丙酮酸钠对小鼠海马神经HT22细胞神经保护作用

目的研究丙酮酸钠(sodium pyruvate,SP)在低氧条件下对小鼠海马神经细胞HT22的神经保护作用。方法在低氧条件下,用MTS检测不同浓度SP孵育HT22细胞的活性变化;从形态学上,采用铁染色观察SP对HT22细胞的影响;应用溶酶体染色检测SP对HT22细胞的溶酶体变化;采用Western blot检测Bcl-2、Bax和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白的表达。结果5 mmol·L^(-1)的SP能提高HT22细胞活力以及减少HT22细胞损伤;SP提高Bcl-2的表达,降低Bax的表达,使LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加。结论在低氧的条件下给予SP可能通过减少HT22细胞凋亡,激活自噬发挥神经保护作用,从而降低低氧损伤。

BOPPPS模式结合雨课堂在生理学教学中的应用

生理学的学习内容繁多且难度较大,传统的以教师讲解为主的教学方式难以达到良好的教学效果。为了进一步提高学生学习生理学的主动性和积极性,文章探讨了BOPPPS结合“雨课堂”的教学模式在生理学教学中的应用,并通过案例阐述了课堂教学设计的优化,通过教学模式的改革,引导学生主动参与到教学中来,达到学以致用的目的。

基于网络药理学及分子对接分析蒙药嘎日迪-13治疗脑卒中的作用机制

目的:应用网络药理学及分子对接方法分析蒙药嘎日迪-13治疗脑卒中的作用机制。方法:应用TCMSP数据库中各成分口服生物利用度及类药性筛选活性成分,并根据血脑屏障通透性进一步筛选治疗中枢神经系统疾病的活性成分,通过DisGeNET数据库预测嘎日迪-13治疗脑卒中的潜在靶点;对靶点进行基因本体(gene Ontology,GO)、京都基因与基因组百科全书(kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)和蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)分析,筛选关键靶点;应用分子对接验证化合物与关键靶点的结合能力。结果:通过TCMSP数据库筛选得到嘎日迪-13的活性成分58个,获得蒙药嘎日迪-13治疗脑卒中潜在靶点114个;网络分析结果显示,嘎日迪-13通过参与核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路、白介素17(interleukin 17,IL17)信号通路、低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)信号通路等27条通路发挥保护作用,确定关键靶点包括:NOS3、ACE、IL6、TNF、SERPINE1、VEGFA、IL1β、MMP9、CXCL8、TP53以及MAPK1。结论:本研究通过网络药理学及分子对接提供了蒙药嘎日迪-13治疗脑卒中的潜在分子依据,揭示了蒙药嘎日迪-13治疗脑卒中的作用机制,为后续研究及临床应用提供了理论支持。

生理学网络教学资源库建设的初步探索

混合式教学已成为当前信息化教学背景下的主流教学模式。为适应高等教育模式的变革,赵昆激发学生学习生理学知识的主观能动性,生理学教学团队精心设计并组建了网络教学资源库。通过对资源库建设的主要内容和实施策略进行总结,为今后开展线上线下相结合的混合式教学实践,进一步提高教学改革水平奠定基础。

生理学数字教材建设的探索与实践

为适应当今教学模式的转变,围绕以学生为主体,激发学生学习的主动性,配合"线上线下"混合式教学模式,提高生理学授课效果,通过调查分析、精心设计、组建优秀的制作团队、构思、搜寻和制作素材、整理加工等,开发适用于本校学生使用的生理学数字化教材,为互联网时代高校教育的创新发展提供新思路。

