尿毒清颗粒对腺嘌呤诱导的慢性肾功能衰竭大鼠肾皮质TGF-β_1及其下游基因mRNA表达的影响

为了研究尿毒清颗粒的作用机制,以灌胃腺嘌呤诱导的慢性肾功能衰竭Wistar大鼠为实验材料,用SYBR Green I实时荧光定量PCR(Real-time Fluorescent Quantitative PCR,Real-time FQ-PCR)技术检测了大鼠肾皮质转化生长因子-β1(Transfer Growth Factor-β1,TGF-β1)及其下游基因mRNA的表达变化,利用免疫组织化学(Immuno Histo Chemistry,IHC)技术检测了CRF大鼠肾皮质TGF-β1蛋白表达的变化.结果发现,尿毒清颗粒可以降低慢性肾功能衰竭大鼠肾皮质TGF-β1及其下游基因mRNA的表达,能够降低大鼠肾皮质TGF-β1蛋白的表达,P<0.05,差异具有显著性.尿毒清颗粒可以通过TGF-β1通路起到缓解慢性肾功能衰竭大鼠病理变化的作用,为尿毒清颗粒治疗慢性肾功能衰竭药理机制研究提供了实验基础.

花椰菜抗黑腐病消减cDNA文库的构建和分析

为全面探索花椰菜抗黑腐病的机理,以花椰菜抗黑腐病近等基因系C712(抗病系)和C731(感病系)为试验材料,构建了一个C712受黑腐病菌诱导表达的正向消减cDNA文库,文库共包含1 476个阳性克隆.经斑点杂交筛选后选择了280个阳性克隆进行测序,获得266条通读ESTs.将获得的ESTs去除载体和接头序列以及重复序列后,共得到202条单一序列.利用NCBI的BlastX软件对所得序列进行蛋白序列同源性比对,结果显示,182条序列在蛋白数据库中可以找到同源序列,主要涉及物质及能量代谢、信号传导、转录调控、苯丙氨酸代谢途径及防卫反应等方面.20个ESTs在GenBank中没有查到对应的同源序列,可能是新基因.cDNA文库的构建为进一步研究花椰菜抗黑腐病相关基因及抗病的分子机制奠定了基础.

肺炎链球菌细胞壁多糖高滴度抗体的制备方法研究

目的:建立一种获得针对肺炎链球菌细胞壁多糖(C-PS)的高滴度抗体的方法。方法:将C-PS多糖与载体蛋白CRM197通过化学方法共价偶联,制备出C-PS多糖蛋白结合物,并通过动物实验比较C-PS和C-PS-CRM_(197)结合物在小鼠体内产生抗体滴度的差别。结果:单独注射C-PS多糖未能产生高滴度抗体,而通过共价结合方法所得的C-PS-CRM_(197)结合物在小鼠体内诱导出高水平血清抗C-PS抗体,并且获得了免疫记忆。结论:肺炎链球菌细胞壁多糖与CRM_(197)蛋白结合物的免疫效果优于单纯C-PS多糖。