骨桥蛋白在宫颈组织中的表达及与宫颈癌进展的相关性研究

目的探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在正常宫颈、CIN及宫颈癌组织中的表达与宫颈癌发生、发展、侵袭和转移关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测正常宫颈组织、CIN和宫颈癌组织中OPN的表达情况。结果 OPN在正常宫颈组织、CIN和宫颈癌中的阳性表达率呈上升趋势,三组比较有显著性差异(P<0.05);在CINⅠ组和CINⅡ-Ⅲ组中的阳性表达率呈上升趋势,但两组比较无显著性差异(P>0.05)。在宫颈癌组织中表达:OPN的阳性表达率随临床期别的增加、组织分化程度的降低而增高,差异有显著性;OPN在无淋巴结转移宫颈癌组织中的阳性表达率显著高于有淋巴结转移组(P<0.05)。结论OPN在组织中的阳性表达率由正常宫颈组织→CIN→宫颈癌呈递增趋势,表明了OPN在宫颈癌的发生、发展中发挥了重要的作用。OPN在宫颈癌组织中的表达与宫颈癌的临床分期、组织分化程度及淋巴结转移有一定的相关性,为OPN可望成为判断宫颈癌预后的肿瘤标志物及成为宫颈癌治疗的靶基因奠定基础。

自杀基因联合化疗干预卵巢癌的动物实验研究

目的探讨单纯疱疹病毒胸腺激酶(herpes simplex virus thymidine kinase,HSV-TK)基因/更昔洛韦(ganciclovir,GCV)系统联合化疗药物拓扑替康(Topotecan)对卵巢癌细胞NuTu-19杀伤作用及自杀基因系统与化疗药物不同的给药次序的疗效差异。为临床治疗提供最佳方案。方法常规方法培养PA317/TK细胞、NuTu-19细胞;耐药集落形成法测定病毒滴度;自杀基因转导,PCR方法检测TK基因阳性克隆细胞;测定NuTu-tk细胞对GCV敏感性;建立动物模型:接种NuTu-19细胞及同时接种PA317/TK细胞和NuTu-19细胞的大鼠成瘤后应用化疗药物(Topotecan),GCV及GCV联合化疗药物,测量肿瘤大小并计算抑瘤率。结果经PCR检测证实PA317/TK已经导入NuTu-19中;GCV浓度在0.01-30时对NuTu–tk细胞均有明显的杀伤作用,GCV对NuTu–tk细胞的杀伤率与其浓度呈明显正相关(r=0.612,t=2.04,P<0.01);大鼠接种肿瘤细胞后10-12天局部长出约0.4×0.5cm大小的肿瘤,然后局部逐渐呈膨胀性生长,质硬,活动,与腹壁不粘连,呈球形或椭圆形或多分叶状实体瘤,表面可见丰富皮下血管网;HSV-TK/GCV系统、Topotecan及HSV-TK/GCV联合Topotecan对大鼠皮下移植肿瘤有抑制作用;先给自杀基因组较先给化疗药物组疗效明显,均有统计学意义。结论 HSV-TK/GCV与拓扑替康联合杀伤卵巢癌细胞有协同作用;先用HSV-TK/GCV后用拓扑替康治疗效果最佳。自杀基因联合化疗治疗卵巢癌的动物实验研究为HSV-TK自杀基因系统的临床应用提供了实验基础,也为复发性、难治性卵巢癌患者治疗开辟新的途径。

人参多糖的提取分离及其体外抗肿瘤作用

目的:从人参中提取分离人参多糖,对其进行初步鉴定分析,观察人参多糖的体外抗肿瘤活性。方法:采用水提醇沉法和Sevage法提取人参多糖,应用红外光谱对其结构进行初步的鉴定分析;小鼠前列腺癌RM-1细胞株和人宫颈癌HeLa细胞株分为对照组和不同浓度(50、100、200、300、400和500mg·L-1)人参多糖组,MTT法检测各组细胞的生长抑制情况,通过细胞毒性T细胞(CTL)实验检测不同浓度人参多糖对肿瘤细胞的间接杀伤作用,即细胞毒性乳酸脱氢酶(LDH)释放率。结果:人参多糖的提取率为8.76%,经鉴定成分为多糖。MTT实验,不同浓度人参多糖处理RM-1和HeLa细胞24h后,与对照组比较,各浓度人参多糖组细胞存活率差异均无统计学意义(P>0.05)。CTL实验,与对照组比较,不同浓度人参多糖组细胞毒性LDH释放率显著升高(P<0.05);随着人参多糖浓度的增加,细胞毒性LDH释放率先升高后降低,人参多糖浓度为100mg·L-1时,细胞毒性LDH释放率最大。结论:人参多糖可以通过激活T细胞来间接抑制肿瘤细胞生长,起到抗肿瘤的作用。

