一种快速稳定构建重组杆状病毒的方法

快速稳定地将外源基因插入杆状病毒基因组获得重组杆状病毒,是提高昆虫杆状病毒表达系统应用效率的关键技术之一。在Ac Bacmid的基础上,通过λRed同源重组技术敲除病毒基因组lef2和orf1629基因的3＇端部分序列获得RDAc Bacmid-DualKo,并用Bsu36Ⅰ线性化之后,经重叠PCR获得5＇端和3＇端各含有50 bp同源臂及以绿色荧光蛋白（GFP）基因作为外源基因的表达盒片段,再将线性化杆状病毒载体片段与表达盒片段共转染sf9细胞,3~4 d即可获得重组杆状病毒rvAcBacmid-GFP。SDS-PAGE和Western blot结果表明,被rvAcBacmid-GFP感染的sf9细胞能高效表达绿色荧光蛋白。该方法通过线性化复制缺陷型杆状病毒载体和携带有同源臂及外源基因的重叠PCR片段,在胞内完成同源重组获得重组杆状病毒,避免了繁琐的病毒空斑纯化和分子克隆操作,获得的重组杆状病毒中无不稳定因子BAC及影响下游应用研究的抗性基因,为快速构建重组杆状病毒高效表达外源基因及相关研究应用提供了新的技术平台。

蝽科精巢细胞减数分裂染色体行为及其反映的属种间亲缘关系

为探讨蝽科精巢细胞减数分裂各时期染色体形态和行为差异,以及据此反映的属种间亲缘关系,采用常规染色体制片法对蝽科6属9种精巢细胞减数分裂各期染色体形态特征、行为及精子的形成进行了观察和比较研究。结果表明:蝽科精巢细胞为交叉型减数分裂,"O"型交叉为其典型交叉减数分裂形式。各属种减数分裂各期染色体行为相似,但形态不同。减数分裂各期染色体形态、排列方式,中期染色体相对长度、组成与核型以及精子形态等特征具有属种间差异性。蝽科精巢细胞中期Ⅰ染色体组平均相对长度都为12.5,在进化过程中染色体组长度信息总量不变。基于染色体相对长度的聚类分析结果显示,菜蝽属Eurydema、麦蝽属Aelia、珠蝽属Rubiconia和条蝽属Graphosoma亲缘关系密切,而二星蝽属Stollia与果蝽属Carpocoris关系较近。

中医治疗糖尿病视网膜病变的用药规律研究

本文旨在研究中医治疗糖尿病视网膜病变的用药规律。方法 选取126篇现代和古代中医文献,对使用药物的频数、性味和归经进行分析,并对使用药物进行聚类分析。结果 常用药物主要包括三七、丹参、黄芪、当归等,其中三七和丹参使用频率最高,占75.3%常用药物多属于温性或平性,主要归于脾、肝、肺经。古代文献中常用药物数量较现代文献少,但是使用药物的性味和归经与现代文献相似。综合对比现代和古代文献,可以发现中医治疗糖尿病视网膜病变的用药规律在不同历史时期有所变化,但总体趋势相似。结论 本研究为中医治疗糖尿病视网膜病变提供了一定的参考依据,未来的研究可以更加深入地探究药物的作用机制和疗效评估,为中医药的临床应用提供更加可靠的科学依据。

一种基于无缝克隆构建重组杆状病毒的方法

一些病毒复制过程涉及到断裂双链DNA的修复,主要有同源重组和非同源的末端连接2种修复形式。基于这种修复机制建立了构建重组杆状病毒的无缝克隆方法,采用该方法构建重组病毒的2个主要元件是:线性化的复制缺陷型杆状病毒载体和重组拯救DNA片段。杆状病毒载体经Bsu36Ⅰ酶切后产生2个末端,即切短了的orf1629 3'末端和细菌人工染色体(BAC)末端。其中,含克隆目的基因的重组拯救DNA片段通过同源臂同源重组修复病毒载体orf1629缺失的3'端序列,并通过细胞内的非同源末端连接修复细菌人工染色体片段(BAC)Kanr末端,从而使载体环化产生重组杆状病毒。应用该方法构建重组杆状病毒无需构建重组载体,无需进行重组后筛选,具有成本低、效率高的特点。

