定量PCR技术在法医学中应用的研究

目的研究荧光定量PCR技术在法医学中的应用。方法应用Taqman技术对法医各种生物检材进行DNA定量。结果该定量PCR技术对各种法医生物检材进行了准确定量,并判断检材中是否存在抑制物,从而指导了后续STR的检验。结论定量PCR技术是法医DNA检验中一项不可缺少的辅助技术。

茚三酮显现汗潜指印的三种操作方法对DNA检测的影响

目的探讨并比较茚三酮显现汗潜指印的3种操作方法,即溶液浸泡法、涂抹法和喷雾法对后续DNA检测带来的影响。方法取16名志愿者的指印分4组,分为茚三酮浸泡法、涂抹法和喷雾法以及空白组,然后提取DNA进行定量和STR分型检测。结果 3种操作方法都会减少汗潜指印DNA的量,喷雾法的损失量最大,浸泡法和涂抹法结果比较接近。结论现场可疑指印检材,应根据检验需要决定指印显现和DNA提取的先后顺序。

两种方法提取汗潜手印DNA的比较研究

目的比较M48和DNeasy○R plant Mini两种方法提取汗潜手印DNA的优劣。方法用M48和DNeasy○Rplant Mini两种方法分别提取16对汗潜手印DNA,并进行DNA定量,比较定量结果。结果 M48法明显比plant Mini法提取到的DNA量多(配对t检验:α=0.05,t=3.45,γ=15,0.002<p<0.005)。结论 M48法提取汗潜手印DNA优于plant Mini法。

荧光定量PCR技术研究线粒体DNA nt16519单核苷酸多态性

目的应用荧光定量PCR技术,建立mtDNA nt16519位点的PCR分型方法。方法应用Primer Express3.0软件,设计1对Taqman MGB探针和1对扩增引物,在探针的5’端分别标记FAM和VIC报告荧光,应用7500荧光定量PCR和直接测序两种方法,分别检测62份血样和18份毛发样本的mtDNA nt16519单核苷酸多态性,比较二种方法结果的一致性。结果62份血样和18份毛发样本均得到了可靠的mtDNA nt16519分型结果。结论建立的荧光定量PCR的分型方法操作简单、结果准确,适用于法医DNA检案。

胶体金技术检测ABO血型的应用

目的研制能使陈旧生物斑迹中所含的ABO血型物质快速溶解的稀释液,利用胶体金技术快速检验法医学中常见的陈旧的生物斑迹的ABO血型表现型。方法溶解生物斑迹中所含的ABO血型物质,利用ABO血型胶体金试剂条,检测72份已知血型的志愿者的血斑、唾液斑以及2份案件中的陈旧血斑(18年前)。结果 72份志愿者及陈旧血斑的ABO血型分型正确、检验快速、操作简便。结论该方法可用于检测法医中常见的陈旧的生物斑迹的ABO血型表现型。

数学课堂教学中学生创新精神的培养

数学教学中对学生创新精神的培养,需要教师以现代教育教学理论为指导,综观全局,充分协调教学中的各种因素,利用教学周边的一切因素,从深层次培养学生数学学习中的创新精神。

线粒体DNA nt8584、nt8701单核苷酸多态性研究

目的建立一种快速、准确的线粒体DNA单核苷酸多态性位点检测方法。方法收集62份无关个体血液样本,应用荧光定量PCR技术研究线粒体DNA nt8584、nt8701位点在中国汉族人群中的多态性。结果 nt8584位点检测到10例nt8584A、52例nt8584G,nt8584A/G变异频率为16∶84;nt8701位点检测到27例nt8701A、35例nt8701G,nt8701A/G变异频率为44∶56。结论所建立的荧光定量PCR方法分型准确、耗时短,适用于法医DNA检验。

利用Identifiler分型系统推断同胞关系

目的探讨自主开发的同胞关系鉴定自动分析软件（ASI）对Identifiler分型系统进行同胞关系鉴定的可行性。方法应用本课题组所开发的软件ASI,对151对同胞及31 224对人工模拟无关个体进行Identifiler系统的15个常染色体STR基因座分型进行分析,计算亲权指数（PI）、同胞关系概率（WFS）和等位基因匹配情况,所获数据进行统计分析,自动计算排序。结果当WFS大于99.999%时,同胞个体占39.07%,无关个体占0%,两组具有显著差异,可以推断两个体同胞关系。当WFS介于1%~99.999%范围内,同胞个体和无关个体有部分重叠,同胞个体占60.93%,无关个体占21.3%,两者具有一定差异,可以通过增加检测STR基因座,再结合案情加作Y-STR、m tDNA检测,以推断两个体是否具有同胞关系。当WFS小于1%时,同胞个体占0%,无关个体占78.7%,可以推断两个体不具有同胞关系。个体间等位基因匹配结果表明：在检测Identifiler体系15个STR基因座时,当两个体常染色体STR基因座的全相同数目≥5时,或全不同数目≤1时,提示为同胞关系;当两个体全不同数目≥6时,或全相同数目≤1时,提示为无关个体,以此作为预测有无同胞关系的界值。结论Identifiler系统及同胞关系鉴定自动分析软件ASI可用于推断同胞关系。