基于优慕课的混合式教学在医学生理学教学中应用

目的:探讨基于优慕课的混合式教学模式在医学生理学教学中的应用效果。方法:选择2020级运动康复专业(39人)和临床医学专业(222人)的学生作为研究对象,在生理学的授课中采用基于问题为导向的教学法(PBL)+合作学习+翻转课堂+过程性评价的混合式教学模式,在学期末进行问卷调查。结果:绝大多数学生都喜欢生理学的学习;大部分学生通过一个学期的学习适应了这种教学模式,只有1.53%(4/261)的学生不喜欢这种模式;98.85%(258/261)的学生认为生理学的学习有助于其他课程的学习;95.40%(12/261)的学生认为通过这学期生理学的学习对于他们思考问题的方式产生影响,培养了用医学思维思考问题的能力,93.10%(243/261)的学生认为通过这种授课方式锻炼了他们的表达沟通能力,94.25%(246/261)的学生认为可以帮助他们加强合作交流,96.93%(253/261)的学生认为自主学习的能力有所提升;调查也显示,75.10%(196/261)的学生还是喜欢传统的授课方式;大部分学生都不喜欢在课堂上进行交流、回答问题等,而比较喜欢课下进行课后练习[53.64%(140/261)]、完成章节总结[40.23%(105/261)]或课前对上节课学过的内容进行小测试[50.19%(131/261)]的方式。结论:时代的发展使学习方式发生变化,通过混合式教学可以提高学生的自主学习能力,有助于培养学生用医学思维思考问题的能力,同时通过这种授课方式可以锻炼学生的表达沟通能力,加强学生的合作交流能力。

基于优慕课+数字教材在生理学课程中的实践探索

目的:探讨基于优慕课+数字教材在生理学教学中的实践。方法:在2018级临床医学专业的大学生理学教学中,进行了基于优慕课+数字教材生理学理论课的研究,在学期末对学生进行问卷调查。结果:95.69%的学生认为该数字教材有助于课前的预习,96.98%的学生认为该数字教材有助于课后的复习及重点知识的掌握。98.71%的学生喜欢本章的课后小结,他们认为这可以帮助其对本章的知识点进行梳理,99.14%的学生认为可以帮助其理解知识点并喜欢同步练习,96.55%的学生认为可促进其思考问题。结论:将数字教材应用于生理学理论课的教学中,可调动学生的学习主动性,加深对所学知识的理解,帮助学生做好预习及复习,促进学生思考问题,以提高学习效果。

医学院校《生理学》课程教学改革初探

生理学是医学基础课程中重要的一门,传统生理学教学过程存在诸多问题,从生理学教学模式与考核方法方面进行改革与探索,可促进学生的学习兴趣与学习积极性,提高学生的实践应用能力。

低氧预适应对小鼠海马HT22细胞线粒体能量代谢的影响

目的探讨低氧预适应(HPC)对小鼠海马HT22细胞线粒体能量代谢的影响及其可能机制。方法将小鼠海马神经细胞HT22分为对照组、低氧组、HPC组,通过检测各组三磷酸腺苷(ATP)和活性氧(ROS)的水平,以观察HPC对细胞线粒体能量代谢的影响;采用Western blot法检测雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR蛋白和自噬底物P62蛋白的表达;细胞免疫荧光法检测磷酸化mTOR,LysoTracker^(TM)探针检测溶酶体,验证HPC引起细胞代谢改变是否与mTOR/自噬通路有关。结果与对照组相比,低氧组ATP明显下降,ROS水平增加,HPC处理后,ATP水平增加,ROS水平降低。与对照组相比,HPC组磷酸化mTOR表达下调,自噬底物P62表达下调。结论HPC可能通过mTOR/自噬信号通路影响HT22细胞能量代谢从而对HT22细胞发挥保护作用。

临床医生参与联席课堂在生理学“早临床”教学中的尝试

目的:探讨临床医生与基础教师联席授课的生理学案例教学法在医学生“早临床”实践中的意义。方法:以2019级麻醉班和法医班为观察组,2019级影像医学和精神医学班为对照组,在二年级上学期由临床医生和基础教师联席授课,采用翻转课堂模式进行生理学案例教学尝试,通过问卷调查评价教学效果。结果:绝大部分观察组学生认为在医学基础课程学习阶段就较早地采用此种由临床医生亲自指导去接触临床案例的教学方法,可以加强对理论知识的应用和自主学习能力的培养、从而更早地培养临床思维。学生参与愿意高,对这种授课模式持积极肯定态度。与对照组相比,更多观察组学生愿意按时完成课程学习,喜欢拓展阅读和讨论题形式的教学资源,表明观察组学生的学习积极性更高,对学习的广度和深度有更高的要求。更多观察组学生喜欢借助积极提问和交流完成课程学习,而且对自我学习管理能力的认可程度也较高。结论:临床医生与基础教师联席授课的生理学案例教学模式在激发学生学习兴趣、提高学生的学习和交流能力、培养学生的临床思维等方面发挥了积极的作用,为今后在临床医学专业推广生理学的“早临床”教学提供了参考模式。

