中华眼镜蛇蛇毒组分C诱导白血病细胞凋亡作用的研究

研究眼镜蛇蛇毒组分Ｃ诱导白血病细胞凋亡的作用及机制。方法：应用光学显微镜、透射电镜、脱氧核糖核酸（ ＤＮＡ）电泳、流式细胞仪、逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）等方法，观察白血病细胞经过眼镜蛇蛇毒组分Ｃ处理后，形态学、生物化学及ＢｃＩ－２／Ｂａｘ基因表达水平的变化。结果：眼镜蛇蛇毒组分Ｃ能诱导人粒细胞白血病细胞系（ＨＬ６０）发生凋亡形态学和生物化学变化；流式细胞议分析发现眼镜蛇蛇毒组分Ｃ能使一定比例的人粒单细胞白血病细胞系（Ｊ６－１）、人红白血病细胞系（Ｋ５６２）、ＨＬ６０。细胞及取自患者骨髓的白血病细胞发生凋亡，而且凋亡率随蛇毒浓度的增高而增加；ＲＴ－ＰＣＲ方法检测发现眼镜蛇蛇毒组分Ｃ能使ＨＬ６０细胞Ｂｃｌ－２基因的表达下调，而Ｂａｘ变化不明显。结论：眼镜蛇蛇毒组分Ｃ能诱导白血病细胞发生凋亡，此作用与Ｂｃｌ－２基因的表达下调有关。

复方丹参注射液增强白血病细胞放射敏感性作用的研究

目的 :探索复方丹参注射液对白血病细胞放射敏感性的影响。方法 :采用半固体琼脂集落培养及流式细胞仪法 ,观察HL60细胞株及新鲜白血病细胞经过药物作用后 ,其放射敏感性的变化。结果 :复方丹参注射液与HL60细胞混合培养后照射 ,细胞存活曲线斜率的倒数 (D0 )、放射剂量为 2Gy时的活存比率 (SF2 )分别由 1 5 3、0 3 4降至 0 93、0 1 2 ,细胞凋亡显著增多 ;这种效应与药物浓度及作用时间存在良好的相关性 ;放射诱导的新鲜白血病细胞凋亡率与对照组 (5 89± 2 91 % )相比 ,复方丹参组 (1 2 0 5± 3 0 6% )明显增加。结论 :复方丹参注射液具有明显的放射增敏效应。

CAG方案治疗中高危骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病的疗效观察

目的:观察阿糖胞苷、阿克拉霉素和粒细胞集落刺激因子联合方案(CAG方案)治疗中、高危骨髓增生异常综合征(MDS)和老年初治、难治、复发和继发于MDS的急性髓系白血病(AML)的临床疗效及不良反应。方法:应用CAG方案治疗MDS9例和AML23例,完成1个疗程后评估疗效,治疗失败患者则退出观察,有效者继续接受1个疗程治疗。结果:9例MDS临床均有效,其中完全缓解4例(44.4%)。部分缓解3例(33.3%),血液学进步伴骨髓缓解1例(11.1%),骨髓缓解1例(11.1%)。AML临床总有效13例(56.5%),其中完全缓解9例(39.1%),部分缓解4例(17.4%)。大部分患者出现了可以耐受的轻微不良反应,主要表现为骨髓抑制。结论:CAG治疗中、高危MDS和预后差的AML安全有效,长期疗效需进一步观察。

表皮生长因子受体在血液系统疾病中表达的研究

目的：为研究ＥＧＦＲ在血液系统疾病中的表达情况，并探讨ＥＧＦＲ表达与恶性血液病的关系。方法：应用免疫酶标法检测了４８例恶性血液病（包括急性非淋巴细胞白血病１６例，慢性粒细胞白血病７例，骨髓增生异常综合征２０例，真性红细胞增多症５例）、２１例骨髓良性增生性疾病及４例正常人骨髓细胞的ＥＧＦＲ表达情况，以Ａ４３２细胞系为阳性对照。结果：在正常人及骨髓良性增生性疾病患者的骨髓细胞中未见ＥＧＦＲ表达，在恶性血液病患者的骨髓细胞中也未见ＥＧＦＲ表达。结论：研究结果表明ＥＧＦＲ可能在人类骨髓造血细胞中较少表达，ＥＧＦＲ的表达较少参与人类恶性血液病的发生与发展。

