rv2031c-Rv2626c电穿导入M.s后能够特异性表达目的蛋白,大小约为35 kDa,与理论值相符。Western-blot鉴定结果表明抗Rv2031c和抗Rv2626c的单克隆抗体均能够与目的蛋白发生特异性的反应,大小相一致。成功构建表达MTB休眠相关抗原Rv2031c-Rv2626c融合蛋白的重组M.s,并命名为Rv2031c-Rv2626c-rM.s,为其用于结核新型疫苗的研究奠定了基础。

医学微生物学实验教学体会

实验课在医学微生物学整体教学中占有很重要的比重,结合实践教学经验,提出一些教学体会,如充分的课前准备,活跃的课堂气氛,丰富的课后科研等,以期在提高教学效率、改进教学方法上具有借鉴作用。

茄子连作障碍的研究进展

茄子(Eggplant),又称"茄",别称"落苏",是茄科茄属一年生草本植物,热带为多年生。近年来,随着专业化生产和设施栽培的发展,茄子连作普遍发生,致使连作障碍严重。连作障碍(Continuous cropping obstacle)是指在同一块土壤中连续栽培同种或同科的作物时,即使在正常的栽培管理状况下,也会出现长势变弱、产量和品质降低、病虫害严重的现象。

连作茄子根际化合物检测及其化感效应

以正茬和连作茄子不同生育期的根际土壤为试材,采用GC-MS分析和生物测定的方法,研究了茄子根际物质组成和3种典型物质对茄子、黄瓜和番茄的化感效应,以期进一步明确茄子连作障碍发生的可能机制,为缓解连作障碍提供参考依据。结果表明:从现蕾期正茬和连作自根茄、嫁接茄根际分别鉴定出11、11、8种和7种化合物;结果期分别鉴定出7、8、11种和10种化合物。主要包括酯类、醇类、烃类、脂肪酸、醚类、酮类和苯类物质,其中酯类物质种类较多。生物测试结果表明,邻苯二甲酸二异丁酯对茄子和黄瓜具有较强的化感作用,总体表现为低浓度促进幼苗生长,高浓度促进作用减弱或有轻微抑制作用。邻苯二甲酸二辛酯对番茄幼苗具有较强的化感抑制作用。乙酸正十七烷基酯能促进黄瓜和番茄幼苗生长。

某医院2018年检出的肺炎克雷伯菌临床分布及耐药性分析

目的调查肺炎克雷伯菌的分布特征及其耐药特征,为抗菌药物的合理使用提供参考。方法收集某医院2018年全年分离的肺炎克雷伯菌共1241株,检测其对临床常用的17种抗菌药物的耐药性,对其耐药率及科室、患者年龄等分布特征进行统计分析。结果1241株肺炎克雷伯菌中,内科重症监护室(ICU)所占比例最高(39.89%),外科ICU(21.03%)、结核ICU(10.15%)、移植外科(5.96%)次之。临床标本主要来源为痰液(37.47%)、尿液(25.79%)、脓液(18.61%)、血液(7.66%)。除复方磺胺甲噁唑(30.78%)外,菌株对其他16种药物的耐药率均≥56.65%,ICU科室的整体耐药率高于非ICU科室(P<0.05)。碳青霉烯类药物亚胺培南、美罗培南总体耐药率均较高,分别为69.70%、69.54%,且与患者年龄呈正相关(r 2=0.89,P<0.05)。结论肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物广泛耐药,ICU的耐药率高于其他科室。碳青霉烯类药物耐药率较高,且与患者年龄呈正相关。

船用阻尼材料燃烧性能研究

《船上等级噪声规则》的实施对减振降噪的阻尼材料的实船应用提出了迫切需求。基于试验中心开展的阻尼材料耐火试验,本文研究了此类材料在表面可燃性及烟密度试验中的防火性能,并着重分析了不同试验条件和因素对其对评判结果的影响。通过研究,为制定2010 FTP规则对阻尼材料的耐火要求提供试验数据和技术支撑,推动减振降噪材料的实船应用。

基于超高效液相色谱-质谱联用技术探索结核性脑膜炎患者脑脊液的代谢特征

目的对结核性脑膜炎患者的脑脊液进行非靶向代谢组学的研究,分析其脑脊液代谢特征的改变。方法病例对照研究。收集2018年7月至2019年7月解放军总医院第一医学中心神经内科和第八医学中心结核病区临床确诊的结核性脑膜炎住院患者的脑脊液标本,同时收集已确诊的其他病原感染的非结核性脑膜炎的脑脊液标本作为对照组。其中,结核性脑膜炎组有20例,男性12例,女性8例,年龄(37.9±16.1)岁;对照组有20例,男性13例,女性7例,年龄(34.7±14.8)岁。采用超高效液相色谱-质谱联用技术(UPLC-MS)对两组患者的脑脊液进行反相色谱正离子、反相色谱负离子和亲水色谱正离子检测,生成代谢指纹图谱,并使用SIMCA软件对其分析,选择正交偏最小二乘辨别分析(OPLS-DA)的多元统计分析方法,采用OPLS-DA模型的变量重要性投影值(阈值>1)并结合t-test的P值(P<0.05)来寻找两组患者脑脊液中的差异性代谢物质。结果在两组患者脑脊液中共发现10种差异性代谢物质,它们分别是L-异亮氨酸、L-苯丙氨酸、L-犬尿氨酸、L-蛋氨酸、L-酪氨酸、二甲基甘氨酸、L-丙氨酸、L-苏氨酸、L-组氨酸和L-赖氨酸,且与对照组比较,在结核性脑膜炎组均表达上调。结论结核性脑膜炎患者脑脊液中氨基酸代谢发生改变,可为结核性脑膜炎的辅助鉴别诊断和分子基础研究提供一定的实验依据。

供者来源CRKP导致肾移植受者感染、出血的诊疗经验

目的探讨DCD供者来源耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌(Carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae, CRKP)感染导致肾移植受者感染、出血的临床特点,总结诊断、治疗及预防经验。方法回顾性分析2016年7月至2017年12月在医院产生的4例CRKP感染DCD供者及其相应的7例肾移植受者在感染及移植肾出血等方面的临床资料。结果4例供者在CRKP培养方面,分别为1例血培养阳性、1例尿培养阳性1例痰培养阳性及1例血、尿、痰培养全阴性。相对应的7例受者在肾移植术后血培养均为阳性,4例尿培养阳性,3例痰培养阳性,5例移植肾周引流液培养阳性。7例受者中,4例出现移植肾动脉出血,其中1例死亡,出血发生时间平均为术后17.75 d(14~19 d)。7例受者肾移植术后C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)均升高,3例死亡受者CRP持续性高于正常,4例存活受者的CRP在有效抗感染治疗后逐渐降至正常范围。7例受者均应用碳青霉烯类抗生素治疗。2例受者未联合使用阿维巴坦治疗,均死亡;5例受者联合应用阿维巴坦和碳青霉烯类抗生素治疗,1例死亡,1例移植肾功能恢复良好。结论DCD供者的血、尿、痰等体液培养CRKP阳性,均可以导致肾移植受者感染CRKP。即使供者各体液培养全阴性,仍不能除外假阴性结果。术后CRP的持续或再次增高,对受者的CRKP感染有预警作用。且CRP可作为评估抗CRKP治疗是否有效的指标。联合应用阿维巴坦和碳青霉烯类抗生素,对于供者来源的CRKP治疗有效。