6种长效除草剂土壤残留致烟草药害症状及其致害临界值

采用盆栽试验方法,测定氯嘧磺隆、苯磺隆、烟嘧磺隆、莠去津、扑草净及氟磺胺草醚6种长效除草剂土壤残留致烟草药害症状及其致害临界值。结果表明:6种长效除草剂的施药方式均为土壤处理,所以均不同程度地抑制烟株的根、茎、叶的生长。氯嘧磺隆、苯磺隆、烟嘧磺隆3种磺酰脲类除草剂致使烟株药害症状显现时间长,持续时间长,不易恢复;而莠去津、扑草净、氟磺胺草醚则显现时间短,轻者可恢复,严重者可使烟株迅速枯萎死亡。氯嘧磺隆、苯磺隆、烟嘧磺隆、莠去津、扑草净、氟磺胺草醚(有效成分)致烟株药害的临界值分别为:5.31×10-3、2.79×10-3、1.05×10-2、3.35×10-3、2.00×10-3、1.11×10-4mg/kg。

基于交流支路电气剖分思想的配电网电容器优化投切方法

基于交流支路电气剖分思想,提出了一种配电网电容器的优化投切方法。对某一网络状态,电气剖分方法可以把配电网剖分成从变电站根节点到负荷节点的链式剖分子网络,将配电网的电容器优化投切问题转化成求剖分子网络的网损最小值问题。在满足电压约束的前提下,该快速求解方法直接采用物理寻优方式求得电容器的投切分量,使剖分子网络的功率损耗最小,并通过对各投切点的容量分量进行累加归整,得到了原系统各投切点的投切容量。IEEE69节点系统的计算结果表明,该方法在保证得到优良解的前提下具有收敛快、效率高的特点,为解决大型配电网的电容器优化投切问题提供了新的思路和方法。

间日疟原虫部分乳酸脱氢酶基因的克隆及序列分析

目的克隆并测定我国间日疟原虫乳酸脱氢酶(PvLDH)的部分基因序列并进行生物信息学分析。方法根据PvLDH基因已知序列设计合成一对引物,应用PCR技术从间日疟原虫基因组DNA中扩增LDH基因,定向克隆入pMD18质粒。阳性质粒经酶切及PCR鉴定后,用双脱氧链末端终止法进行基因序列测定。应用生物信息学网站www.ncbi.nlm.nih.gov、www.expasy.ch对获得的基因及其推导的氨基酸序列进行生物信息学分析。结果PCR扩增得到特异的间日疟原虫LDH基因序列。酶切及PCR鉴定获得了正确的重组质粒。测序结果表明,获得的间日疟原虫LDH基因全长897bp,编码299个氨基酸。DNAMAN预测PvLDH存在10个潜在抗原表位,均与PfLDH的相应预测表位间有同源序列。同源性分析显示,我国间日疟原虫与SalvadorⅠ株和Belem株间日疟原虫的氨基酸序列同源性为99%,与其它疟原虫LDH的同源性为88%～90%。结论成功克隆了我国间日疟原虫LDH基因,其基因序列与其它疟原虫LDH基因序列有高度同源性。

细胞粘附因子-1与恶性疟原虫感染红细胞结合位点的鉴定

目的 探索恶性疟原虫感染红细胞 (PRBCs)与细胞粘附因子 1 (ICAM 1 )之间的结合位点 ,研制治疗脑型疟的抗粘附药物。 方法 以抗ICAM 1 (I区 )的单抗 1 5 .2为靶 ,采用亲和筛选法对噬菌体随机十二肽库进行 3轮筛选 ,通过ELISA、竞争抑制试验、dot ELISA及Westernblotting鉴定获得的噬菌体短肽与单抗 1 5 .2之间的结合特性。对阳性克隆进行DNA序列测定 ,推导其十二肽的氨基酸序列并与ICAM 1氨基酸全序列进行同源性比较。 结果 经 3轮亲和筛选后 ,结合噬菌体得到良好富集。从第 3轮洗脱液铺制的琼脂板中随机挑取 30个噬菌体单克隆 ,ELISA检测有 2 6个为阳性 ,阳性率达 86 .7%。竞争性ELISA显示多数阳性噬菌体能竞争抑制ICAM 1与 1 5 .2单抗结合。DNA及氨基酸序列分析表明半数以上的噬菌体克隆表达十二肽KLYLIAEGSVAA ,该短肽中K(XX)L(XXX)GSV与ICAM 1的 64～ 73位aa有 50 %的同源性。 结论 阳性噬菌体表达的短肽是 1 5 .2单抗所识别的模拟表位 ,K··L···GSV几个氨基酸可能对ICAM