髓系过氧化物酶和苏丹黑B染色缺乏的急性变异型早幼粒细胞性白血病2例报道

目的 :探讨急性变异型早幼粒细胞性白血病 (M3v)髓系过氧化物酶 (MPO)和苏丹黑B(SBB)染色缺乏的意义。方法 :报告 2例MPO和SBB染色缺乏的急性变异型早幼粒细胞性白血病 ,对 2例急性变异型早幼粒细胞性白血病进行细胞化学染色。结果 :例 1患者骨髓涂片原始 (粒 )细胞 4 .0 % ,微颗粒型早幼 (粒 )细胞 90 .0 % ;细胞化学染色氯醋酸酯酶 (chloroacetateesterase ,CE)阳性率 98.0 % ,MPO、SBB阳性率仅为 1 8.0 %、8.0 % ;例 2患者骨髓涂片原始 (粒 )细胞 30 .5 % ,微颗粒型早幼粒细胞 64 .0 % ;细胞化学染色CE阳性率 72 .0 % ,MPO、SBB均为阴性。 2例患者均使用全反式维甲酸治疗 ,例 1患者 3天后放弃治疗 ,例 2获得缓解 ,但拒绝化疗 ,于 2 81天后因复发死于颅内出血。结论 :极少数急性变异型早幼粒细胞性白血病细胞可出现MPO、SBB染色缺乏 。

IFN-α联合IL-2激活的骨髓对白血病细胞的细胞毒作用

IL-2不仅能激活外周血淋巴细胞诱导LAK活性,也能作用于骨髓细胞形成激活骨髓(ABM)。ABM的抗肿瘤效应强于LAK细胞。IFN—α能增加NK细胞和CTL活性。IFN—α和IL—2联合应用能够增强IL—2诱导的LAK细胞和ABM的抗肿瘤效应。本实验观察了联合IFN—α和IL-2激活的骨髓对白血病细胞的细胞毒作用。

急性髓系白血病M2b型分子生物学特征的鉴定

目的 :研究急性髓系白血病 (AML) M2 b细胞遗传学和分子生物学特征 ,探讨 AML- M2 b与 t(8;2 1)白血病的关系。方法 :应用 G显带技术分析染色体核型 ,用 RT- PCR法检测 AML 1/ MTG8融合基因转录本并进行微量残留白血病检测 ,采用 Southern Blot技术检测 AML 1及 MTG8基因重排。结果 :86 .1% (31/ 36例 )的 AML -M2 b具有 t(8;2 1) ,13.9% (5 / 36例 )无 t(8;2 1)。在 AML- M2 b中 ,AML1/ MTG8融合基因转录本的检出率为10 0 % (44 / 44例 ) ,其中包括 5例无 t(8;2 1)的病例 ,AML1基因和 MTG8基因的重排检出率分别为 81.8%和71.0 %。 13例完全缓解 (CR)的 AML- M2 b中 12例可检出 AML1/ MTG8融合基因转录本。结论 :AML- M2 b与国际上的 t(8;2 1)白血病所指为同一疾病实体 ,AML 1/ ETO融合基因是这种疾病的基因标志 ,AML - M2 b可分为 t(8;2 1) (+) AML 1/ ETO(+) AML - M2 b和 t(8;2 1) (- ) AML 1/ ETO(+) AML - M2 b。经化疗获 CR的 AML - M2 b仍可检出微量残留白血病细胞。

急性髓系白血病M_(2b)型分子水平特征的鉴定

急性髓系白血病（AML）M2b是我所在50年代末根据形态学和临床特点提出的一个AML特殊亚型,该亚型已于1986年被正式纳入我国白血病分型方案。对于该亚型的临床表现、细胞化学染色、超微结构等已进行了较祥细的研究。初步的染色体核型分析表明AML-M2b常有t（8;21）染色体易位。国际上于70年代从染色体异常的特点提出t（8;21）白血病。

