阿片受体影响雄性睾酮分泌的外周机制研究

目的:研究阿片μ受体对雄性睾酮的影响和外周机制。方法:通过在体动物模型的睾丸内吗啡注射和离体培养睾丸组织的特异性μ受体拮抗剂和激动剂处理,检测血浆、培养基和睾丸匀浆睾酮水平、睾丸匀浆睾酮合成酶m RNA水平、睾丸匀浆胰岛素样生长因子1(IGF1)蛋白和m RNA表达水平。结果:睾丸内注射吗啡后血清睾酮水平下降[(722.11±121.02)vs.(346.91±75.31)pg/mL;t=7.898,P=0.001],睾丸匀浆中的睾酮水平下降[(133.61±16.82)vs.(66.56±14.96)pg/mg总蛋白;t=8.941,P=0.001],同时下调睾酮合成酶的表达;吗啡睾丸内注射显著降低睾丸内IGF1蛋白[(7.93±2.13)vs.(2.54±0.74)ng/mg总蛋白,t=7.155,P=0.001]和m RNA[(3.22±1.12)vs.(1.66±0.55),t=3.751,P=0.001]的表达。睾丸体外培养模型中阿片μ受体特异性的激动剂(DAMGO)下调培养基的睾酮水平及睾丸匀浆合成酶、IGF1的表达;阿片μ受体抑制剂(CTOP)则上调睾酮水平及合成酶、IGF1的表达。结论:阿片类药物作用于睾丸Sertoli细胞(支持细胞)表面的阿片μ受体,抑制IGF1的合成,进而减少睾丸Leydig细胞(间质细胞)睾酮合成酶Scarb1(清道夫受体B1)、Star(类固醇合成快速调节蛋白)、3βHsd(3-羟基-5类固醇脱氢酶)、Cyp17α1(17α-羟化酶)和17βHsd(17β羟基固醇脱氢酶)的表达,最终导致睾酮合成减少。

邻苯二甲酸单乙基己基酯对神经干细胞增殖和迁移的作用

目的探讨邻苯二甲酸单乙基己基酯(MEHP)对原代神经干细胞(NSC)和NE-4C小鼠细胞增殖和迁移的影响。方法原代NSC来源于孕15 d(E15)远交群SD胎大鼠脑皮质;NE-4C细胞为小鼠NSC。MEHP 0,1,10,100和1000μmol·L^(-1)处理72 h后,CCK-8法检测细胞活力;5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(Ed U)法检测细胞增殖能力;Transwell小室检测细胞迁移;Western蛋白印迹法检测糖皮质激素受体(GR)、Y性别决定区框2(Sox2)、信号传导与转录激活因子3(Stat3)等基因及蛋白的表达。结果 CCK-8结果显示,与正常对照组相比,MEHP1000μmol·L^(-1)作用72 h后,NE-4C和NSC细胞活力明显减弱,分别为正常对照组的70.3%和40.0%。Ed U结果显示,与正常对照组相比,MEHP 100μmol·L^(-1)组细胞增殖率降低,分别为正常对照组的74.8%和12.0%(P<0.05)。Transwell实验发现,MEHP 100μmol·L^(-1)处理72 h后,NE-4C细胞的迁移率降低至(63.4±2.0)%(P<0.05)。MEHP 100μmol·L^(-1)组NE-4C中与增殖和迁移相关的基因GR,Stat3和Sox2的表达下调,分别为正常对照组的49.8%,26.0%和14.0%(P<0.05);在NSC中的相应基因也下调,分别为正常对照组的10.0%,14.0%和15.3%;在NE-4C中与增殖及迁移相关的蛋白GR,GRβ,p-Stat3和Sox2的表达下调,相对表达量分别为0.92±0.17,0.87±0.35,0.62±0.24和0.81±0.22(P<0.05);在NSC中相应蛋白表达也下调,相对表达量分别为0.82±0.20,0.56±0.12,0.53±0.20和0.84±0.36(P<0.05)。结论大剂量MEHP可抑制NSC的增殖和迁移能力,其机制可能是通过GR介导的Stat3及Sox2的作用实现。

低给药速度下蛛网膜下腔阻滞对老年患者TURP手术麻醉效果的影响

目的评估低给药速度在腰椎椎体(L3~L4)间隙行重比重罗哌卡因单次蛛网膜下腔阻滞对老年患者经尿道前列腺电切术(transurethral resection of prostate,TURP)手术麻醉效果的影响。方法择期行TURP的老年患者102例,术前右侧卧位下超声定位下腰椎椎体L3~L4腰椎椎间隙,采用随机数字表随机分3组(n=34):L组给药速度0.025 mL/s,M组给药速度0.05 mL/s,H组给药速度0.1 mL/s。记录并比较3组的给药前(T_(0))、给药后1 min(T_(1))、5 min(T_(2))、10 min(T_(3))、15 min(T_(4))、30 min(T_(5))各时点的血流动力学变化、麻醉平面以及恶心呕吐、头晕头痛等不良反应的发生率。结果与M、H组相比,L组收缩压(systolic blood pressure,SBP)下降幅度较低,血流动力学波动较小(P<0.05);血管活性药使用率低(P<0.05);医生满意度评分、患者满意度评分高(P<0.05);恶心呕吐发生低(P<0.05)。结论以低给药速度(0.025 mL/s)对老年患者行单次蛛网膜下腔阻滞血流动力学更加稳定,且具有更高安全性,值得临床推广。