基于负荷受电路径电气剖分信息的配电网重构算法

大规模配网重构问题的非线性组合优化特点对计算方法的效率造成了极大困难。该文应用交流支路电气剖分方法,由负荷受电剖分路径电气距离指标构造一种新的物理寻优方法。该方法在合环操作形成的闭环中根据电气距离为负荷分配供电路径,从而确定应断开的支路,使损耗降到最低。同时,根据定义的单位功耗以及物理规则确定需计算电气距离的负荷节点以减少运算量,并通过优化待处理分段开关的顺序以保证能寻找到更优良的解。由于算法属于物理寻优方式,避免了不收敛或者难收敛的情况。IEEE69系统分析表明,算法具有快速求得优良解的特性,能够应用到大型配电网络重构问题。

配电网络电容器优化投切的制约进化策略

针对传统进化规划方法寻优效率低的问题,提出了配电网络电容器优化投切的制约进化策略。利用配电网络物理规则求得投切点无功补偿容量调节范围,用于约束解的产生和进化,缩小寻优空间。通过在解空间中心点附近合理配置初始点,避免初始解不可行。采用小种群多代进化方式,避免求解过程产生大量不可行解。最后选择适合电容器优化投切问题的随机动态步进方式,在寻优的不同阶段,采用不同的步长,使优化效果和效率得到明显改善。使用制约进化策略对不同的配电系统进行分析,结果表明:制约进化策略在保证优化精度的同时,具有更高的优化效率,可以适应在线应用。

自制免疫层析试剂盒检测恶性疟原虫HRP-II抗原的评价

目的对自制免疫层析试剂盒检测恶性疟原虫富组氨酸蛋白II(HRP-II)的敏感性、特异性、稳定性等技术参数进行评价,为试剂盒的临床应用提供科学依据。方法对试剂盒的敏感性、特异性、灵敏度、精密度、稳定性等性能指标进行测定,并与国外的同类试剂盒进行比较研究。结果自制试剂盒操作简便,反应快速;以血涂片显微镜检查为金标准,对49例恶性疟血样、30例间日疟血样、43例正常人血样检测的敏感性为98%,特异性为100%;对恶性疟原虫血样的最小检出量为原虫密度0.01%,对重组HRP-II蛋白的最小检出量为10ng/ml;试剂盒精密度和稳定性均较好;各项性能指标相当或优于国外同类试剂盒。结论自行研制的恶性疟原虫免疫层析检测试剂盒测定结果较为准确、稳定和可靠,适用于恶性疟的快速诊断、流行病学筛查、疟区献血员筛查及过境边民筛查。

单克隆抗体3A3、2E7用于恶性疟Dipstick检测的初步研究

目的 建立一种快速、简便 ,适用于基层的恶性疟免疫诊断方法。 方法 将抗恶性疟原虫 HRP- 的单克隆抗体 3A3、2 E7纯化后经配对筛选 ,利用 Dipstick-免疫胶体金技术 ,制成诊断恶性疟的 Dipstick层析条。用该层析条对 115份疟疾患者血样 ,2 0份非疟疾病人血样及 10份正常人血样进行检测 ,评价其敏感性和特异性 ,并对其稳定性、重复性等进行了初步研究。 结果 用该法检测 145份血样 ,其对恶性疟的敏感性和特异性分别为 83.1%及 97.5 % ,已包被抗原、抗体的 Dipstick条在 4℃及室温下可保存 3个月以上 ,对 30份血样重复检测 4次结果完全一致。 结论 Dipstick-免疫胶体金模式快速、简便 ,适用于基层应用 。

恶性疟原虫网状细胞结合蛋白同源体5F1段的克隆、表达及初步鉴定

目的克隆表达恶性疟原虫网状细胞结合蛋白同源体5(PfRh5)F1片段,并评价其抗原性。方法 PCR扩增目的基因片段,克隆到表达载体pET28a(+)中,构建PfRh5F1/pET28a原核表达载体。IPTG诱导表达目的基因,SDS-PAGE电泳分析表达产物,并用WesternBlot检测其抗原性。结果成功构建了PfRh5F1/pET28a原核表达系统,并在大肠杆菌中以包涵体形式高效表达,表达产物能被恶性疟原虫感染患者血清识别,而不能被间日疟原虫感染患者及正常人血清识别。结论恶性疟原虫PfRh5F1段在大肠杆菌中获得高效表达且表达产物具有良好的抗原性。

