EDTA提高Microtox检测有机化合物毒性灵敏度的研究

[目的]改善明亮发光杆菌细胞通透性、提高Microtox对有机污染物生物毒性检测的灵敏度。[方法]以乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)处理明亮发光杆菌,用疏水荧光探针N-苯基-1-萘胺(NPN)检测明亮发光杆菌通透性的改变,应用发光细菌急性毒性检测技术(Microtox)检测有机化合物在通透性改变前后的50%发光抑制浓度(EC50)。[结果]加入EDTA后菌体对NPN的吸收系数明显增加,40mM的ED-TA可使明亮发光杆菌对NPN的吸收系数增加47.7%。未经EDTA处理时,1,10-二氮杂菲、1,4-对位苯醌、双酚A、4-异丙基苯酚经Microtox检测的EC50值分别为181.2、0.071、37.6、0.79mg/L,处理后分别降为115.1、0.054、26.24、0.603mg/L。[结论]EDTA可以提高明亮发光杆菌对有机化合物的通透性,使Microtox检测生物毒性的灵敏度提高。

微波消解-电感耦合等离子体质谱法测定化妆品中硼及硼酸盐含量

建立了化妆品中硼及硼酸盐的微波消解-电感耦合等离子体质谱检测方法。以硝酸-过氧化氢体系微波消解处理样品,以钇作为内标元素,用电感耦合等离子体质谱法测定。方法线性范围为0~800μg/L,按取样量为0.50 g定容至10.0 m L计算,方法的检出限为36μg/kg,样品加标回收率在93.75%~100.38%之间。

高肥力条件下行距对泛麦8号群体质量及产量的影响

试验研究了高肥力条件下4种不同行距种植方式对泛麦8号群体质量及产量的影响,结果表明:高肥力条件下不同行距对泛麦8号的群体动态、茎秆质量、产量及其构成要素有不同的影响效果。试验条件下4种行距种植方式中产量表现以15:30cm宽窄行为最高,其次是15:35cm宽窄行,以20:20cm等行距种植产量最低。

ICP-MS测定食用菌中铅、总砷、总汞和镉的含量

本文建立了电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)同时测定食用菌中铅、总砷、总汞和镉的方法。样品经微波消解后定容到一定体积,用ICP-MS在氦气碰撞模式下进行分析,用仪器条件优化和混合内标等方式校正干扰和漂移。本方法的相关系数≥0.9994,检出限为0.0001~0.00055 mg/kg,回收率在86.7%~105.0%之间。本实验分析的129份上海市闵行区市售食用菌样品中,共有12份样品涉及铅或镉元素超标,超标率为2.3%。总体看,上海市闵行区市售食用菌中重金属污染水平较低。

充分利用网络搞好信息技术教学

世界已经进入21世纪，随着以计算机技术、网络技术、通讯技术为代表的信息技术的迅猛发展，计算机和互联网在社会各个领域中得到广泛应用，逐步改变着人们的工作、学习和生活方式，作为信息技术教师，要面对现实，迎接挑战，转变观念，投身于教学中。

鱼酥制品中甲基汞和乙基汞的检测研究

建立了同时测定鱼酥制品中甲基汞和乙基汞的液相色谱-电感耦合等离子体质谱的分析方法。样品以盐酸为提取液微波辅助萃取,采用5%甲醇+(0.10 mol/L乙酸铵-1 g/L L-半胱氨酸)为流动相,SB-C18柱(150 mm×4.6mm,5μm)进行分离,用电感耦合等离子体质谱仪进行检测,整个检测过程可在1 h内完成。试验优化了液相色谱流动相、微波萃取的萃取时间和温度等条件。在0~50μg/L范围内甲基汞和乙基汞的线性关系良好,线性相关系数大于0.999,甲基汞和乙基汞检出限(S/N=3)分别为0.001 8 mg/kg和0.003 6 mg/kg。样品在3个加标水平下的甲基汞和乙基汞的平均回收率分别为91.0%~98.8%和80.5%~87.6%,相对标准偏差(RSD)分别为2.6%~4.0%,3.3%~4.1%。该方法前处理简便,精密度高,准确性好,适用于鱼酥中甲基汞和乙基汞的测定。

ELISA与免疫传感器在大肠杆菌内毒素检测中的应用

目的:研究两种基于免疫反应和电化学的简便、灵敏、特异检测内毒素的新方法。方法:应用ELISA建立PMB-ET-ELISA法和免疫传感器法对大肠杆菌内毒素进行分析,并对两种方法检测范围和最低检测限进行分析和比较。结果:ELISA方法检测精制内毒素范围为1μg/ml～1 mg/ml,检测大肠杆菌O157:H7范围为105 CFU/ml～109 CFU/ml,相当于内毒素190μg/ml～2918μg/ml。免疫生物传感器法检测精制内毒素范围为1μg/ml～1 mg/ml;检测大肠杆菌O157:H7范围为106 CFU/ml～109 CFU/ml,相当于内毒素288μg/ml～1416μg/ml。结论:建立的ELISA和免疫传感器两种检测内毒素新方法有效、稳定、可用。

