白地霉脂肪酶固定化及其催化光皮树油合成生物柴油的研究

本文采用响应面分析法对树脂NKA-Ⅱ固定脂肪酶的条件进行优化,并对其酶学性质和在催化光皮树油合成生物柴油中的操作稳定性进行了简单的探讨。首先通过单因素试验研究酶液/载体比、温度、缓冲液pH值等条件对固定化脂肪酶酶活力的影响,在此基础上,利用响应面试验设计对树脂NKA-Ⅱ固定化脂肪酶的条件进行优化,用制备的固定脂肪酶催化光皮树油和甲醇反应合成生物柴油。结果表明:酶液/载体比、温度和缓冲液pH值对固定化酶的活力都有影响,树脂NKA-Ⅱ固定化脂肪酶的最佳固定条件是:酶液/载体比为4∶1、温度为39℃、缓冲液pH值为7.5,固定化脂肪酶湿重活力高达216.2±4.5U/g,生物柴油转化率达90%以上。将响应面法应用于树脂NKA-Ⅱ固定化脂肪酶条件的优化是可行的,制备的固定脂肪酶具有工业化生产的潜力。

Penicillium sp. 1523产柚苷酶摇瓶发酵培养基优化

采用单因素试验、Plackett-Burman设计和响应面分析相结合的方法,对Penicillium sp.1523产柚苷酶的摇瓶发酵培养基配方进行优化。单因素试验结果显示:发酵培养基中的最优碳源为玉米粉,最优氮源为豆饼粉;Plackett-Burman设计筛选出影响柚苷酶产量的3个重要因素为玉米粉、豆饼粉和柚苷,在此基础上运用最陡爬坡试验逼近最大响应值区域,再利用Box-Behnken试验设计及响应面分析法进行回归分析,获得最佳培养基配方为:玉米粉31.14g/L、豆饼粉31.53g/L、柚苷1.65g/L、K2HPO4 1.00g/L、ZnSO4 0.10g/L、MgSO4.7H2O 0.06g/L、CaCl20.10g/L。在优化后的条件下摇瓶发酵产柚苷酶酶活力为(891.79±6.33)U/mL,与模型预测值接近,发酵产酶量比优化前提高70.8%。

重组巨大芽孢杆菌产青霉素G酰化酶发酵条件研究

对重组巨大芽孢杆菌产胞外青霉素G酰化酶的发酵条件进行优化。先用单因素实验确定最适碳源、氮源以及碳源浓度、氮源浓度、发酵时间和发酵温度的范围。采用Box-Behnken实验设计和响应面分析方法,对重组巨大芽孢杆菌产青霉素G酰化酶的发酵条件进行优化,得出其最佳发酵条件为:葡萄糖32 g/L、胰蛋白胨17 g/L、时间42.5 h、温度34℃,在此条件下青霉素G酰化酶的活力达到10 614±8 U/L,较优化前提高了16.83%。

固定化脂肪酶研究进展

固定化脂肪酶由于其易与底物分离且可重复使用而备受关注。综述了常用的固定化方法,包括物理吸附法、共价交联法和包埋法,不同的固定化方法对酶的性质有不同的影响。

玉米芯固定化单宁酶的工艺条件优化

探讨改性玉米芯固定化单宁酶的工艺条件。采用Box-Behnkens试验设计和响应面分析方法,对改性玉米芯固定化单宁酶的条件进行优化,得出其最佳工艺条件为:单宁酶酶液与玉米芯载体比26:1(V/m)、pH 6.8、时间8.0h、温度36℃,在此条件下固定化酶活力达到(16085±5)U/g,酶活力回收率为44.68%。对最佳条件下制备的固定化单宁酶的酶学特性进行研究,发现该固定化酶的最适反应pH值为4.5～5,最适反应温度为60℃。

大孔吸附树脂纯化宽叶缬草中缬草素工艺优化

以宽叶缬草中的缬草素提取物为原料,对选取的5种大孔吸附树脂进行静态吸附试验,确定D101树脂为最优吸附树脂。通过D101树脂吸附缬草素的上样量试验与动态洗脱试验,确定上样溶液中缬草素质量浓度为10.0mg/mL,上样体积为20.0mL,洗脱体积为4BV。采用三元二次通用组合试验,考察上样流速、洗脱流速和洗脱液甲醇体积分数对柱层析纯化缬草素效果的影响,建立大孔树脂柱层析纯化缬草素的数学模型,经回归与方差分析,对模型进行局部寻优得出最佳工艺条件为:上样流速2.5BV/h、洗脱流速1.7BV/h,甲醇体积分数75%,纯化后缬草素理论得率为72.40%,验证值为(72.12±0.1)%。

超声波辅助提取缬草素的工艺优化

目的研究缬草中缬草素的提取工艺条件。方法以缬草为原料,采用二次回归通用旋转组合实验设计,探讨超声波辅助提取缬草素的最佳工艺参数。结果确定最优工艺条件为:甲醇浓度80%,超声功率250W,萃取时间5.5min,液料比22∶1,缬草素得率达1.66%±0.02%。结论实验中所选参试因子对超声波辅助缬草素得率影响显著,其顺序为甲醇浓度>超声波功率>提取时间>液料比。