晚期结直肠癌患者DC-CIK免疫干预前后D二聚体改变的临床研究

目的探讨DC-CIK免疫干预前后晚期结直肠癌患者凝血功能及D二聚体的变化。方法选择DC-CIK免疫干预的40位晚期结直肠癌患者,在G-CSF动员前5天内及DC-CIK免疫干预1个月后行凝血功能及D二聚体的检测。选择健康成年人43例行凝血功能及D二聚体检测作为对照。比较DC-CIK免疫干预前、后及健康成年人的凝血功能及D二聚体的差异。结果 C-CIK免疫治疗后D二聚体明显降低(P=0.005),但仍明显高于健康成年人(P=0.03),FIB也明显下降但未显示统计学差异(P=0.067)。结论 DC-CIK免疫干预可降低晚期结直肠癌患者的D二聚体水平,降低静脉血栓风险。

卵巢癌抗原冲击DC在体外对SKOV3细胞作用的研究

目的探讨卵巢癌患者外周血和腹水中培养的树突细胞(DC)在体外激活淋巴细胞产生的肿瘤特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)作用,及其对卵巢癌SKOV3细胞的杀伤作用。方法分别培养卵巢癌患者外周血及腹水来源DC,进行细胞形态学观察及细胞表面分子表达检测;以卵巢癌冻融抗原致敏DC,检测两种来源DC刺激T淋巴细胞增殖的能力及对IL-2水平的影响;检测抗原负载DC与T细胞诱导CTL对卵巢癌细胞的杀伤作用。结果镜下显示卵巢癌患者外周血及腹水来源的DC形态学无明显差异,腹水来源DC成熟时间较外周血来源DC晚,二者表面分子表达的阳性率除CD83外无明显差异;卵巢癌冻融抗原负载DC上调其表面相关分化抗原表达,统计学差异具有显著性(P<0.05);经卵巢癌冻融抗原负载后的DC刺激T淋巴细胞的增殖,差异有显著性(P<0.05),但两种来源DC间刺激指数无统计学差异;抗原负载DC与无抗原负载DC相比,其上清中IL-12浓度增高,差异具有显著性(P<0.05);负载与不负载抗原的DC对卵巢癌细胞杀伤作用增强,与对照组相比具有显著性差异(P<0.05),随着效应细胞数量的增高,杀伤作用增强,加入IL-2增强其杀伤作用,但外周血及腹水来源DC间相应情况下对卵巢癌细胞的杀伤作用无统计学差异(P<0.05)。结论卵巢癌患者外周血及腹水来源的DC均具有诱导CTL作用,DC作为载体负载肿瘤抗原后可以激发T淋巴细胞形成CTL,在体外有效的杀伤卵巢癌SKOV3细胞。

LPS温控凝胶实验性角膜基质炎动物模型的创建

临床上,角膜炎症是导致视力丧失的主要致盲原因。其致病机理复杂,感染性和免疫性因素相互交织,外在毒力和机体固有免疫反应互相影响;其诱发原因多样,细菌、真菌、病毒以及其代谢产物等。角膜炎症的动物模型对于研究其复杂的致病机理至关重要，是临床和科研上不可或缺的研究工具。一直以来，角膜基质炎的动物模型最普遍的建立方法为基质内注射，或者是菌液，

两种手术方式治疗卵巢内膜异位症囊肿合并不孕的临床比较性研究

目的:对开腹手术和腹腔镜手术治疗卵巢子宫内膜异位症囊肿合并不孕进行临床比较性研究。方法:将入组的107例卵巢内膜异位症囊肿合并不孕患者根据手术方式的不同分为腹腔镜组54例和开腹组53例,统计两组术后18个月的妊娠率和受孕时间。结果:腹腔镜组术后总妊娠率(50.0%)明显高于开腹组术后总妊娠率(28.3%),差异有统计学意义(P<0.05),而且术后能较早受孕。结论:腹腔镜手术是治疗卵巢内膜异位症囊肿合并不孕的首选治疗手段。