中华眼镜蛇毒组分C抗白血病作用的实验研究

目的 :研究眼镜蛇毒组分C对白血病细胞的直接作用及机制。方法 :应用MTT、DNA电泳、流式细胞仪、RT_PCR等方法 ,观察眼镜蛇毒组分C对HL6 0等 9株白血病细胞系的毒性作用、量效关系及白血病细胞经过眼镜蛇毒组分C处理后的生物化学、Bcl - 2 /Bax表达水平变化。结果 :眼镜蛇毒组分对 9株人白血病细胞系均有明显的抑制作用 ,IC50 为 0 .0 0 4 6～ 4 .4 0 μg/ml,且呈较好的量效关系 (r为 0 .6 6～ 0 .99)。眼镜蛇毒组分C能诱导HL6 0细胞发生凋亡生物化学变化 ;流式细胞仪分析发现眼镜蛇毒组分C能使一定比例的J6_1、56 2、HL6 0细胞发生凋亡 ,而且凋亡率随蛇毒浓度的增高而增加 ;RT_PCR方法检测发现眼镜蛇毒组分C能使HL6 0细胞Bcl_2基因的表达下调 ,而Bax变化不明显。结论 :眼镜蛇毒组分C对多种白血病细胞株均具有较强的抑制作用 ;此种抑制作用与剂量呈正相关。眼镜蛇毒组分C能诱导白血病细胞发生凋亡 ,此作用与Bcl_2基因的表达下调有关。

骨髓增生异常综合征RAEB、RAEB-T和老年急性髓系白血病的临床对照分析

目的：在WHO分类中，FAB分型中的骨髓增生异常综合征一难治性贫血伴原始细胞增多转化型（MDS—RAEBT）被划分为急性髓系白血病（AML），本文探讨该划分的合理性。方法：采用病例对照研究比较58例老年AML患者、88例骨髓增生异常综合征-难治性贫血伴原始细胞增多（MDS-RAEB）10％～19％（骨髓原始细胞10％～19％）患者和37例MDS-RAEBT患者在临床和染色体核型及共同累及的染色体异常类型上的区别。结果：MDS-RAEBT和MDS-RAEB在病程、WBC、Hb、肝脾肿大比例、正常核型和复杂核型比例及共同累及的染色体异常类型上差异无统计学意义，而和老年AMI，患者比较差异有统计学意义。结论：MDS-RAEBT应该划分为MDS，该结论有待于前瞻性实验进一步验证。

骨髓增生异常综合征髓系细胞免疫表型的研究进展

骨髓增生异常综合征(MDS)是一组与髓系白血病密切相关的恶性克隆性疾病。其髓系细胞不仅形态及功能异常,且免疫表型——即分化抗原的表达——也非同一般。现就该方面研究进展介绍如下。 一、简史 1983年,Scott等发现,MDS病人粒细胞内含有较高浓度的单核细胞同功酶。

血液病的克隆分析

血液病的克隆分析旨在通过各种不同的方法研究各种血细胞的来源,从而推断疾病起病的分化阶段,以及细胞增殖是单克隆性或多克隆性.检测方法主要有X连锁基因分析、淋巴细胞分析和体细胞突变分析等,它们各自有固有的优缺点。近年来,随着检测手段的不断改进与增多,临床应用研究范畴亦已得到扩展.克隆分析有助于我们了解疾病的性质,为诊断和鉴别诊断、疗效监测提供了新的有力工具,并且据此提出了白血病克隆性缓解的新概念.

单克隆抗体体外大容量骨髓净化白血病的研究

应用补体介导细胞毒法体外消除２例白血病骨髓中残存瘤细胞，并作自身骨髓移植。用国产ＣＤ７单抗（ＬＮ６７－８及ＬＳ９３－２，ＩｇＧ２ｂ）首次净化１例Ｔ－ＡＬＬ骨髓及ＣＤ１０单抗（５５，ＩｇＧ２ａ）净化１例ＣＡＬＬＡ＋－ＡＬＬ。靶细胞清除率均达３个对数级，骨髓ＣＦＵ－ＧＭ回收率分别为５７．６％～７５．８％及５１．７％～７２．３％。Ｔ－ＡＬＬ病人移植后２６天获造血重建。现已完全缓解３年，首次证实国产单抗ＬＮ６７－８及ＬＳ９３－２净化骨髓有效、安全。

MDS免疫发病机制及相应治疗的研究进展

骨髓增生异常综合征(MDS)是一组异质性很大的血液系统恶性疾病,病因至今未明。近年发现,一些MDS患者存在着T细胞介导的造血抑制、骨髓细胞凋亡增加和免疫细胞功能异常,而且免疫抑制治疗有效,表明免疫异常至少在部分MDS患者的发病机制中占有重要位置。

髓系肿瘤染色体核型的研究

染色体核型不仅是急性髓系白血病(AML)和骨髓增生异常综合征(MDS)诊断分型和治疗策略制定的主要依据,同时可揭示AML和MDS发生、发展的本质.