PLCγ1在小鼠卵母细胞减数分裂恢复中的作用

目的探究磷脂酶(PLC)Cγ1在卵母细胞减数分裂恢复中的作用及机制,进一步阐明卵母细胞成熟的分子机理,为与相关的人体临床应用提供理论基础。方法利用Real-time PCR检测PLC不同亚型在颗粒细胞与卵丘细胞中的表达情况,构建体外卵泡培养模型及COC培养模型研究PLCγ1特异抑制剂U73122对LH及EGF诱导的减数分裂恢复的影响,利用钙离子荧光探针Fluo 3-AM检测胞内钙离子水平变化,酶联免疫法检测胞内cGMP水平变化,利用Real-time PCR、Western blot以及免疫组化检测不同亚型1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP 3R)的表达变化情况。结果研究表明,颗粒细胞与卵丘细胞中Plcγ1 mRNA的表达均显著高于其它亚型(P<0.05),U73122能够有效抑制LH和EGF诱导的卵母细胞减数分裂恢复(P<0.05)以及EGF诱导的卵丘细胞内钙离子水平升高(P<0.05),U73122还显著逆转了EGF介导的胞内cGMP水平下降(P<0.05),此外,研究还发现在颗粒细胞,卵丘细胞与卵母细胞中Itpr1 mRNA的表达量显著高于其它亚型(P<0.05),Western blot与免疫组化的结果也表明IP 3R1在三种细胞中均有表达。结论LH-EGFR信号通过PLCγ1-IP 3R1升高胞内钙离子水平诱导卵母细胞减数分裂恢复。

氟化钠暴露诱导的心肌细胞凋亡中死亡受体通路的作用

目的研究氟化钠(sodium fluoride,NaF)是否通过Fas介导的死亡受体通路导致心肌细胞凋亡,探讨氟中毒致心肌损伤可能的作用机制。方法用0.24、0.48、0.96 mmol·L^(-1) NaF处理H9c2心肌细胞,以制备NaF染毒细胞模型,以不加NaF的组作为对照组。通过CCK-8法检测细胞活力变化,用TUNEL法观察心肌细胞形态和凋亡情况,用Real-time PCR和Western blot方法检测心肌细胞中凋亡相关因子的mRNA和蛋白表达水平。结果NaF可抑制H9c2细胞增殖,改变细胞形态,诱导细胞凋亡,且与染毒剂量及染毒时间有关。与对照组相比,NaF处理H9c2细胞24、48、72 h后,随NaF浓度的增加,Fas、caspase-1、caspase-8、caspase-3 mRNA表达水平明显增加。染毒48 h后,随NaF浓度的增加,H9c2细胞Fas、caspase-1、caspase-8、cleaved caspase-3蛋白表结论NaF可能通过Fas介导的死亡受体通路影响与凋亡相关的基因与蛋白的表达,导致心肌细胞凋亡,进而造成心肌细胞损伤。

DNA甲基化与缺血性脑血管病的关系研究进展

缺血性脑血管病(ICVD)具有高患病率、高发病率、高致残率和高死亡率的特点,其病因繁多,病理机制复杂,且脑缺血与再灌注会引起一系列细胞、分子及调节过程的变化,导致脑功能损伤,DNA甲基化是一种重要的表观遗传调控机制,多发生在基因启动子区CpG岛上,在DNA甲基转移酶的作用下建立和维持其他表观遗传学现象。DNA甲基化在ICVD的发生发展及后续治疗中发挥着作用。本文介绍了DNA甲基化在缺血性脑损伤中发挥作用的机制,对DNA甲基化成为ICVD治疗靶点的潜力进行了展望。