噬菌体展示ICAM-1模拟肽的制备及活性鉴定

目的:获得具有生物学活性的细胞间黏附分子-1(ICAM-1)模拟肽。方法:以噬菌体扩增及PEG沉淀法,大量制备展示十二肽P1、P2的噬菌体。采用ELISA、竞争抑制试验及免疫组化染色法,分别鉴定P1、P2模拟ICAM-1分子的结合特性及生物学活性。结果:噬菌体展示肽P1、P2能与抗ICAM-1单克隆抗体(mAb)15.2特异性结合。该结合作用可被ICAM-1分子竞争性抑制,P1、P2能模拟ICAM-1分子与LFA-1结合的功能。结论:噬菌体展示的短肽P1、P2具有天然ICAM-1的生物学活性。

噬菌体随机肽库筛选抗恶性疟原虫乳酸脱氢酶单抗2A5的识别表位

目的利用噬菌体随机肽库技术筛选恶性疟原虫乳酸脱氢酶(pfLOH)抗体2A5的识别表位。方法以抗pfLDH的单抗2A5筛选噬菌体随机12肽库,挑取阳性克隆测定DNA序列,推导其氨基酸序列并进行同源性分析。通过ELISA、竞争抑制试验鉴定获得的噬菌体短肽与单抗2A5之间的结合特性。结果从噬菌体随机12肽库中筛选出21株可与2A5单抗特异结合的噬菌体克隆,其中多数克隆呈现核心序列SQK(R)L,该序列与pfLDH的一级序列具有一定同源性。竞争抑制实验显示,带有核心序列的噬菌体克隆可与pfLDH竞争结合单抗2A5。结论 SQK(R)L是pfLDH单抗2A5特异识别的表位。

ICAM-1表位模拟肽的合成与鉴定

目的对合成的ICAM-1模拟肽P1(KLYLIAEGSVAA)的抗原性及生物活性进行鉴定。方法化学合成ICAM-1模拟肽KLYLIAEGSVAA,以间接ELISA及竞争抑制试验鉴定合成肽的抗原性,以玻片免疫组化方法鉴定合成肽的生物活性。结果合成肽能与抗ICAM-1单抗15.2发生特异性结合,并且能够竞争抑制ICAM-1分子及相应的阳性噬菌体克隆与单抗15.2的结合作用。玻片免疫组化显示合成肽及ICAM-1分子均能有效抑制相应的阳性噬菌体展示肽与白细胞的结合。结论合成的短肽具有ICAM-1与15.2抗体结合的抗原性,并能有效模拟ICAM-1分子与白细胞结合的功能。

核酸疫苗——寄生虫疫苗的新希望

新近迅速发展起来的核酸疫苗为正面临困境的寄生虫疫苗尤其是疟疾、血吸虫病疫苗的研制带来了新的希望。核酸疫苗既具有重组亚单位疫苗的安全性,又具有减毒活疫苗诱导全方位免疫应答的高效的持久性。本文对核酸疫苗的研究动态、作用机制及应用前景,特别是抗寄生虫感染等方面进行了阐述和探讨。

医学生物技术专业抗体工程综合性实验教学探索

抗体工程是我校生物技术专业本科生的核心课程,抗体工程实验课是其重要组成部分。针对抗体工程技术发展的特点,我们探索了以贯穿单克隆抗体制备的全过程为核心的综合性实验课程系统,通过实验内容、教学方式、考核评价体系等方面的改革,在保证掌握基础技能实验的基础上,着重培养学生综合分析、解决问题及创造性思维的能力。

沉没成本理论在金融危机背景下的应用——浅谈投资者理性投资行为的建立

金融危机的爆发对企业和个人投资者带来了不同程度的影响,理性的投资行为随着沉没成本的增加而向非理性的方向发展。创造投资收益空间是投资者的根本目标,为此本文将结合金融危机的背景探讨沉没成本理论的应用。首先介绍了沉没成本理论的内涵以及相关案例,然后分析金融危机爆发后企业和个人投资理性缺失的表现和原因。在此基础上,提出了理性投资者应建立的弹性投资收益空间理念,并对实现的方法做出了规划。