用dHPLC技术检测线粒体DNA编码区单核苷酸多态性

目的研究线粒体DNA(m tDNA)编码区单核苷酸多态性,建立检测m tDNA编码区单核苷酸多态性(SNP)的变性高效液相色谱(dHPLC)方法。方法设计针对线粒体DNA编码区nt10287-10679及nt8507-8805引物,应用dHPLC技术检测其序列多态性。结果100例中国汉族无关个体中,m tDNA nt10287-10679检出13个SNP位点,13种单倍型,基因多样性(H)为70.79%,偶合概率(P)为29.92%;m tDNA nt8507-8805检出10个SNP位点,12种单倍型,H为70.42%,P为30.28%;两段序列联合起来共检出23个SNP位点,23种单倍型,H为84.14%,P为16.70%。结论所建立的dHPLC方法可用于快速、准确地检测m tDNA编码区序列多态性;m tDNA编码区多态性位点作为m tDNA控制区多态性位点的补充,联合应用可以提高m tDNA的个体识别能力。

脱落毛发及毛干DNA的STR分型研究

目的探讨脱落毛发及毛干细胞核DNA提取、含量和STR分型问题。方法对脱落毛发或毛干进行DNA提取和定量,使用低扩增体系、增加循环次数和多次平行扩增等方法扩增DNA样本,采用叠加比较的方法分析STR分型。结果 15cm脱落毛发样品DNA含量大于0.3ng的样品占52.8%,STR分型成功率为55.6%;15cm毛干样品DNA含量大于0.3ng的样品占30.6%,STR分型成功率为25%。结论采用增加循环次数、多次平行扩增等LCN-STR分型方法和Mini-STR试剂盒有助于脱落毛发及毛干的STR基因座分型获得。

一种收集衣服上脱落细胞的新方法

目的建立一种生物脱落细胞的微量提取新方法。方法利用一套自制的“生物细胞提取仪”无损提取衣物等载体上的人体脱落细胞,采用Chelex-100法提取DNA,用不同的试剂盒进行STR复合扩增检验。结果10例检材都得到16个基因座成功分型。结论用该方法提取微量细胞DNA,可获得满意的DNA分型。

浅谈新课程标准下的多媒体数学教学实践

随着新课程标准的颁布与实施,数学教师教学的任务已转变为首先关注每一个学生的情感、态度、价值观和一般能力的发展,为每个学生的终身可持续发展奠定良好的基础。

Y-STR单倍型在大家系中的差异研究

目的研究三种不同的Y-STR分型体系(Yfiler,Yfiler~?Plus和快速突变Y-STRs)在家系遗传过程中所展现出的变异程度。方法选取一遗传关系清晰的汉族家系,利用Yfiler~?Plus复合扩增系统和包含7个快速突变Y-STR基因座的复合扩增系统,得到所采男性样本32个Y-STR基因座的分型数据,统计分析Y-STR单倍型在世代遗传中的变化程度。结果同一家系不同男性个体的Y-STR单倍型具有一定的多样性,并且与Y-STR单倍型包含的基因座数量和基因座突变率有关;当家系中两名男性个体相隔10次减数分裂时,其Yfiler单倍型不一致的概率为7.35%,Yfiler Plus单倍型不一致的概率是91.2%,快速突变Y-STR单倍型不一致的概率则为100%。结论包含不同Y-STR基因座组合的Y-STR单倍型在世代遗传过程中的变化程度差异较大,在亲权鉴定和家系排查过程中特别是当Y-STR分型体系包含快速突变Y-STR基因座时应留心关注。本研究对Y-STR数据库建设中的采样规则和基因座选择也有参考价值。

线粒体DNA编码区的多态性

目的研究线粒体DNA(mtDNA)编码区单核苷酸多态性,建立mtDNA编码区多态性在法庭科学中应用的理论基础。方法针对mtDNA编码区nt8162-8483以及nt13070-13299两段序列设计引物,应用直接测序技术研究其多态性。结果两对引物扩增片段长分别为322bp和230bp,共检测到21种变异,24种单倍型,基因多样性为0.7511,两个无关个体的偶合概率为0.2564。结论线粒体DNA编码区多态性位点作为线粒体DNA控制区多态性位点的补充,联合应用可以提高线粒体DNA在法医学应用中的个体识别能力。

短暂接触性人体脱落细胞DNA检验1例

1案例 1.1案情在某地的一起少女失踪案件中,因案件线索有限,尸体及案发现场均未找到,但失踪少女的银行卡不断被他人消费,通过商场的监控录像发现一男性犯罪嫌疑人不断持此卡消费。

短波紫外照射对汗潜手印DNA检测的影响初探

目的探测短波紫外灯的照射是否会对汗潜手印DNA检测产生影响。方法由每名志愿者在纸张上捺印4枚拇指指印使每枚指印的脱落细胞量保持基本相同,抽取每名志愿者所捺印的一枚指印作为一组,共有四组,将三组指印置于短波紫外灯的照射下,照射时间分别设置为10min﹑30min和1h,还有一组不照射,然后用磁珠法对所有指印提取DNA并进行定量。结果短波紫外灯的照射会对汗潜手印中的DNA造成减损,照射时间越长,减损得越多。结论尽量减少短波紫外灯对汗潜手印照射的时间(可控制在10min内),以保证汗潜手印有足够量的DNA而能被用于STR分型检测。

高校科学教育对小学科学教师的培养现状及改进策略

当前小学科学教师的培养是一个非常值得探讨的问题。本文基于高校对小学科学教师的培养现状及其存在的一些问题,提出了一些建议。