多种方法提高高中学生写作水平

高中语文教学中,写作教学是个难题,很多学生怕写作文。学生只要在平日里不断积累素材,掌握一定的写作技巧,多写多练,创设情境展开联想,加上教师的范文引导,写作就不是一件难事。

浅谈高效节水灌溉技术在农田水利工程中的发展与应用

随着经济社会的持续快速发展,高效节水灌溉技术的实践应用迎来了前所未有的重大发展机遇,如何采取有效方法与策略,全面提升高效节水灌溉技术在农田水利工程中的实际应用成效,成为业内广泛关注的焦点课题之一。基于此,本文首先介绍了高效节水灌溉技术的重要性,分析了高效节水灌溉技术在农田水利工程中的应用问题,并结合相关实践经验,分别从创新施工管理理念与技术方法等多个角度与方面,提出了优化高效节水灌溉技术施工管理质量的有效对策,阐述了个人对此的几点浅见,望对高效节水灌溉技术相关实践有所裨益。

探索中职语文阅读教学的提升策略

新课标对中职学生阅读能力的要求进一步提高,教师开展有效的阅读教学,可以为学生成长为高素质技术技能人才奠定基础,满足学生未来职业发展的需要。所以在中职语文阅读教学中,教师要打开思维,根据教学内容和学生的接受能力,合理融入多种元素。

搞好水利建设项目管理确保基础设施工程质量

在我国社会经济快速发展的过程中,对于水利建设项目管理也有了新的管理标准,确保水利建设项目的发展能够适应新时代的发展要求,确保水利施工中的基础设施工程质量。本文首先是描述了在进行水利建设项目时,施工管理的具体内容;其次,分析了当前水利建设项目,施工管理中存在一些的问题;最后,则是针对这些问题,探讨搞好水利建设项目管理、以及确保基础设施工程质量的措施。

农村水利工程施工管理存在的问题及解决措施

在近几年,我国越来越重视对新农村和生态文明的建设,并且为了有效保障农村人民、农业生产等方面的用水需求,使得目前许多农村水利工程都投入实际的施工建设中。而水利工程的建设作为我国目前农村建设的重点,本文首先是探讨了施工管理在农村的水利工程建设中的重要性;其次,分析了我国农村水利工程在施工管理方面中存在不足的地方;最后,针对这些存在的问题,总结几点加强农村水利工程的施工管理的措施。

浅谈诗歌教学中的意境

诗歌的意境,就是指诗人的主观情意和客观物象相互交融而形成的艺术境界。教学古诗时,我们要让学生懂得一些表达技巧,弄清诗中的鲜活形象,从而体会诗人的内心感觉,透彻诗意,读懂诗人。

中医药治疗睑腺炎的临床观察

本研究旨在评估中医药治疗睑腺炎的临床效果。方法 我们回顾性地收集了60例符合中医药诊断标准的18岁至65岁之间的睑腺炎患者作为研究对象。患者被分为观察组和对照组,观察组接受中医药治疗,对照组接受传统西医治疗。结果 观察组患者在症状改善情况方面表现出显著优势,有70%的患者症状显著改善。眼睑炎症程度方面,观察组患者的炎症程度明显减轻。观察组患者的生活质量改善情况也较对照组更显著,70%的患者生活质量得到明显改善。结论 中医药治疗对睑腺炎患者具有显著的临床效果。本研究结果显示,中医药治疗能够有效改善症状、减轻炎症程度和提高生活质量。与传统西医治疗相比,中医药治疗在睑腺炎管理中是一种可行的治疗选择。然而,还需要进一步的大规模研究来进一步验证和探究中医药治疗的机制和长期效果。