抗恶性疟原虫重组HRP-Ⅱ单克隆抗体的制备与鉴定

采用恶性疟原虫重组富组氨酸蛋白 (HRP- )融合表达蛋白免疫 BAL B/ c小鼠 ,取脾细胞与 SP2 / 0细胞融合 ,经 3次 EL ISA筛选 ,共获得 6株分泌抗恶性疟原虫重组 HRP- 单克隆抗体的杂交瘤细胞株 (1B11、1D10、2 E7、3A3、3F9、4G5 ) ,用有限稀释法进行克隆、亚克隆及扩大培养 ,并用杂交瘤细胞经腹腔接种 BAL B/ c小鼠制备腹水。 6株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体 (Mc Ab)经琼脂双扩散鉴定均为 Ig G1亚类 ,Dot- EL ISA及 Western blot分析显示 6株 Mc Ab都能与重组 HRP- 抗原发生特异性反应 ,但其中只有 2 E7和 3A3在 Dipstick免疫胶体金反应中能与恶性疟原虫培养上清中的天然 HRP-

弓形虫主要表面抗原P_（30）的研究进展

弓形虫主要表面抗原Ｐ_（３０）的研究进展郝文波综述沈继龙余新炳审校弓形虫是一种世界性分布的寄生原虫，能引起弓形虫病，该病常致早产、流产、畸胎，在诸如艾滋病病人、恶性肿瘤患者、长期应用免疫抑制剂治疗的病人等免疫功能严重受损者，弓形虫是引发致死性病变的主?..

从创业板的推出看完善中国资本市场的意义

创业板起源于上世纪60年代，当时以美国为代表的北美和欧洲等地区为了解决中小企业的融资问题，开始大力创建各自的创业板市场，也造就全球有名的美国纳斯达克。中国的首批10只创业板新股将于2009年9月25日申购，此次也正式意味着中国资本市场的新生力量——创业板终于抛头露面。

噬菌体随机环7肽库筛选恶性疟原虫EBA-175的结合肽

目的从噬菌体随机环7肽库中筛选恶性疟原虫EBA175抗原的结合肽。方法以EBA175重组蛋白为靶筛选噬菌体随机环7肽库,通过ELISA、竞争抑制试验、Westernblot等方法鉴定获得的噬菌体短肽与EBA175之间的结合特性。对阳性克隆进行DNA序列测定,推导其氨基酸序列并与GPA氨基酸全序列进行了同源性比较。结果获得9株可与EBA175结合的阳性噬菌体克隆,序列分析显示为3种氨基酸序列,P1(MLLITIR)、P2(TRKLPRT)、P3(KRLMPLK)。其中出现频率最高的P1序列中LLI与EBA175的受体GPA的108110位氨基酸同源。竞争性ELISA显示展示序列P1的噬菌体能竞争抑制EBA175与其单抗的结合。结论获得了可与EBA175特异结合的阳性噬菌体短肽,·LLI··几位氨基酸可能对EBA175与GPA的结合起重要作用。

恶性疟原虫感染的红细胞膜表面蛋白1模拟肽的筛选及鉴定

目的筛选恶性疟原虫感染的红细胞膜表面蛋白1(PfEMP-1)的噬菌体表位模拟肽。方法细胞间粘附分子ICAM-1模拟12肽(KLYLIAEGSVAA)能模拟ICAM-1分子与疟原虫感染红细胞结合的功能,以展示该短肽的噬菌体为靶,采用差减筛选法(subtraction method)对噬菌体环7肽库进行3轮筛选,通过ELISA、竞争抑制试验鉴定获得的噬菌体短肽与ICAM-1之间的结合特性。对阳性克隆进行DNA及氨基酸序列分析并与PfEMP-1氨基酸序列进行同源性比较。结果ELISA筛选22个克隆有3个为阳性克隆,氨基酸序列分析显示2个克隆的展示的短肽序列为C-ITAVPVR-C,另1为C-DIMGGYN-C。同源性分析未发现2短肽序列与野生型MC株恶性疟原虫PfEMP-1的氨基酸序列有同源性。但竞争抑制试验显示3个阳性克隆均可与15.2单抗间互相竞争抑制与ICAM-1分子的结合。结论获得2种PfEMP-1噬菌体构象表位模拟肽,两短肽能与ICAM-1分子特异性结合。