牛冷冻精液保存时间对精液品质及其受精能力的影响

为探究不同冷冻精液保存时间对荷斯坦奶牛精液品质及其受精能力的影响,选取北京奶牛中心冻存1年(A冻精)、冻存3年(B冻精)及冻存13年(C冻精)的3批精液进行研究。利用精子分析仪分析精子运动能力,台盼蓝染色鉴定精子活率,检测精子顶体完整率、线粒体功能以及DNA完整性,利用体外受精技术检测卵裂率和囊胚率,Realtime PCR检测弱精子症相关蛋白基因表达水平。结果显示:3批精液的精子活力和直线性随冷冻时间延长逐渐下降,精子活率也显著下降;3批冷冻精液的卵裂率和囊胚率随冷冻时间延长显著下降;精子线粒体功能分析结果表明,A精液线粒体膜通道孔相对荧光单位(RFU)值和线粒体活性光密度(OD)值最高(P<0.05),C精液最低(P<0.05);精子DNA完整性检测结果显示,随冷冻时间延长,精子拖尾率显著增加;弱精子症相关蛋白的基因表达趋势并未显现出与体外受精结果相一致的趋势。研究证明,随着冷冻保存时间的延长,精子活力、精子线粒体功能以及精子DNA完整性逐渐下降,最终导致精子受精能力下降。

IP3R在LH-EGFR诱导小鼠卵母细胞第一次减数分裂恢复中的作用

目的:探究1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP3R)在促黄体素-表皮生长因子受体(LH-EGFR)信号诱导卵母细胞第一次减数分裂恢复中的作用及机制。方法:构建小鼠卵丘-卵母细胞复合物(COCs)体外培养模型以及卵泡培养模型,研究IP3R特异性抑制剂2-氨乙基二苯基硼酸脂(2-APB)及heparin对LH/EGF诱导减数分裂恢复以及EGF诱导卵丘扩展的影响,利用real-time PCR技术检测卵丘扩展因子的表达,钙离子荧光探针Fluo 3-AM检测胞内钙离子水平变化,酶联免疫法检测胞内cGMP水平变化。结果:IP3R抑制剂2-APB和heparin能够有效抑制EGF诱导的减数分裂恢复(P<0.05),同时显著降低了COCs内cGMP的含量(P<0.05);2-APB和Heparin还能够抑制EGF诱导的卵丘扩展,同时显著降低卵丘扩展因子的mRNA表达水平(P<0.05);激活IP3R可升高细胞内钙离子水平,而2-APB及heparin能够有效降低EGF升高的卵丘细胞内钙离子水平(P<0.05);利用卵泡培养模型进一步的研究表明,2-APB及heparin同样显著抑制了LH诱导的卵母细胞减数分裂恢复(P<0.05)。结论:LH-EGFR信号通路通过IP3R升高卵丘细胞内钙离子水平,诱导卵母细胞第一次减数分裂的恢复。

冷冻保存对公猪精子功能的影响

试验旨在探究公猪精液冷冻保存对其精子功能的影响。取长白猪的鲜精和优质冻精,用精子分析仪检测精子的运动能力,台盼蓝染色检测精子活率,体外受精(IVF)试验检测卵裂率与囊胚率,采用不同功能检测试剂盒检测冻精和鲜精的顶体完整率、线粒体膜通道孔(MPTP)活性、线粒体膜电位(MMP)、线粒体活性、线粒体氧化应激活性氧(ROS)以及精子DNA完整性,实时荧光定量PCR检测弱精子症相关蛋白基因SMCP、TEKT3、DNAH1、TCTE3的表达。结果表明,与猪鲜精相比,猪冻精的活率及活力均显著降低(P<0.05),冻精的顶体完整率也明显下降(P<0.05);冻精的卵裂率和囊胚率显著低于鲜精(P<0.05);精子线粒体功能分析结果显示,冻精的MPTP相对荧光单位值(RFU)、线粒体膜电位荧光比率以及线粒体活性光密度(OD)值均显著低于鲜精(P<0.05);精子线粒体ROS检测发现,冻精的RFU值显著高于鲜精(P<0.05);精子DNA完整性检测结果显示,冻精拖尾率显著高于鲜精(P<0.05);而弱精子症相关蛋白基因的表达与鲜精相比,差异不显著(P>0.05)。综上所述,冷冻导致猪精子活率、活力、线粒体功能、DNA完整性下降,最终使得冷冻精液精子的受精能力降低。

钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ在小鼠卵母细胞减数分裂恢复中的作用

目的:探究钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMK-Ⅱ)在小鼠卵母细胞减数分裂恢复中的作用。方法:构建卵丘卵母细胞复合物(COCs)体外培养模型,研究CaMK-Ⅱ特异抑制剂KN-93及AIP对EGF诱导的减数分裂恢复及卵丘扩展的影响,利用酶联免疫法检测胞内cGMP水平变化。结果:CaMK-Ⅱ抑制剂KN-93及AIP能够有效抑制EGF诱导的减数分裂恢复(P<0.05);KN-93能够抑制EGF诱导的卵丘扩展;KN-93及AIP降低COCs内cGMP的含量(P<0.05)。结论:EGF通过CaMK-Ⅱ诱导小鼠卵母细胞恢复减数分裂。

基于GEO数据库的趋化因子在缺血性脑卒中作用机制研究

目的:应用生物信息学方法分析治疗缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)的作用机制。方法:通过GEO数据库获得治疗IS的潜在靶点,应用基因本体(gene ontology,GO)富集分析及京都基因与基因组百科全书(kyoto gene and genome encyclopedia,KEGG)信号通路富集分析获得靶点参与的信号通路、生物过程、分子功能,通过STRING在线数据库构建分析蛋白质之间的相互作用(protein-protein interaction networks,PPI)网络,导入Cytoscape软件并构建网络,CytoHubba插件筛选出关键靶点。结果:通过数据库筛选获得差异基因156个,其中133个基因上调、23个基因下调,KEGG富集通路分析筛选出靶点参与趋化因子信号通路、NF-κB信号通路等37条信号通路,GO功能富集分析结果表明靶点参与了细胞对脂多糖的反应、白细胞趋化性等多个生物过程。最终确定关键靶点为趋化因子CXC配体8(C-X-C motif chemokine 8,CXCL8)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、CXCL2、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、CXCL1、IL-1β、CC型趋化因子配体4(C-C motif chemokine 4,CCL4)、IL-1α、细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM1)、前列腺素G/H合酶2(prostaglandin G/H synthase 2,PTGS2),关键通路为趋化因子信号通路。结论:所筛选的关键基因可能成为诊断IS的标志物或潜在治疗靶点,并为该病的发病机制研究提供了新的理论依据。

氧糖剥夺/复氧损伤对小鼠小胶质细胞的影响

目的:研究小鼠小胶质细胞在氧糖剥夺/复氧不同时间基因的表达,探讨SOCS3及DNMT1是否参与了缺氧缺血性脑损伤后小胶质细胞的状态变化。方法:构建小胶质细胞氧糖剥夺/复氧(OGD/R)模型,观察小胶质细胞的形态变化,采用凝胶电泳半定量方法检测SOCS3、DNMT1 mRNA在复氧不同时间的表达情况。结果:氧糖剥夺2 h(OGD2h)后细胞由静息状态变为激活状态,复氧不同时间细胞仍有不同程度的损伤。OGD/R组SOCS3、DNMT1的表达水平随复氧时间延长呈动态变化,其中OGD2h/R6h后小胶质细胞SOCS3 mRNA表达水平明显升高(P<0.05),达到表达高峰;OGD2h/R6h后小胶质细胞DNMT1 mRNA表达水平明显降低(P<0.05),OGD2h/R12h明显升高(P<0.05)。结论:SOCS3、DNMT1可能参与了OGD/R损伤后小胶质细胞的活性变化,在其损伤过程中发挥着调控作用。

葡萄糖对大鼠手术切口感染再愈合效果影响的研究

目的:评价葡萄糖粉和高渗葡萄糖液治疗大鼠感染切口愈合的疗效。方法:成年SD大鼠分为对照组、葡萄糖粉组和葡萄糖液组,各10只。各组大鼠脊柱旁0.5 cm处做一长约7 cm的切口,制作切口感染模型。对照组予以常规处理,每日碘伏换药后纱布覆盖切口;葡萄糖粉组在常规处理的基础上,加用葡萄糖粉切口处理;葡萄糖液组在常规处理的基础上,加用40%高渗葡萄糖液切口处理。结果:葡萄糖粉组和葡萄糖液组疗效均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:葡萄糖能有效促进大鼠感染切口的再愈合,值得进一步实践研究。