阿片相关雄激素缺乏症的外周机制及胰岛素样生长因子1的治疗作用

目的探讨阿片相关雄激素缺乏症(OPIAD)的外周机制及胰岛素样生长因子1(IGF1)对OPIAD的治疗作用。方法雄性成年C57BL/6小鼠sc给予吗啡5 mg·kg^(-1)或等体积生理盐水,4 h后取外周血和睾丸组织。分离雄性成年小鼠睾丸曲细精管组织培养24 h后进行以下分组:(1)正常对照组和IGF1组(IGF1100μg·L^(-1),孵育12,24和48 h);(2)正常对照组与阿片μ受体激动剂DAMGO组(DAMGO 10μmol·L^(-1),孵育48 h);(3)正常对照组、IGF1组(IGF1100μg·L^(-1),孵育48 h)、DAMGO组(DAMGO 10μmol·L^(-1),孵育48 h)和IGF1+DAMGO组(同时加入DAMGO 10μmol·L^(-1)和IGF1100μg·L^(-1),孵育48 h);正常对照组、溶剂组(0.01%DMSO,孵育24 h)、IGF1组(IGF1100μg·L^(-1),孵育24 h)、鬼臼苦素(PPP)组(PPP 1μmol·L^(-1),孵育24 h)和PPP+IGF1组(PPP 1μmol·L^(-1)孵育2 h后,加入IGF1100μg·L^(-1)继续培养24 h)。用超高效液相色谱-串联质谱法检测小鼠血清和睾丸组织及曲细精管组织培养基中的睾酮含量,用ELISA检测小鼠血清和睾丸组织及曲细精管组织培养基中IGF1含量,用荧光定量PCR检测曲细精管组织中睾酮合成相关酶mRNA水平。结果小鼠实验中,吗啡组小鼠血清和睾丸组织中睾酮和IGF1含量较正常对照组显著降低(P<0.05)。离体实验中:(1)IGF1孵育24和48 h组曲细精管培养基中睾酮含量均较相应时间正常对照组明显升高(P<0.01)。(2)DAMGO组曲细精管培养基中IGF1含量较正常对照组显著降低(P<0.01)。(3)与正常对照组相比,IGF1组曲细精管培养基中睾酮含量明显升高(P<0.01),DAMGO组降低(P<0.05);IGF1组和IGF1+DAMGO组曲细精管组织中胆固醇合成急性调节蛋白(Star)和17β-羟基类固醇脱氢酶3(17βHsd3)mRNA水平显著升高(P<0.05),DAMGO组3β-羟化类固醇脱氢酶1(3βHsd1)mRNA水平显著降低(P<0.01)。与DAMGO组相比,IGF1+DAMGO组培养基中睾酮含量显著升高(P<0.01);IGF1+DAMGO组曲细精管组织中Star和17βHsd3 mRNA水平显著升高(P<0.05)。PPP+IGF1组曲细精管培养基中睾酮含量与IGF1组相比明显降低(P<0.01),而与PPP组相比无明显变化。结论OPIAD存在阿片μ受体介导的外周机制。IGF1通过其受体促进睾酮的合成分泌,可纠正DAMGO引起的睾酮合成分泌抑制。

反向握持式置管方法对行左侧可视双腔支气管导管置入术患者血流动力学的影响

目的探讨反向握持式置管对行左侧可视双腔支气管导管(video double-lumen bronchial tube,VDLT)置入术患者置管时间、血流动力学和术后并发症的影响。方法行胸腔镜下右肺叶切除术患者90例,均行左侧VDLT置入,根据置管握持手法分为执笔组30例,正向组30例,反向组30例。比较3组患者体质量指数、ASA分级、双腔管型号、手术时间、首次置管成功率、置管时间、定位时间等临床资料,比较3组麻醉诱导前(T_(0))、置管前即刻(T_(1))、置管后即刻(T_(2))心率、收缩压、舒张压、平均动脉压及术后48 h时咽喉疼痛、声音嘶哑发生情况。结果反向组置管时间[4.0(2.8,6.0)s]短于执笔组[8.0(6.0,12.0)s]、正向组[9.0(7.0,12.0)s](P<0.05),执笔组与正向组比较差异无统计学意义(P>0.05);3组年龄、性别比例、体质量指数、ASA分级、双腔管型号、手术时间、首次置管成功率、定位时间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。3组T_(2)时心率、收缩压、舒张压、平均动脉压均高于T_(0)、T_(1)时(P<0.05),3组T_(1)时收缩压、舒张压、平均动脉压均低于T_(0)时(P<0.05),心率与T_(0)时比较差异无统计学意义(P>0.05);T_(2)时反向组心率、收缩压、舒张压、平均动脉压均低于执笔组、正向组(P<0.05),执笔组与正向组比较差异无统计学意义(P>0.05);T_(0)、T_(1)时3组心率、收缩压、舒张压、平均动脉压比较差异均无统计学意义(P>0.05)。术后48 h时,反向组咽喉疼痛发生率(6.7%)低于执笔组(33.3%)、正向组(30.0%)(χ^(2)=6.667,P=0.010;χ^(2)=5.455,P=0.020),执笔组与正向组比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.077,P=0.781)。反向组、执笔组、正向组声音嘶哑发生率(6.7%、10.0%、3.3%)比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.102,P=0.868)。结论反向握持式置管行左侧VDLT置入术较传统执笔式和正向握持式置管时间短,血流动力学波动小,术后咽喉疼痛发生率低。