嗜酸粒细胞白血病诊断标准探讨(附4例报告)

目的 :探讨嗜酸粒细胞白血病 (Eo L)的诊断标准。方法 :回顾性分析了 4例患者的临床资料 ,同时对有关文献进行了复习。结果 :Eol是嗜酸粒细胞恶性增殖性疾病 ,随访 2例治疗后死亡 ,1例 CR,1例出院不详。结论 :建议分型诊断标准为 :(1)急性嗜酸粒细胞白血病 :1外周血嗜酸粒细胞持续增高 (>1.5× 10 9/ L ) ,并出现不成熟嗜酸粒细胞和 /或不成熟粒细胞 ,有进行性血红蛋白和血小板减少 ;2骨髓原始粒细胞≥ 5 % ,各阶段嗜酸粒细胞增多 ,≥ 30 % ;3有嗜酸粒细胞恶性增殖的证据。 (2 )慢性嗜酸粒细胞白血病 :1外周血成熟嗜酸粒细胞持续增高(>1.5× 10 9/ L) ;2骨髓嗜酸粒细胞≥ 30 % ;3能除外其它已知原因所致的嗜酸粒细胞增多 ;4肝、脾肿大伴贫血和血小板减少或有嗜酸粒细胞恶性增殖的证据。

红白血病MIC特征分析

回顾分析了７例红白血病（急性髓系白血病Ｍ６）的形态学、免疫学、细胞遗传学特征。血象示二系或是三系减少，可见数量不等的有核红细胞。骨髓主要累及红系和粒系，但大部分患者有三系病态造血，有核红细胞ＰＡＳ染色呈阳性。白血病细胞主要表达血型糖蛋白、ＣＤ１３和ＣＤ３８。大部分患者有染色体核型异常，但均为随机非特异性改变。

干扰素-α对LTBMC中慢性粒细胞白血病细胞作用的体外研究

通过体外骨髓长期液体培养(LTBMC)，我们研究了IFN-α对CML细胞的作用。在LTBMCk ,于培养开始加一次IFN-α(10^2，10^3,10^4U／ml)，对非贴壁层的细胞数和基质细胞层的形成无明显影响．但大剂量IFN-α（10^3U和10^4U／ml组)对非贴壁层CFU-GM抑制明显；每周连续加用IFN-α（10，10^2，10^3U／ml)，对非贴壁层细胞数和CFU-GM抑制明显，而且INF-α浓度愈高．贴壁层的形成愈少。联合INF-α和LTBMC可使部分病人非贴壁层Ph(+)染色体提前消失或Ph(-)比例提高。上述结果表明IFN-α，优先抑制晚期CFu-GM，对基质细胞也有抑制作用，LTBMC联合INF-α对Ph(+)CML细胞有协向净化作用。

肿瘤抑制基因p53及其拮抗癌基因mdm2在急性白血病发病机制中的作用(英文)

研究了41例急性白血病患者以及两个白血病细胞系K051与HL-60中肿瘤抑制基因p53及其拮抗基因mdm2的改变和相互关系。研究结果如下:①在可分析结果的33例急性白血病中,13例有染色体异常,但未发现与上述两个癌基因有关的12号或17号染色体异常;②41例急性白血病中8例可能有p53基因突变,发生率为19.5％,高于文献中同类报道的结果。p53基因点突变与急性白血病的FAB分型以及患者的预后无明显关系,主要发生在染色体核型正常的急性白血病患者;③在41例急性白血病患者以及K051和HL-60两个细胞系中未检出mdm2基因的扩增;④发现51.2％(21/41)的急性白血病患者有较高水平的mdm2基因的表达,其中3例同时有p53基因突变(3/21);K051细胞系mdm2基因表达水平较低,而HL-60细胞系的表达水平则较高。mdm2基因的表达水平与白血病FAB分型、染色体异常及p53基因点突变无明显关系,与急性白血病的预后有一定的关系。根据上述结果进行了讨论,认为急性白血病中,虽然p53基因的突变率较低,但是由于其拮抗基因mdm2的过高表达,p53基因的失活仍然可能是急性白血病发生和发展的机制之一。