原生质体融合选育赖氨酸高产菌种的研究

北京棒杆菌1134衍生株与枯草芽孢杆菌151衍生株的原生质体融合得到了一株可以甜菜糖蜜为原料,在摇床与小罐发酵均能稳定产赖氨酸6.50%以上的高产菌株——Q4413。Q4413菌落形态类似于1134株,而菌体形态区别于双亲,呈较短的杆状,无鞭毛,但有较稀疏的纤毛。生理生化研究表明:Q4413耐盐性、蔗糖发酵、石蕊牛奶试验产碱状况酷似151株,而与1134株略有差异;运动性、糊精、柠檬酸盐利用、MR 试验、酪素水解、明胶水解、石蕊牛奶还原,又酷似于1134株而区别于151株;Q4413的最适生长温度、pH 值居双亲之间;Q4413为原养型加三重抗性[Rif^r,AEC^r Nal^r];其细胞 DNA 含量与GC 比测定结果均居双亲之中,而且生物量测定结果也均与双亲有一定的差异。

细菌科间原生质体融合的研究

本文将赖氨酸产生菌——北京棒杆菌1134株进行标记,同时将枯草芽孢杆菌BR151菌株进一步标记后,进行科间原生质体融合的探讨,揭示了科间原生质体融合的可能性。经适宜的条件培养和预处理,再在适宜的条件下,酶解制备亲本株的原生质体,用PEG(MW6000)为聚合剂,经低温短时间处理,将1134衍生株与151衍生株的原生质体进行融合;并在改良的DM_3平皿上加入适量的细胞壁碎片(作引物)与适量的人血清白蛋白制剂,使其再生,结果棒杆菌(在酶解后2.5h.)与枯草芽孢杆菌(酶解后20min)的制备率均已达到99.98％以上,再生率分别达21.3％与90.8％以上。经适温培养48h后,从融合平皿上随机挑出若干个菌落。点种于CM母平皿上,再分别影印于10套选择培养基平皿上,进行鉴定,其融合率达到了3.9×10^(-4)。从菌落形态和菌体形态上可大体分为近1134类型,近151类型和中间类型三种。经连续传代五代后,从融合子中筛选山了几株在摇床上以甜菜糖蜜为原料。产酸水平捉高近一倍的稳定高产融合子。其中Q4413株的产酸率平均达6.56％,10立升小罐发酵产酸率6.52％,糖酸转化率为40.25％,经进一步验证,该菌株的产酸能力和遗传性均是稳定的,为远缘工业微生物育种开辟了新的可行途径。

高产融合子Q4413的形态学与生理生化特征的研究

本文通过对枯草芽孢杆菌BR151衍生株与北京棒杆菌1134衍生株的赖氨酸高产融合子Q4413株的形态学、生理生化特性等方面的研究,揭示了融合子与双亲株在这些方面的差异,为Q4413株确系双亲株的重组子或新的融合子增加了佐证.

融合株Q4413的L-赖氨酸生产研究

Q4413菌株系北京棒状杆菌1134衍生物与枯草芽孢杆菌151衍生物的原生质体的融合株。Q4413株培养在甜菜(糖蜜含糖量12.6％)、K_2HPO_40.15％、MgSO_40.04％、玉米浆1.2％、(NH)_4)_4SO_44％,VH、VB分别为50μg/dl培养基的小型发酵罐内,pH6.5～7.2,30～32℃,发酵75小时。pH值由氨水调节,发酵过程补加糖3.6％。平均产L-赖氨酸6.5％,平均转化率40.2％。 Q4413融合株遗传性能稳定,是一株具有王业生产价值的菌株。

食品级液体浓缩糖化酶制剂的研究

每毫升1万单位的黑曲霉UV—11糖化酶液体曲,经粗滤后,再经硅藻土处理,过滤液清晰透明,5倍超滤浓缩,添加稳定剂和防腐剂,在室温下保温半年,该产品酶存活率在90％以上。制剂质量达到食用级标准。

高产融合子Q4413的遗传学研究

本文通过对枯草芽孢杆菌BR151衍生株与北京棒杆菌1134衍生株的赖氨酸高产融合子Q4413的遗传型研究、生物量(菌体湿重、菌重、菌体体积和菌体密度)测定、DNA含量测定和GC比的研究,揭示了融合子在遗传学方面与双亲株之间的差异,进一步证实了该株确系稳定的重组子或新的融合子.