微生态水样中活的非可培养态大肠杆菌O157：H7的检测

目的监测大肠杆菌O157：H7在微生态汉江水中活的非可培养态；探讨荧光染色、异养平板计数和ELISA检测活的非可培养态大肠杆菌O157：H7的可行性。方法将大肠杆菌O157：H7投加到模拟微生态汉江水样中，通过改变温度和营养条件，分别采用吖啶橙染色、活菌直接计数-5-氰基-2，3-二-（P-苄基-四唑氯化物）染色、活菌直接计数·萘啶酮酸染色、异养平板计数和ELISA法实时监测大肠杆菌O157：H7的存活情况。结果在4℃、寡营养条件下，大肠杆菌O157：H7在汉江水中存活58d后进入活的非可培养态，此时采用活菌直接计数-5-氰基-2，3-二-（P-苄基-四唑氯化物）染色法测得活菌数为1．2×10^5CFU／ml，活菌直接计数-萘啶酮酸染色法测得活菌数为9．0×10^4CFU／ml，异养乎板计数法测得可培养菌数为0，ELISA法测得微生态汉江水中大肠杆菌O157：H7总菌数在58d内基本稳定于10^6CFU／ml的初始菌数水平。结论在4℃、寡营养条件下，大肠杆菌O157：H7在微生态汉江水中可进入活的非可培养态；ELISA结合荧光染色、异养平板计数，能定量检出活的非可培养态大肠杆菌O157：H7。

内毒素的多粘菌素B与抗体联用夹心ELISA检测法

目的建立细菌内毒素的多粘菌素B(PMB)与抗内毒素兔多克隆抗体联合夹心ELISA(sELISA)检测法。方法将PMB包被于酶标板作固相,封闭后逐次加入不同浓度的大肠杆菌内毒素,优化抗内毒素兔多抗和酶标抗体的浓度,建立sELISA方法。结果在0.1～100μg/ml范围内,内毒素浓度与OD值呈正相关关系,回归方程为y=0.094lnx+0.227,R2=0.914,最低检测限为100 ng/ml。结论该方法适用于内毒素检测。

内毒素多克隆抗体制备及其在ELISA中应用

目的制备抗大肠杆菌精制内毒素的兔多克隆抗体并建立检测内毒素的间接竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)方法。方法大肠杆菌精制内毒素作为免疫原,采用逐渐加强免疫剂量的方法免疫家兔,制备抗体,将抗体用于ELISA检测精制内毒素;并与复合型内毒素进行反应。结果随着免疫次数增加,抗血清效价逐渐提高,最后一次免疫后血清效价达到1∶6 400;在包被抗原浓度100μg/mL和兔多抗稀释比1:500最佳使用条件下建立间接竞争性ELISA,内毒素浓度与吸光度(A)值成反比例关系,线性回归方程为:y=-0.1 ln(x)+0.765,检测最低内毒素浓度为50 ng/mL;兔血清与复合型内毒素反应效价为1∶16 000。结论成功制备出抗精制内毒素兔多克隆抗体,且能与复合型内毒素反应。

气相色谱-串联质谱法同时测定水中28种溴代阻燃剂

目的 建立水中28种溴代阻燃剂的气相色谱-串联质谱同时测定的方法。方法 取100 ml水样,加盐溶解后再加入同位素内标,用20 ml正己烷-甲基叔丁基醚(3:1,V/V)液液萃取2次,复合硅胶固相萃取柱净化,5 ml正己烷-二氯甲烷(1:1,V/V)洗脱3次,浓缩至近干后用100μl正己烷复溶,采用气相色谱-三重四级杆质谱法测定,多反应监测模式检测,内标法定量。结果 28种物质分离效果好,在2 ng/L~100 ng/L[其中十溴联苯醚和四溴邻苯二甲酸双(2-乙基己基)酯为20 ng/L~1 000 ng/L]内线性良好,相关系数为0.997 5~0.999 9;方法检出限为0.22 ng/L~6.58 ng/L;平均回收率为63.6%~128%;相对标准偏差为1.13%~23.0%。结论 该方法具有灵敏度高、精密度好、准确度高、通量高、分析周期短的优点,可以实现水中28种溴代阻燃剂的同时测定。